简介:摘要目的探讨乙烯利暴露对青春期雄性SD大鼠精子质量的影响及机制。方法选取45日龄雄性SD大鼠40只,按照随机数字表法分为对照组和低、中、高剂量实验组,每组10只,分别给予9 g/L盐水溶液和100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg的乙烯利水溶液连续灌胃28 d。取一侧附睾尾制备精子混悬液,检测精子浓度及活力;取睾丸、附睾组织行HE染色,光镜下观察睾丸、附睾组织病理形态变化;检测附睾超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,丙二醛(MDA)水平;采用酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒检测附睾α-葡萄糖苷酶活性、左旋肉碱(LC)水平、核转录因子E-2相关因子(Nrf2)及肉碱转运蛋白(OCTN2)表达水平,以评估乙烯利对附睾的氧化损伤。采用SPSS 26.0软件进行分析,多组间比较采用单因素方差分析,2组间均数比较采用LSD法。结果对照组、低、中、高剂量组精子浓度分别为(40.21±1.94)×109/L、(35.23±2.53) ×109/L、(23.61±2.62)×109/L、(18.86±2.16)×109 /L;活动率分别为(70.98±3.01)%、(57.96±3.75)%、(45.71±2.41)%、(31.23±2.26)%;实验组大鼠附睾精子浓度及活力均明显低于对照组(均P<0.01);对照组,低、中、高剂量组SOD活性:(46.48±2.21) U/mg prot、(38.49±2.56) U/mg prot、(33.80±1.73) U/mg prot、(27.65±2.05) U/mg prot;GSH-Px活性:(21.41±1.95) U/mg prot、(17.32±1.28) U/mg prot、(15.09±0.94) U/mg prot、(14.08±1.23) U/mg prot;MDA水平:(1.41±0.09) nmol/mg prot、(1.59±0.09) nmol/mg prot、(1.81±0.09) nmol/mg prot、(2.16±0.14) nmol/mg prot;实验组SOD和GSH-Px酶活性均明显低于对照组(均P<0.05),而MDA水平则明显高于对照组(P<0.05)。对照组、低、中、高剂量组α-葡萄糖苷酶水平分别为(15.46±0.71) U/mL prot、(12.95±0.72) U/mL prot、(11.34±0.65) U/mL prot、(8.76±0.60) U/mL prot;LC分别为(6.21±0.31) μg/L、(5.89±0.13) μg/L、(5.02±0.12) μg/L、(4.38±0.07) μg/L,与对照组比较,实验组α-葡萄糖苷酶、LC浓度均明显下降(均P<0.01);对照组和低、中、高剂量组附睾Nrf2的表达水平分别为(1.34±0.05) ng/L、(1.25±0.04) ng/L、(1.08±0.06) ng/L、(0.92±0.04) ng/L,OCTN2的表达水平分别为(4.55±0.12) ng/L、(4.23±0.11) ng/L、(3.20±0.24) ng/L、(2.59±0.05) ng/L,与对照组比较,实验组Nrf2、OCTN2表达水平均明显下降(均P<0.01)。结论乙烯利暴露使大鼠生殖器官产生过量活性氧,发生氧化应激,可能通过激活Keap1-Nrf2/ARE信号通路,使其精子数量减少,活力降低,精子质量下降,导致生育能力受损。
简介:摘要目的探讨不同剂量乙烯利不同作用时间下对雄性幼鼠睾丸组织的影响。方法将45日龄健康雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠32只,采用随机数字表法随机分为对照组和低、中、高剂量乙烯利组,取同日龄健康雄性SD大鼠32只与之一对一合笼。每日分别对雌鼠进行灌胃,低、中、高剂量组分别用200、400、800 mg/kg乙烯利水溶液灌胃,对照组采用等量9 g/L盐水,仔鼠出生后,停止给母鼠灌胃,改为给雄性仔鼠灌胃。子代雄鼠于出生0日龄、14日龄、28日龄时,分别从各组采用随机数字表法随机选取12只处死。取新鲜睾丸组织行苏木精-伊红(HE)染色,光镜下观察睾丸组织形态变化。采用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记(TUNEL)法标记凋亡细胞,利用荧光显微镜检测睾丸生精细胞凋亡指数(AI)。结果1.0日龄时高剂量组较中剂量组、低剂量组和对照组生精小管略增粗,生精细胞排列稍紊乱。高剂量组AI(1.00±0.06)明显高于对照组(0.41±0.03),差异有统计学意义( P<0.01);对照组、低剂量组与中剂量组比较差异无统计学意义(P>0.05)。2.14日龄时低、中、高剂量组较对照组生精小管明显增粗,排列疏松,生精细胞数目稀少,排列紊乱。14日龄时低剂量组(2.13±0.10)、中剂量组(2.18±0.10)、高剂量组(3.90±0.23)AI均明显高于对照组(1.00±0.02),差异有统计学意义(F=2 508.36,P<0.01)。中、低剂量组比较AI差异无统计学意义(P>0.05)。3.28日龄时低、中、高剂量组较对照组生精小管显著增粗,排列更疏松,生精细胞数目更少,排列严重紊乱。28日龄时低剂量组(5.52±0.13)、中剂量组(9.44±0.07)、高剂量组(14.56±0.27)AI均明显高于对照组(3.11±0.13),差异有统计学意义(F=10 784.69,P<0.01)。结论乙烯利可引起新生大鼠及幼鼠雄性睾丸生精小管增粗,生殖细胞排列紊乱,生精细胞凋亡增加和生精能力下降;且大鼠接触乙烯利时间越长,乙烯利浓度越高,睾丸组织损伤越严重。