简介:摘要目的探讨miRNA-26a(miR-26a)作用于靶向基因HMGA2在肝癌细胞增殖及迁移中的作用及其机制。方法收集2018年9月至2019年9月经温州市中医院病理证实的肝癌组织标本(n=30)及其癌旁正常组织标本(n=30)。将miR-26a模拟物、对照模拟物(miR-Control)、HMGA2 siRNA或阴性对照siRNA(Control)转染人肝癌细胞株HepG2或Huh-7细胞。采用逆转录-定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-26a在肝癌组织中的表达情况。采用MTT试验和划痕试验测定细胞增殖和迁移能力。采用RT-qPCR和Western blot检测miR-26a与高迁移率组AT-hook 2(HMGA2)mRNA的表达情况。通过生物信息和荧光素酶报告基因分析miR-26a与HMGA2 mRNA的作用关系。结果RT-qPCR结果显示,肝癌组织miR-26a表达水平为(0.11±0.02),较正常组织样本表达量的(0.25±0.03)明显降低(t=21.268,P<0.05);Ⅲ+Ⅳ期miR-26a表达水平为(0.05±0.01),明显低于Ⅰ+Ⅱ期miR-26a表达水平的(0.09±0.01)(t=15.491,P<0.05)。细胞实验表明,miR-26a组在Huh-7[(3.10±0.30),(4.10±0.40)]和HepG2[(3.08±0.31),(4.11±0.40)]细胞中,相比于对照组[(3.90±0.40),(5.50±0.60);(3.92±0.41),(5.49±0.58)]增殖能力降低(t=8.764、10.634,11.148、10.728,均P<0.05),迁移能力[(0.50±0.06),(0.65±0.07)]相比于对照组[(1.00±0.10),(0.96±0.10)]同样明显降低(t=23.483、13.910,均P<0.05)。生物信息学和体外实验表明,HMGA2是miR-26a的直接靶点。恢复miR-26a模拟转染细胞中HMGA2的表达,相比miR-26a组[(0.24±0.02),(0.31±0.03);(0.45±0.05)],可明显逆转miR-26a对肿瘤细胞增殖和迁移的抑制作用[(0.31±0.03),(0.40±0.04);(0.93±0.08)](t=10.634、9.859、27.868,均P<0.05)。结论miR-26a通过直接靶向HMGA2抑制肝癌细胞的增殖和迁移。miR-26a异常降低及其靶点HMGA2升高可能是参与肝癌发生、发展的重要因素。
简介:摘要目的本文旨在研究SKA1是否是调节肝癌恶性增殖的一个关键分子,并进一步探究其机制,为后续靶向治疗提供分子理论基础。方法通过生物信息学技术分析来自TCGA数据库中的肝癌数据,分析了SKA1在肝癌中的表达量,同时,我们还分析了SKA1的表达与肝癌患者预后的关系。采用基于脂质体介导的细胞转染技术,构建过表达SKA1的肝癌细胞系,并进一步采用CCK-8及平板克隆试验检测SKA1对肝癌细胞增殖能力的影响。采用生物信息学技术对SKA1及E2F1表达相关性进行分析,进一步检测E2F1在SKA1启动子区域的结合位点,并采用双荧光素酶技术检测E2F1对SKA1的转录激活作用。结果SKA1在肝癌组织中高表达,且SKA1高表达的肝癌患者的总体生存率(49.8%)比SKA1低表达患者低(69.4%),二者呈负相关。与此同时,E2F1也在肝癌组织中呈高表达,且E2F1高表达肝癌患者生存期显著低于低表达组,与不良预后呈负相关。SKA1过表达可将肝癌细胞的增殖能力提升近50%,SKA1受E2F1转录因子调控,且E2F1转录因子与SKA1启动子结合,转录激活SKA1在肝癌细胞中的表达。结论E2F1转录激活SKA1促进肝癌细胞增殖,导致肝癌患者预后不良。
简介:摘要:语言是我们日常生活中最为重要的沟通方式之一,如何与他人友好沟通则是语言沟通的一些基本技巧,作为一名学生,本就应该熟练这些能力。语言技巧的传授大多是从学生在升初中之后开始的,进入初中的语文教程中,老师会根据该年龄段学生的悟性进行深入浅出的教导, 包括字句,造词,造句,编排等等,这些都是最基础的教学内容。 口语交际是重要的交流方式。初中阶段是学生口语表达能力提高的关键时期,《初中语文新课程标准》对口语交际也提出要求。作为一线的初中语文教师,本文就自己的实际做法谈谈我对初中语文教学中锻炼学生口语交际能力的研究方法。
简介:摘要随着我国素质教育改革的不断深入,在当今时代背景下,我国政府部门已经极为重视教育事业的发展情况,并且正在积极努力地引导各级教育机构进行教育教学的改革工作。从现实的角度分析,在当今信息时代背景下,有效的将一些信息化教学技术应用到地理教学工作当中不仅可以极大地提升地理教育教学的质量,同时还可以极大地提升地理教学的效率。而交互式电子白板同属于一种信息化教学技术,该种技术的有效应用对于地理教育教学的发展有着重要的意义,同时该种技术也是目前在教育教学领域当中应用范围最为广泛的一种技术。本文主要就新技术条件下地理教学——交互式电子白板教学做了简要的分析。
简介:"南岛语族"的起源课题在中、外学术上都有很长的探索历史,西方学者主导的太平洋跨界民族史学研究主要着眼于"今南岛语族"人群的语言学视野,而从所谓"今南岛语族"生存的空间范围去寻找"原南岛语族"的文化起源,忽视了现今已经消亡的、但在壮侗语族和闽、粤等汉语方言中尚保留浓厚的"古南岛语底层因素"的华南地区的材料.我国学者主要是在中国民族史的学术框架中探讨"南岛语族"的文化来源,站在华南百越民族史的学术视野上,充满华南大陆向海洋单线传播、扩散的观点."南岛语族"的起源研究,必须从包括华南在内的亚洲东南海洋地带土著文化史的宏观格局中认识,从历史学、史前考古学、民族考古学、语言学、体质人类学等多学科视角的综合考察,才能得出接近历史真实的结论.
简介:问邹某以个人独资申请设立劳务派遣公司.于2013年7月取得了预先核准的联众劳务派遣有限公司。邹某聘请韩某、郭某为工作人员并以公司的名义与其签定了劳动合同,与出租方签定了房屋租赁协议。申请行政许可时,劳动行政部门以实收资本不足200万元为由做出了不予行政许可的决定,公司登记程序暂告终止。邹某为了不影响到手的业务,于9月份与某矿业公司签定了派遣协议,并实际派遣劳动者60人。劳动行政部门在对劳务派遣进行专项摸底调查中发现,邹某属于未经许可擅自经营劳务派遣业务的行为,某矿业公司随即也做出了不予支付邹某当月管理费3000元的决定。