简介:摘要目的探讨钙周期素结合蛋白(CacyBP)对非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其分子机制。方法选取2016年于济南市中心医院行手术治疗的非小细胞肺癌患的肺癌组织和正常癌旁组织标本各6例,采用Western blot法检测肺癌和正常癌旁组织中CacyBP蛋白的表达水平,Western blot和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常支气管上皮细胞16HBE和不同非小细胞肺癌细胞系(A549、H1299、H460和H1975)中CacyBP蛋白和mRNA的表达水平。将siRNA、siCacyBP-1、siCacyBP-2、慢病毒包装质粒shNC和shCacyBP转染至A549细胞(分别记为siNC组、siCacyBP-1组、siCacyBP-2组、shNC组和shCacyBP组),将对照质粒和Flag-CacyBP质粒转染至A549细胞(分别记为NC组和Flag-CacyBP组)。采用细胞计数试剂盒8法、平板克隆实验以及流式细胞术检测细胞增殖能力以及细胞周期情况,细胞划痕和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot法检测敲低或过表达CacyBP A549细胞中E-cadherin、N-cadherin、Snail1、Vimentin和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达。结果CacyBP蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达水平为0.41±0.23,高于正常癌旁组织(0.11±0.04,P<0.05)。不同非小细胞肺癌细胞系(A549、H1299、H460和H1975)CacyBP蛋白的表达水平分别为0.35±0.01、0.38±0.01、0.32±0.01和0.41±0.01,均高于16HBE细胞(0.03±0.01,均P<0.05);RT-PCR结果与Western blot结果一致。与siNC组[吸光度(A)值为1.54±0.03]比较,siCacyBP-1组和siCacyBP-2组细胞增殖能力降低(分别为1.38±0.04和1.34±0.03,均P<0.05)。shNC组细胞克隆形成数为(41.33±3.21)个,高于shCacyBP组[(22.00±3.61)个,P<0.05]。shCacyBP组细胞G1期占比为(61.35±5.45)%,高于shNC组[(49.61±1.54)%,P<0.05];S期占比为(25.41±3.21)%,低于shNC组[(38.68±0.46)%,P<0.05]。shCacyBP组细胞迁移率为(12.67±0.71)%,低于shNC组[(35.50±2.07)%,P<0.05]。shNC组细胞迁移和侵袭的数量分别为(406.33±7.37)个和(92.33±8.50)个,高于shCacyBP组[分别为(224.67±10.01)个和(66.00±7.94)个,均P<0.05]。与siNC组相比,敲低CacyBP的表达,E-cadherin的表达水平升高,N-cadherin、Vimentin、Snail1和p-Akt的表达水平降低(均P<0.05)。与NC组相比,Flag-CacyBP组E-cadherin的表达水平降低,N-cadherin、Vimentin、Snail1和p-Akt的表达水平升高(均P<0.05),PI3K/Akt通路抑制剂LY294002可逆转上述结果。结论CacyBP通过调控Akt通路的活性促进非小细胞肺癌细胞的增殖和侵袭。
简介:摘要目的探讨铅暴露对小鼠神经行为、肠道菌群群落结构的影响及其相关关系。方法于2019年8月,将64只4周龄C57BL/6小鼠随机分为对照组,低、中、高铅暴露组,每组16只。实验期间自由摄食饮水,低、中、高铅暴露组分别在饮用水中加入20、100和500 mg/l醋酸铅,对照组添加同量的醋酸钠。暴露10周后,Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,随后处死取样,采用ICP-MS检测血铅和脑铅含量,ELISA法检测血清中白介素-1β(IL-1β)水平,16S rRNA测序检测粪便中肠道菌群改变,使用Pearson相关系数法对菌群和行为学指标进行相关性分析。结果Morris水迷宫实验显示,与对照组比较,各铅暴露组小鼠体重和游泳速度无明显差异,中、高铅暴露组小鼠的逃避潜伏期延长,平台穿越次数减少,差异有统计学意义(P<0.05);高铅暴露组小鼠在目的象限停留时间低于对照组和其他剂量组,差异均有统计学意义(P<0.05);小鼠的血铅含量随着铅暴露剂量升高而增加,高铅暴露组小鼠脑铅含量与其他组比较明显升高(P<0.05);各铅暴露组小鼠血清中IL-1β水平高于对照组(P<0.05);各铅暴露组小鼠均发生肠道菌群紊乱,在门水平上,变形菌门的相对丰度明显升高(P<0.05),在属水平上,别样棒菌属、脱硫弧菌属、毛螺菌属、苏黎世杆菌属和脲原体属均明显增加(P<0.05);脱硫弧菌属、苏黎世杆菌属和脲原体属的相对丰度与小鼠在平台所在象限的停留时间呈负相关关系(r=-0.32、-0.29、-0.44,P<0.05)。结论铅暴露引起小鼠学习记忆能力的损伤,可能与铅暴露导致小鼠的肠道菌群紊乱有关。
