简介:摘要目的通过构建过表达IL-35的慢病毒载体,转染鼻咽癌细胞,建立稳定表达IL-35的鼻咽癌细胞株,为进一步研究IL-35对鼻咽癌细胞的影响奠定基础。方法根据GenBank中的EBI3和IL-l2p35基因序列,设计引物克隆EBI3和IL-l2p35基因。PCR产物和pLVX-IRES-ZsGreenl质粒(命名为H145)经过经酶切、转化、筛选、测序鉴定等后获得重组质粒pLVX-mIL-35-IRES-ZsGreenl,命名为H11864。将重组质粒H11864和H145经过慢病毒包装后转染HEK-293T细胞,收取病毒浓缩液并检测其滴度。用病毒浓缩液感染CNE细胞,用Real-time PCR和ELISA检测IL-35的表达情况。检测IL-35过表达对鼻咽癌细胞增殖能力的影响。结果测序结果显示,本研究成功构建重组质粒pLVX-mIL-35-IRES-ZsGreenl。pCDH-GFP组及pCDH-IL-35-GFP组的慢病毒滴度分别为5.10×108 TU·ml-1和1.03×109 TU·ml-1。Real-time PCR检测结果显示,与CNE-H11864(4 626 159.23±246 221.40)相比,CNE-H145(1.22±0.77)和CNE(0.80±0.65)中IL-35的mRNA表达量显著较低(均P<0.01)。ELISA检测显示,CNE-H11864中IL-35的蛋白含量为344.84 pg/ml,与CNE-H145的33.00 pg/ml相比,显著增高(P<0.01)。CCK-8检测结果表明,与空白组和质粒对照组相比,CNE-H11864组在转染72 h后吸光度值明显升高(均P<0.05),并且在96 h进一步升高(均P<0.01)。结论本研究成功构建稳定表达IL-35的鼻咽癌细胞株,IL-35蛋白能够促进人鼻咽癌细胞的增殖能力。
简介:摘要:目的:分析在无创正压通气(NIPPV)重症慢阻肺(COPD)合并呼吸衰竭患者的治疗中应用综合气道护理干预,对其呼吸功能的影响价值。方法:筛选2023-01至2023-12,在我院行NIPPV治疗的重症COPD合并呼吸衰竭患者60例,依据电脑随机分组,将其划分为对照组和研究组,每组入选患者例数均为30例,前者入选患者展开常规护理,后者一组展开综合气道护理;比较患者呼吸功能。结果:研究组患者的肺活量、潮气量以及呼气量指标均比对照一组数据要高,气道峰压数据要有所下降(P<0.05)。结论:将综合气道护理模式落实到行NIPPV治疗的重症COPD伴呼吸衰竭患者的治疗中,有助于改善呼吸功能,效果良好。
简介:摘要本文概括了历史地图在中学历史授课中的必要性和重要性,以及在现行课本中使用的一些例子。还针对中学生的能力分析了历史地图的作用以及如何培养学生学习历史地图的能力。
简介:随着我国公路建设事业的不断发展,对路基的承载能力的要求也在不断的提高。就自然的软土地基而言,其承载能力是远远不够的,在上个世纪七八十年代,由于我国的经济比较落后,并没有太好的路基加固技术,在施工的时候主要是避开软土地基,但是随着我国经济的不断的发展,城市化建设步伐的不断加快,土地资源日益受到限制,这就要求我们研究出可靠的路基加固技术,从而保证公路建设事业的健康发展。对于公路来说,路基是根本,路基承受着来自路面的压力,路基要发挥作用,就必须要具备较强的承载力和稳定性,这就要求我们通过路基加固技术对路基进行压实和加固,这样的话才能提高公路的质量,从而达到预期的效果。
简介:摘要目的制定符合本院产科的安全分娩清单,并将其应用在产妇分娩中,分析其取得的作用。方法纳入2019年2月至2020年2月本院产科收治的204例产妇作为本次研究对象,将产妇分为对照组和试验组。其中对照组112例实施常规围生期护理干预,试验组92例实施安全分娩核对清单干预,对比进行相应干预后两组产妇产后并发症发生率、助产不良事件发生率及新生儿出现并发症状况。