简介：利用酵母双杂交技术和双分子荧光互补（BiFC）技术，对控制花器官发育的B类蛋白，即PPI（GenBank登录号：GU812176）与两个AGAMOUS-like蛋白即已被分别命名的PAGl（Capana02g001695）和PAG2（Capana07g001940）间的互作关系进行了研究。结果表明，PPI蛋白与PAG1和PAG2蛋白均存在特异性相互作用，说明辣椒花器官发育过程中尸州蛋白可能与PAGl和PAG2形成蛋白复合体，共同控制雄蕊的发育。这有助于进一步揭示辣椒雄蕊发育的分子机理。

简介：蛋白质和糖类物质是影响DNA纯度的重要因素。以不同辣椒种质茎尖叶片为材料，测定蛋白质和糖类物质含量。试验结果表明，材料LX4茎尖叶片蛋白质含量最高，为21．32mg／g（FW），热辣4号蛋白质含量最低，为10．15mg／g（FW）；热辣4号茎尖叶片含糖量最高，为2．25％，L515含糖量最低，为0．82％；不同辣椒材料间茎尖叶片中的蛋白质和糖类物质含量存在不同程度的差异。本研究为选择有效方法提取高纯度、高质量辣椒基因组DNA提供了参考。

简介：组蛋白去乙酰化在基因表达调控方面扮演重要角色,在植物的生长发育、器官构建及逆境胁迫和激素信号应答中发挥重要作用.在基因组范围内,利用生物信息学方法对辣椒的组蛋白去乙酰化（HDAC）基因家族的各成员、分布及结构和功能等进行分析.预测结果显示辣椒HDAC家族包含14个蛋白质,分为3个亚族,其中RPD3/HDA1成员最多,为10个;HD2具有3个成员,SRT2仅有1个成员;其主要分布在8个染色体上,且进化分析结果表明辣椒HDAC基因成员与拟南芥家族具有相似分类.在辣椒HDAC结构域中包含18个重要的基序,同组中的HDAC成员蛋白序列的氨基酸保守结构域基本一致,且各亚族成员的氨基酸保守结构域组成特异,表明这些基序的存在对HDAC蛋白功能的执行是必需的.分析辣椒发育过程中HDAC各成员表达谱数据发现,CaHDA1在果皮和胎座成熟过程中表达量逐渐升高,说明该基因可能参与了辣椒后期果实的发育过程.这将为辣椒HDAC家族基因的深入研究和功能解析提供实验参考依据.

简介：利用巢式PCR技术，分离获得CaTIP1-1基因上游1749bp的片段。利用PlantCARE软件预测发现该序列含有启动子典型的基本元件TATA-box、CAAT-box及非生物胁迫相关的元件和光应答元件。以PBI121载体为基础，构建CaTIP1-1启动子驱动下绿色荧光蛋白GFP报告基因植物表达载体。利用叶盘法转化烟草获得转基因植株，通过荧光显微镜能够检测到T1代烟草悬浮细胞系能够稳定表达荧光。结果表明该启动子具有驱动绿色荧光蛋白表达的活性。

简介：番茄Pto基因编码包含丝氨酸／苏氨酸激酶（STK）结构域的蛋白，它能抗由丁香假单胞菌番茄致病变种（Pseudomonassyringaepv．Tomato，Pst）造成的细菌性斑点病。本研究使用PVX系统的体内识别系统测定显示AvrPto在辣椒基因型中被特异性识别。这种AvrPto识别导致非寄主超敏反应（HR），以及PVX：：AvrPto融合蛋白在接种辣椒叶组织中的定位，这表明在辣椒中存在与番茄类似的Pto识别机制。然而，辣椒全基因组分析显示没有对应番茄的Pto进化枝，表明在辣椒中有一个Pto识别的替代系统。不过，辣椒基因组中已经鉴定出25个具有高度保守STK结构域的类Pto蛋白激酶（PLPKso对于Ptos和PLPK的STK结构域中的大部分氨基酸位点，非同义（dN）与同义（dS）核苷酸替换速率的比值（ω）小于1。表明纯化选择在进化中起主要作用。然而，一些氨基酸位点在Pto同源物的进化过程中被发现为偶发性正选择，因此，不同的进化过程可能在植物中形成了Pto基因家族。基于RNA—seq数据，PLPK基因和其他Pto通路基因，例如Prf,Pti1，Pti5和Pti6在所有检测的辣椒基因型中都表达了。因此，辣椒中对Pst的非寄主超敏反应可能是由于PLPK同系物对AvrPto效应物的识别，以及Pto信号通路下游组分的后续作用。然而，辣椒中AvrPto的识别可能涉及其他类受体激酶（RLKs）的活性。本研究中鉴定的PLPKs将作为进一步了解PLPKs在非寄主抗性中作用的基础。

简介：背景：辣椒素类物质，包括辣椒素及其类似物，是导致辣椒果实辛辣的原因。尽管辣椒素为人熟知并且每天都会用到．但是对于辣椒素合成途径中的相关基因并不是完全了解。已有研究表明，pAMT和Punl编码的蛋白分别催化辣椒素合成途径中的第二步和最后一步反应，并且Punl编码的蛋白具有辣椒素合酶活性。然而，并没有直接的证据证明Punl具有辣椒素合酶活性。结果：为了证明Punl蛋白在辣椒素合成中的作用，我们利用大肠杆菌合成了抗Punl蛋白抗体，利用该抗体拮抗内源的Punl活性。同时通过病毒介导的基因沉默技术靶定了Punl的mRNA，以确认抗Punl抗体的特异性。在Punl下调表达的胎座组织中，利用该抗体进行westernblot，检测到Punl蛋白的积累减少，同时辣椒素在胎座中的积累量也降低。从胎座组织中分离得到原生质体，在体外进行辣椒素的从头合成，加入抗Punl抗体之后，辣椒素的合成受到抑制。通过分析不同辣椒品种的pAMT和Punl的表达，我们发现辣椒素的高水平积累总是伴随着pAMT和Punl的高水平表达，也就是说这两个基因对辣椒素合成很重要。比较有辣味辣椒和无辣味辣椒的香草基胺（辣椒素合成的前体物质）和辣椒素的积累水平，结果表明：在辛辣味辣椒中香草基胺的含量很低，推测可能是香草基胺合成之后，Punl把香草基胺快速转化为辣椒素；而在无辣味辣椒中由于缺乏Punl，香草基胺的含量积累到很高的水平。结论：对辣椒素从头合成途径和抗Punl抗体进行原生质体试验，证明了Punl基因及其产物参与了辣椒素的合成。与辣椒素的积累相比较，分析香草基胺的积累过程，揭示了Punl是辣椒素和香草基胺积累水平的决定因素。