简介:摘要探讨适用本科生流行病学课程的优化教学模式,为提升教学质量提供科学思路和依据。本研究采用非随机同期对照设计,以选修肿瘤流行病学课程的A医科大学和B医科大学2018级预防医学系本科生作为研究对象,A医科大学肿瘤流行病学课程采用传统教学模式授课,B医科大学采用“一核四维”创新教学模式授课。课程结束后,采用问卷法对B医科大学学生课后自我认知、授课教师教学满意度和备课时间进行调查;采用课后测试方法比较两校学生肿瘤流行病学课程成绩差异。结果显示,在B医科大学58名学生中,94.83%(55/58)学生表示熟悉了常见的流行病学研究类型,86.21%(50/58)学生表示掌握了筛查研究的评价指标。在B医科大学9名授课教师中,7人表示新教案有助于学生学习肿瘤流行病学前沿进展知识,8人表示新型教学模式有助于师生之间的互动。采用新型教学模式的B医科大学学生课后测试成绩为(50.34±4.90)分,显著高于A医科大学学生成绩(46.21±4.91)分,差异有统计学意义(t=5.20,P<0.001)。综上,肿瘤流行病学课程优化教学模式获得学生和授课教师的好评,具有提升学生对肿瘤流行病学的掌握程度和理论联系实际能力,提高肿瘤流行病学教学效果的潜能。
简介:摘要目的探讨钙周期素结合蛋白(CacyBP)对非小细胞肺癌细胞增殖和侵袭能力的影响及其分子机制。方法选取2016年于济南市中心医院行手术治疗的非小细胞肺癌患的肺癌组织和正常癌旁组织标本各6例,采用Western blot法检测肺癌和正常癌旁组织中CacyBP蛋白的表达水平,Western blot和逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常支气管上皮细胞16HBE和不同非小细胞肺癌细胞系(A549、H1299、H460和H1975)中CacyBP蛋白和mRNA的表达水平。将siRNA、siCacyBP-1、siCacyBP-2、慢病毒包装质粒shNC和shCacyBP转染至A549细胞(分别记为siNC组、siCacyBP-1组、siCacyBP-2组、shNC组和shCacyBP组),将对照质粒和Flag-CacyBP质粒转染至A549细胞(分别记为NC组和Flag-CacyBP组)。采用细胞计数试剂盒8法、平板克隆实验以及流式细胞术检测细胞增殖能力以及细胞周期情况,细胞划痕和Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot法检测敲低或过表达CacyBP A549细胞中E-cadherin、N-cadherin、Snail1、Vimentin和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达。结果CacyBP蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达水平为0.41±0.23,高于正常癌旁组织(0.11±0.04,P<0.05)。不同非小细胞肺癌细胞系(A549、H1299、H460和H1975)CacyBP蛋白的表达水平分别为0.35±0.01、0.38±0.01、0.32±0.01和0.41±0.01,均高于16HBE细胞(0.03±0.01,均P<0.05);RT-PCR结果与Western blot结果一致。与siNC组[吸光度(A)值为1.54±0.03]比较,siCacyBP-1组和siCacyBP-2组细胞增殖能力降低(分别为1.38±0.04和1.34±0.03,均P<0.05)。shNC组细胞克隆形成数为(41.33±3.21)个,高于shCacyBP组[(22.00±3.61)个,P<0.05]。shCacyBP组细胞G1期占比为(61.35±5.45)%,高于shNC组[(49.61±1.54)%,P<0.05];S期占比为(25.41±3.21)%,低于shNC组[(38.68±0.46)%,P<0.05]。shCacyBP组细胞迁移率为(12.67±0.71)%,低于shNC组[(35.50±2.07)%,P<0.05]。shNC组细胞迁移和侵袭的数量分别为(406.33±7.37)个和(92.33±8.50)个,高于shCacyBP组[分别为(224.67±10.01)个和(66.00±7.94)个,均P<0.05]。与siNC组相比,敲低CacyBP的表达,E-cadherin的表达水平升高,N-cadherin、Vimentin、Snail1和p-Akt的表达水平降低(均P<0.05)。与NC组相比,Flag-CacyBP组E-cadherin的表达水平降低,N-cadherin、Vimentin、Snail1和p-Akt的表达水平升高(均P<0.05),PI3K/Akt通路抑制剂LY294002可逆转上述结果。结论CacyBP通过调控Akt通路的活性促进非小细胞肺癌细胞的增殖和侵袭。
简介:摘要目的分析中国3省城市癌症早诊早治项目地区肺癌高危人群的低剂量螺旋CT(LDCT)筛查依从性及相关因素。方法于2017年10月至2018年10月,以浙江、安徽和辽宁3个省份作为研究现场,招募17 983名40~74岁肺癌高危人群为研究对象。采用癌症风险评估问卷收集基本人口学特征、生活习惯、疾病既往史和癌症家族史等信息;从项目参与医院获取LDCT检查的研究对象资料。筛查依从性采用筛查参与率表示,同时采用多因素logistic回归模型分析LDCT筛查依从性的相关因素。结果17 983名研究对象年龄为(56.52±8.22)岁,男性占51.9%(9 332名);曾经吸烟(包括目前吸烟和既往吸烟)者占69.5%(12 495名);共计6 269例接受了LDCT筛查,筛查参与率为34.86%。多因素logistic回归分析结果提示,50~69岁年龄组、女性、被动吸烟者、饮酒者、有肺癌家族史和慢性呼吸系统疾病史者更易进行LDCT筛查;而目前吸烟人群的LDCT筛查依从性较低。结论中国城市地区肺癌高危人群LDCT筛查依从性仍有待提高;年龄、性别、吸烟、饮酒、肺癌家族史和慢性呼吸系统疾病史与筛查依从性有关联。