简介:目的探讨如何利用青年大鼠建立合适的老年阳虚证模型.方法选用3月龄SD健康大鼠30只,雌雄各半,随机分为青年对照组,亚急性衰老模型组与老年阳虚证模型组,每组10只.亚急性衰老模型组给予颈背部皮下注射D-半乳糖125mg/kg,连续40d,之后于后肢肌肉注射25mg/kg生理盐水7d;老年阳虚证模型组给予颈背部皮下注射D-半乳糖125mg/kg,连续40d,后再行后肢肌肉注射氢化可的松25mg/kg,连续7d;青年对照组在颈背部皮下及后肢肌肉注射等量生理盐水47d.检测大鼠血清中IL-6、IL-2、cAMP、cGMP和CD4+CD8+T淋巴细胞的含量.结果与青年对照组相比,亚急性衰老组大鼠cGMP水平升高(P<0.05),cAMP水平及cAMP/cGMP比值无明显变化(P>0.05);而老年阳虚组大鼠cGMP明显升高(P<0.01),cAMP水平及cAMP/cGMP比值明显降低(P<0.01).亚急性衰老组和老年阳虚组大鼠血清中IL-6含量均明显上升,IL-2含量均明显下降(P<0.05或P<0.01);CD4+T淋巴细胞比率降低,CD8+T淋巴细胞比率升高,CD4+/CD8+比值下降(P<0.01或P<0.05).与亚急性衰老组相比,老年阳虚组大鼠cAMP明显下降,cGMP明显上升,cAMP/cGMP比值下降(P<0.01);血清中IL-6、IL-2含量以及CD4+、CD8+T淋巴细胞比率以和CD4+/CD8+比值较亚急性衰老组又均有明显差异(P<0.05).结论以D-半乳糖和氢化可的松诱导制作的老年阳虚证模型大鼠符合衰老及阳虚的表现,提示以此种方法制作老年阳虚证模型具有可行性.
简介:目的:观察益气化瘀补肾方对D-半乳糖诱导小鼠腰椎间盘衰老的影响。方法:8周龄雄性健康C57BL/6J小鼠30只,随机分为空白对照组、诱导盐水灌胃组及益气化瘀补肾方组。空白对照组皮下注射生理盐水,其余2组均皮下注射D-半乳糖复制腰椎间盘衰老模型;盐水灌胃组灌胃等容量生理盐水,益气化瘀补肾方组灌胃中药水溶液。连续给药10周后处死小鼠,取下腰部椎间盘,进行免疫组化分析以及实时定量RT-PCR检测。结果:免疫组化染色显示,益气化瘀补肾方可以明显降低软骨终板及纤维环中p16INK4a和p27KIP蛋白表达;实时定量RT-PCR分析发现,益气化瘀补肾方可显著增加Bmi1、CDK4和C-mycmRNA的表达,降低p16INK4a、cyclinD1、RB、p19ARF、Mdm2和p53mRNA表达。结论:益气化瘀补肾方具有延缓D-半乳糖诱导小鼠腰椎间盘衰老的作用,并且这种延缓作用与调控衰老相关基因及细胞周期相关蛋白表达相关。
简介:目的:建立波棱瓜子多糖的含量测定方法,并测定不同产地波棱瓜子药材中多糖的含量。方法:采用水提醇沉法提取多糖,以葡萄糖标准液绘制标准曲线,用苯酚一硫酸法测定波棱瓜子多糖的含量,通过单因素实验,对显色条件进行优选,并对该法的精密度、加样回收率等进行了研究。结果:优化后的测定条件为显色波长488nm,5%苯酚的用量0.2mL、浓硫酸用量4.0mL、60℃水浴15min。该条件下,平均加样回收率为100.74%,RSD=2.23%,测得不同产地波棱瓜子药材中多糖含量为1.15%~2.16%。结论:该含量测定方法准确、简便、经济,适用于波棱瓜子多糖的含量测定。
