简介：摘要目的基于网络药理学、分子对接与体内实验探究舒尔经胶囊治疗原发性痛经的作用机制。方法运用TCMSP筛选舒尔经胶囊的有效成分及靶点，通过GeneCards、DrungBank数据库检索原发性痛经靶点蛋白，并通过微生信在线平台获取药物和疾病的交集靶点。利用Cytoscape 3.9.1软件构建舒尔经胶囊治疗原发性痛经的成分-靶点网络，通过STRING数据库构建药物-疾病PPI网络，利用DAVID数据库进行GO功能及KEGG通路富集分析。取药物关键活性成分和疾病核心靶点进行分子对接。将大鼠按随机数字表法分为对照组，模型组，舒尔经胶囊低、中、高剂量组（0.15、0.21、0.42 g/kg），布洛芬组（20 mg/kg），每组10只。通过皮下注射苯甲酸雌二醇建立原发性痛经动物模型，并给予相关药物干预。观察大鼠扭体反应次数、子宫收缩抑制率和子宫指数，采用ELISA法检测大鼠血清TNF-α、IL-6、IL-1水平及子宫组织前列腺素G合成酶2（PTGS2）、血管内皮生长因子A（VEGFA）水平。结果得到舒尔经胶囊药物有效成分188个，舒尔经胶囊治疗原发性痛经靶点共51个，其中TNF、IL-6、AKT1、TP53等可能是其关键靶点。共获得519条GO生物过程和119条相关信号通路，其中雌激素、IL-17、HIF-1等信号通路与原发性痛经密切相关。分子对接结果良好，其中豆甾醇与TP53结合能力较强。实验结果表明，与模型组比较，舒尔经胶囊低、中、高剂量组子宫指数与扭体次数降低（P<0.05），子宫收缩抑制率升高（P<0.05）；舒尔经胶囊中、高剂量组血清TNF-α、IL-6、IL-1水平降低（P<0.05），子宫组织中PTGS2、VEGFA水平降低（P<0.05）。结论舒尔经胶囊具有抗炎、改善缺氧等作用，可能与抑制血清中TNF-α、IL-6、IL-1炎症因子及子宫组织中PTGS2、VEGFA蛋白表达有关。

简介：摘要目的醛酮还原酶家族1成员B10（AKR1B10）与肝癌的发病机制、早期诊断和预后密切相关，故探讨AKR1B10在肝癌细胞中对细胞周期的影响及其作用机制。方法采用慢病毒LV-AKR1B10-shRNA感染HepG2细胞，或AKR1B10抑制剂依帕司他处理HepG2细胞，蛋白质印迹法（Western blot）及实时荧光定量PCR法（RT-qPCR）检测AKR1B10的表达水平；通过测定还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸在340 nm处吸光度值的下降检测AKR1B10的活性；CCK-8法及流式细胞术检测AKR1B10低表达及不同浓度依帕司他处理HepG2细胞后对细胞增殖和细胞周期的影响；Western blot检测HepG2细胞中p-Rb，细胞周期蛋白D1、E1，p27的蛋白表达水平；两样本均数采用独立样本t检验。结果AKR1B10在肝癌细胞中表达显著升高，与正常肝细胞相比，HepG2细胞中AKR1B10蛋白相对表达水平为6.71±1.11（P = 0.012）。依帕司他对AKR1B10的酶活性有明显抑制作用，呈剂量依赖性特点。HepG2细胞中AKR1B10基因被有效沉默，不同浓度AKR1B10抑制剂依帕司他处理HepG2细胞24、48、72 h后均可抑制细胞增殖，促进G0/G1细胞周期阻滞，使p-Rb、周期蛋白D1、E1表达降低，周期素依赖性激酶抑制蛋白p27表达升高。结论抑制AKR1B10表达和活性可通过p27/p-Rb通路，促进HepG2细胞G0/G1细胞周期阻滞。