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关于藏药独一味提取工艺优化研究
 目的优选独一味水煎煮提取工艺。方法 采用正交试验法,采用出膏率和总黄酮含量为指标,优选工艺条件。结果 独一味水煎煮提取工艺的最佳参数为:加水煎煮3次,每次1 h,第1次加水量为11倍,第2、3次加水量为8倍量。结论 优选的独一味提取工艺能较好地保证制剂的质量。
  【关键词】 独一味;总黄酮;出膏率;正交试验;综合评分
  【Abstract】 Objective To find out the optimum parameters used boiling water extraction from the Herba Lamiophlomis. Methods Used the orthogonal design method, investigated the effects of the ratio of extraction and the content of total flavones. Results The optimum condition was obtained: added eleven folds of water for first time, anded eight folds of water for other twice times, one hours in duration for each time. Conclusion The extraction process shows stabilization and feasibility, can be available for industrial production at large scale.
  【Key words】 Herba lamiophlomis;Ratio of extraction;Content of total flavones;Orthogonal design;Composite score method
  
  独一味为藏族习用药材,为唇形科植物独一味Lamiophlomis rotata(Benth.)Kudo的干燥全草,具有活血止血,祛风止痛,干黄水的功能,用于治疗跌打损伤,外伤出血,风湿痹痛,黄水病[1]。独一味在藏药应用历史悠久,《月王药诊》、《四部医典》、《晶珠本草》等藏医典籍均有记载[2]。
  独一昧胶囊为《中国药典》2000年版[3]及2005年版[4]收载品种,为独一味经水煎煮加工制成,在临床用于治疗妇科和神经外科疾病所致的疼痛[5]、治疗三叉神经痛[6]等疼痛性疾病有较明显的止痛效果,而且同时具有止血、抑菌、提高特异性和非特异性免疫、明显提高人体痛阈等作用,尤其在治疗肿瘤性疼痛时可作为第一阶梯使用的辅助用药,无明显毒副作用及药物成瘾性[7-8]。
  总黄酮是独一味胶囊的有效部位之一,化学研究表明独一味中黄酮类成分主要是芹菜素、木犀草素、槲皮素及其苷类[9],《中国药典》2000年版[3]及2005年版[4]该品种项下收载了水煎煮提取的制法和总黄酮的含量测定方法。独一味片采用单因素考察法以总黄酮含量作为不同提取工艺研究的质量检测方法[10],考察因素和指标不够全面,为提高独一味制剂的质量,降低生产成本和优化提取工艺。
  林天慕等[11]比较溶剂萃取法及大孔吸附树脂梯度洗脱分离法两种方法制备样品,通过小鼠醋酸扭体法及热板法筛选镇痛有效部位,认为独一味镇痛作用的药效物质基础与黄酮及其苷类有一定关系,本文以出膏率和总黄酮含量为考察指标,采用正交试验法研究独一味水煎煮提取工艺。
  1 材料与仪器
  独一味药材由成都安多贸易有限公司提供,经成都中医药大学民族医药研究所鉴定,为唇形科植物独一味Lamiophlomis rotata ( Benth .) Kudo的干燥全草,按《中国药典》2005年版独一味胶囊项下制法规定进行粉碎,粉碎成粗粉。
  仪器:Spectrumlab22PC(上海棱光技术有限公司,编号:20010143);BP121S电子天平(德国Sartorius公司) 
  试剂:乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠等试剂均为分析纯
  对照品:芦丁(中国药品生物制品检定所提供,含量测定用,0080-9705)
  2 方法与结果
  2.1 药材吸水率的测定 取独一味粗粉150 g,加8倍量水浸泡过夜,滤过,测得吸水率为326.9%,即应考虑增加吸水量3倍。
  2.2 正交试验设计 采用正交设计表(L34)安排试验,因素水平表见表1,各试验号使用独一味粗粉均为150 g,进行回流煎煮提取,第1次提取增加吸液量3倍,用200目滤布滤过,合并滤液,作为正交试验中所得的提取液。
  
  2.3 总黄酮含量测定[4] 对照品溶液的制备:精密称取经120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品适量,加70%乙醇制成浓度为0.64 mg/ml的对照品溶液。
  标准曲线的制备:精密量取上述标准溶液1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 ml至25 ml量瓶中,加水至6 ml,加入5%亚硝酸钠溶液1ml,摇匀,放置6 min,加10%硝酸铝溶液1ml,摇匀,放置6 min,加氢氧化钠试液10 ml,再加水至刻度,摇匀,放置15 min;以相应的溶液为空白,照紫外-可见分光光度法(2005版药典一部附录V A),在500 nm的波长处测定吸光度,以吸光度(A)为纵坐标,浓度(C)为横坐标,绘制标准曲线。   测定法:精密称取正交试验中所得的提取液1 ml于25 ml量瓶中,照标准曲线的制备项下的方法,自“加水至6 ml”起依法测定吸收度,从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的重量,计算,即得。

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