摘要
摘要目的观察小干扰RNA(siRNA)靶向沉默干扰素调节因子-8(IRF-8)对缺氧复氧后肺泡上皮细胞凋亡的影响。方法将IRF-8 siRNA、Negative control(NC)siRNA通过脂质转染试剂转染至肺泡上皮细胞株[L2(购自中国上海拜利生物科技有限公司)]，将细胞分为4组，si-IRF-8组，转染含有IRF-8 si-RNA的细胞组；质粒对照组，转染Negative control(NC) siRNA的细胞组；正常对照组，无转染质粒，完全正常培养；阴性对照组，无质粒转染，给与缺氧复氧干预。通过蛋白质印迹法(Western blot)检测肺泡上皮细胞L2细胞株转染后凋亡相关分子标志物：活化的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)；聚合酶链反应(PCR)检测Caspase-3、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)的转录水平变化。组间比较采用独立样本t检验。结果转染IRF-8 siRNA后，L2细胞内IRF-8相对表达水平明显下调，差异有统计学意义[si-RNA组(0.146±0.009)对比si-NC组(1.001±0.055)，t＝15.566，P<0.01]。经过缺氧复氧干预后L2细胞株si-IRF-8组Caspase-3、bax水平(1.877±0.250、1.989±0.145)较si-NC组(3.681±0.292、4.636±1.261)明显降低，差异有统计学意义(t＝－4.686、－5.110，P<0.01)，bcl-2水平在L2细胞的si-IRF-8组(0.837±0.858)较si-NC(0.179±0.533)组显著升高，差异有统计学意义(t＝15.955，P<0.01)；Western blot检测cleaved Caspase-3蛋白的表达水平(0.257±0.051)较质粒对照组(0.485±0.751)明显下调，差异有统计学意义(t＝6.205，P<0.01)。结论IRF-8 si-RNA能特异性下调肺泡上皮细胞L2细胞株中IRF-8的表达，并显著降低缺氧复氧干预后细胞的凋亡水平，其机制可能与下调促凋亡相关蛋白bax、Caspase-3及上调抗凋亡相关蛋白bcl-2的转录过程相关。
出版日期
2020年08月20日（中国期刊网平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