结果试验组产妇产后出血、感染、阴道助产、会阴Ⅲ度和Ⅳ度撕裂伤、不良事件总发生率分别为0.00%(0/92)、0.00%(0/92)、1.09%(1/92)、0.00%(0/92)、1.09%(1/92),均显著少于对照组的0.89%(1/112)、 1.79%(2/112)、 1.79%(2/112)、3.57%(4/112)、 8.04%(9/112),两组不良事件总发生率比较差异有统计学意义(P<0.05);试验组新生儿感染、窒息、总并发症发生率分别为0.00%(0/92)、1.09%(1/92)、1.09%(1/92),均显著少于对照组的3.57%(4/112)、5.36%(6/112)、8.93%(10/112),两组新生儿总并发症发生率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论在产妇安全分娩中应用安全分娩核对清单,可以显著减少产妇产后并发症的发生,避免生产中阴道助产,减少会阴撕裂伤,同时减少新生儿并发症的发生,保证产妇和新生儿的健康和安全。
简介:摘要目的探究高压氧(HBO)联合川芎嗪对重症急性胰腺炎(SAP)模型大鼠的治疗疗效及其作用机制。方法75只SPF级健康大鼠造模完成后,按照数字表法随机分成3组:对照组、观察1组和观察2组,每组25只。对照组给予生理盐水腹腔注射,观察1组给予川芎嗪腹腔注射,观察2组在观察1组处理的基础上进行HBO治疗。每组各选取10只大鼠,记录24 h死亡率和平均生存时间;记录各时间点腹水量;采用酶联免疫吸附实验检测各组大鼠各时间点血清中炎性因子以及淀粉酶表达水平,硫代巴比妥酸法测定大鼠各时间点血浆中丙二醛(MDA)的含量。断头法处死大鼠后进行综合胰腺组织病理评分。结果HBO处理后,观察1组(35.5%)和观察2组(20.0%)模型大鼠死亡率均明显低于对照组(55.0%),平均生存时间高于对照组;且观察2组大鼠死亡率低于观察1组,平均生存时间高于观察1组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);观察1组和观察2组不同时间腹水量明显少于对照组,观察2组腹水量少于观察1组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。观察1组和观察2组模型大鼠血清淀粉酶IL-6、TNF-α、MDA水平明显低于对照组,IL-10高于对照组;且观察2组淀粉酶IL-6、TNF-α、MDA水平明显低于观察1组,IL-10高于观察组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。观察1组和观察2组不同时间模型大鼠胰腺组织病理评分明显低于对照组,观察2组评分低于观察1组,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论HBO联合川芎嗪可通过改善SAP大鼠氧化损伤,调节炎性因子分泌,抑制其病情进展。
简介:摘要目的评价Rho亚家族蛋白A(RhoA)/Rho相关的卷曲连接蛋白激酶2(ROCK2)信号通路在多次七氟烷麻醉致新生大鼠远期认知功能障碍中的作用。方法SPF级健康新生SD大鼠60只,雌雄不拘,6日龄,体重12~20 g,采用随机数字表法分为3组(n=20):对照组(C组)、多次七氟烷麻醉组(S组)和RhoA/ROCK2信号通路抑制剂Y-27632组(Y组)。S组和Y组于出生后6、7和8 d时吸入3%七氟烷麻醉2 h;Y组于吸入七氟烷麻醉前腹腔注射Y-27632 5 mg/kg。于出生后35 d时行旷场实验评估自发活动能力;于出生后36 d时行Morris水迷宫实验评估认知功能。水迷宫实验结束后处死大鼠分离海马组织,采用流式细胞术检测神经元凋亡率和胞浆钙离子浓度([Ca2+]i),采用Western blot法测定磷酸化RhoA(p-RhoA)、ROCK2和裂解的caspase-3(cleaved-caspase-3)的表达水平,透射电镜下观察神经元超微结构。结果3组旷场实验运动速度、路程及旷场中心停留时间比较差异无统计学意义(P>0.05)。与C组比较,S组逃避潜伏期延长,穿越原平台次数减少,海马神经元凋亡率和[Ca2+]i升高,p-RhoA、ROCK2和cleaved-caspase-3表达上调(P<0.05),海马神经元发生病理学损伤。与S组比较,Y组逃避潜伏期缩短,穿越原平台次数增加,海马神经元凋亡率和[Ca2+]i降低,p-RhoA、ROCK2和cleaved-caspase-3表达下调(P<0.05),海马神经元病理学损伤减轻。结论多次七氟烷麻醉诱发新生大鼠远期认知功能障碍的机制与激活RhoA/ROCK2信号通路,诱发海马神经元凋亡有关。
