简介：摘要目的探讨anti-PD-1(scFv)/hIL-15(简称PD-15)融合蛋白体外特异性结合PD-1的能力及联合GF-hIL-15Ra-K562(简称G15Ra-K562)滋养细胞对自然杀伤细胞(NK)/T细胞增殖能力的影响。方法Overlap PCR构建G15Ra表达载体，电穿孔仪转染K562，极限稀释法获取G15Ra-K562滋养细胞单克隆株。酶切连接构建PD-15表达载体，Lipofectamine™ 2000瞬时转染HEK293T细胞并获取包含PD-15融合蛋白的条件培养液。密度梯度离心获取人外周血单个核细胞，CFSE染色标记活跃增殖细胞。流式细胞术检测PD-15特异性结合PD-1的能力和对人外周血单个核细胞的增殖及不同淋巴亚群比例的影响。结果成功构建高表达融合蛋白G15Ra的滋养细胞单克隆株G15Ra-K562。添加hIL-15能够将G15Ra-K562滋养细胞扩增人外周血淋巴细胞能力提升5倍以上(P<0.05)。PD-15融合蛋白具有PD-1特异性结合能力(P<0.001)，联合G15Ra-K562滋养细胞能够在体外高效扩增人外周血来源的NK/T细胞(P<0.05)，扩增得到的细胞产品中以NK、CD8+T和CD4+T细胞为主。结论PD-15融合蛋白能够特异性靶向PD-1分子且在联合G15Ra-K562滋养细胞后具有强的人外周血来源的NK/T细胞扩增能力，建立了分步、靶向递送IL-15/IL-15Ra复合物至PD-1+细胞的细胞培养方案，为后续选择性扩增PD-1+细胞提供实验资料。

简介：摘要随着当前城市化进程的不断加快，其不仅仅表现在相应城市规模以及城市人口正在不断提升，相应城市建设水平也取得了较大突破，相应绿色化水平的提升就是其中比较突出的一个方面，这也就涉及到了风景园林的有效建设，其已经成为了当前各个城市建设发展中比较核心的一个环节。在风景园林的建设处理中，相应植物景观的有效建设又是必不可少的一个核心要素，促使植物景观发挥出较强的实效性，最终才能够保障风景园林的运行较为流畅，可持续性效果也比较突出，因此，关注于风景园林中植物景观的有效规划设计也就成为了比较重要的一项任务内容。

简介：摘要针对室内信号设备安装施工特点，制定出施工工艺流程，分析研究室内信号设备安装，来保证让设备安装操作简单、安全可靠且节省成本。