简介:目的通过检测关木通、广防己不同药物配伍组中马兜铃酸A的含量,探寻降低肾毒性的最佳配伍组。方法(1)色谱柱为symmetryODS(C18,4.6mm×250mm,5μm);流速:1mL/min;温度:室温;检测波长:250nm;流动相:乙腈-(水+冰醋酸)为58∶42(v/v)。(2)色谱柱为DiamonC18(250mm×4.6mm5μm);柱温:30℃;流速:1.0mL/min;检测波长:316nm;流动相:乙腈-(醋酸-三乙胺)为45∶55(v/v)。结果(1)与关木通组比较,木通茯苓组、导赤散+当归组、导赤散组、木通栀子组、木通黄连组和导赤散+黄连组的马兜铃酸A的含量分别为:0.1706、0.1402、0.1219、0.1195、0.0778、0.0442和0.0265mg/L。(2)与广防己组比较,广防己生晒参组、广防己肉桂组、广防己茯苓组、广防己生晒参肉桂茯苓组、广防己黄连组和广防己生晒参肉桂茯苓黄连组的马兜铃酸A的含量分别为:1.6830、0.4960、0.3930、0.3700、0.2930、0.1760和0.0520mg/L。结论配伍黄连后,马兜铃酸A的含量能显著降低,黄连与关木通、黄连与广防己是减毒的最适配伍。
简介:通过高效液相色谱法,优化色谱条件,测定细辛不同批次、不同药用部位马兜铃酸的含量,为细辛药材的质量控制提供依据。方法采用高效液相色谱法,0.1%甲酸乙腈-水(40:60)为流动相,C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),流速1.0mL/min,检测波长320nm,柱温35℃,检测其限量成分马兜铃酸的含量。结果马兜铃酸在上述检测条件下检测限为0.4ng/mL,在0.001-0.200μg/mL范围内与峰面积有良好的线性关系(r=0.9985),平均加样回收率为98.09%,RSD为2.19%。检测结果显示不同批次细辛药材中地上部分均测出有痕量马兜铃酸,地下部分未能测出。结论该方法快速、准确,操作简单,专属性强,可为细辛药材的质量控制提供参考依据。
简介:目的:探讨益气养阴口服液对D-半乳糖衰老模型小鼠HSP70、TNF-α表达的影响。方法:60只昆明小鼠,随机分为正常组、模型对照组、治疗组。跳台法测定小鼠学习记忆能力。免疫组化法、ELISA法检测HSP70、TNF—α表达水平。结果:与对照组比较,治疗组可使小鼠错误次数明显减少,潜伏期明显延长(P〈0.05)。与正常组相比,对照组、治疗组HSP70蛋白表达升高(P〈0.05或P〈0.01),但对照组升高幅度小于治疗组(P〈0.05)。与正常组相比,对照组、治疗组血清TNF-α表达升高(P〈0.05或P〈0.01)。结论:益气养阴口服液能够改善衰老模型小鼠学习记忆能力,同时,能够改善HSP70蛋白、TNF-α的表达.改善失衡的促一抗炎性反应体系.这可能是益气养阴口服液抗衰老的机制之一。
简介:目的:建立玉屏风汤剂及其组方饮片的多糖含量测定方法,并对多糖含量及提取率进行分析。方法:采用硫酸一苯酚法测定。结果:10批玉屏风汤剂的多糖含量为0.984~1.746g/剂;黄芪、防风、白术饮片的多糖含量分别为0.0816-0.1174g/g生药、0.0300-0.0396g/g生药、0.0203-0.0254g/g生药;单味饮片汤剂的提取率分别为50.43%~69.73%、43.67%~53.98%、25.59%~38.42%;全方汤剂的提取率为40.57%~62.06%;玉屏风汤剂的多糖含量略低于黄芪、防风、白术单味饮片汤液的多糖含量之和。结论:对玉屏风汤剂及其组方饮片的多糖含量和提取率进行研究,为玉屏风传统汤剂及其组方饮片的多糖含量的研究提供一定的参考。