Detection of CpG methylations in human mismatch repair gene hMLH1 promoter by denaturing high-performance liquid chromatography (DHPLC)

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摘要 目的:开发一个新奇方法由DHPLC检测CpGmethylation。方法:在DNA与钠重亚硫酸盐被对待以后,失配修理基因hMLHl倡导者被聚合酶链反应(PCR)放大。DHPLC被用来在他们的部分使中毒的温度分开PCR产品。BstUI消化试金也为比较学习被使用。结果:A294bp乐队被PCR在结肠癌房间线RKO和胃的癌症房间线PACM82的每件DNA样品以后获得。这二个乐队能被DHPLC在53掳C(为RKO的保留时间6.7min对为PACM82的6.2min)完全分开。当PACM82不是methylated时,自从methylation能保护C的变换到T并且在重亚硫酸盐治疗以后使更高的C/G满意,我们断定在RKO房间的hMLHl倡导者是methylated,导致推迟的时间。从BstUI消化试金的与那些一致的这些结果。结论:在hMLHl的CpG岛的Methylation能被DHPLC在重亚硫酸盐修正以后方便地检测。
机构地区 不详
出版日期 2000年03月13日(中国期刊网平台首次上网日期,不代表论文的发表时间)
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