简介:摘要目的评价脑源性神经营养因子(BDNF)/原肌球蛋白相关激酶B (TrkB)信号通路在预先注射青年大鼠血浆减轻七氟烷诱发老龄大鼠认知功能障碍中的作用。方法SPF级健康雄性SD大鼠80只,18月龄,体重550~650 g,采用随机数字表法分为4组(n=20):对照组(C组)、七氟烷麻醉组(S组)、青年大鼠血浆组(Y组)和BDNF/TrkB信号通路抑制剂K252a组(K组)。Y组和K组尾静脉注射经过处理的3月龄青年大鼠血浆100 μl/次,C组和S组尾静脉注射等容量生理盐水,2次/周,共4周。处理结束后S组、Y组和K组吸入3%七氟烷麻醉3 h,麻醉前K组尾静脉注射K252a 25 mg/kg。于麻醉后3 d时行旷场试验及Morris水迷宫实验评估大鼠自发运动能力和认知功能;随后处死大鼠分离海马组织,采用Western blot法测定BDNF、磷酸化TrkB(p-TrkB)、突触后致密蛋白-95(PSD-95)和突触囊泡蛋白(SYN)的表达,行高尔基染色记录海马CA1区神经元树突长度和树突棘密度,透射电镜下记录突触数量并测量突触活性区长度。结果与C组比较,S组逃避潜伏期延长,穿越原平台次数减少,海马p-TrkB、BDNF、PSD-95和SYN表达下调,海马神经元树突长度、树突棘密度、突触数量及突触活性区长度降低(P<0.05)。与S组比较,Y组逃避潜伏期缩短,穿越原平台次数增加,海马p-TrkB、BDNF、PSD-95和SYN表达上调,海马神经元树突长度、树突棘密度、突触数量及突触活性区长度升高(P<0.05)。与Y组比较,K组逃避潜伏期延长,穿越原平台次数减少,海马p-TrkB、BDNF、PSD-95和SYN表达下调,海马神经元树突长度、树突棘密度、突触数量及突触活性区长度降低(P<0.05)。结论预先注射青年大鼠血浆减轻七氟烷诱发老龄大鼠认知功能障碍的机制与激活BDNF/TrkB信号通路,改善海马突触可塑性有关。
简介:摘要目的评价活性氧(ROS)介导的线粒体途径细胞凋亡在多次七氟烷麻醉诱发新生大鼠远期认知功能障碍中的作用。方法SPF级健康新生SD大鼠60只,体重12~20 g,采用随机数字表法分为3组(n=20):对照组(C组)、多次七氟烷麻醉组(S组)和ROS抑制剂组(A组)。S组和A组于出生后6、7和8 d时吸入3%七氟烷2 h,C组吸入空气。A组大鼠于每次七氟烷麻醉前腹腔注射ROS抑制剂N-乙酰半胱氨酸150 mg/kg。于出生后35 d时行旷场实验评估大鼠的自发活动能力,于出生后36 d时行Morris水迷宫实验检测认知功能,水迷宫实验结束后处死大鼠分离海马组织,采用流式细胞术检测海马神经元凋亡率、ROS及线粒体膜电位(MMP)水平,采用Western blot法检测细胞色素c(Cyt c)、裂解的caspase-9和caspase-3水平。采用RT-PCR法检测Bcl-2和Bax的mRNA表达水平。透射电镜下观察海马神经元线粒体的超微结构。结果与C组比较,S组逃避潜伏期延长,穿越原平台次数减少,海马神经元凋亡率、ROS与MMP水平升高,Cyt c、裂解的caspase-9和caspase-3、Bax mRNA表达上调,Bcl-2 mRNA表达下调,Bax/Bcl-2比值升高(P<0.05),线粒体肿胀、线粒体嵴结构断裂。与S组比较,A组逃避潜伏期缩短,穿越原平台次数增加,海马神经元凋亡率、ROS与MMP水平下降,Cyt c、裂解的caspase-9和caspase-3、Bax mRNA表达下调,Bcl-2 mRNA表达上调,Bax/Bcl-2比值降低(P<0.05),线粒体肿胀及嵴结构断裂的情况改善。结论多次七氟烷麻醉诱发新生大鼠远期认知功能障碍的机制可能与激活ROS介导的线粒体途径细胞凋亡有关。