简介:β-木糖苷酶在完全快速降解木聚糖类半纤维素为木糖的过程中起重要作用。海栖热袍菌(Thermotogamaritima)是一个极端嗜高温厌氧细菌,所产耐热酶类具有非常可观的工业应用前景,但这类酶在大肠杆菌中的表达很低。采用基因重组技术将源自海栖热袍菌的具有阿拉伯糖苷酶活性的耐热β-木糖苷酶基因克隆至表达载体pET-28a,与组氨酸标签融合表达构建重组质粒pET-28a-xyl,然后转化不同大肠杆菌宿主,结果在大肠杆菌BL21-CodonPlus(DE3)→RIL中获得高效表达;重组酶蛋白经诱导表达、破胞和热处理后纯度在90%以上,经Ni^2+亲和层析后达电泳纯;用HPLC和TLC检测酶解产物,β-木糖苷酶和木聚糖酶联合水解后,酶解产物主要为木糖,外加阿拉伯糖苷酶后能使其酶解产物中木糖含量明显提高。因此,具有阿拉伯糖苷酶活性的耐热β-木糖苷酶在木糖制备中具有重要的工业应用价值。
简介:为建立金黄色葡萄球菌在原料乳中的生长模型,比较不同样本容量条件下预测模型的适用性,测定10,15,20,25,30,37℃条件下牛奶中金黄色葡萄球菌的生长数据,拟合建立最大比生长速率与温度之间的预测模型一;结合ComBase数据库中收录的相似环境试验数据,建立预测模型二。根据主要评价参数R2、Af、Bf等,对所建模型进行内部和外部验证。内部验证结果显示模型能够较好地预测微生物生长状况,而在外部验证中模型二的Af值,Bf值均优于模型一。一个简单的预测生长模型能够很好地预测相似条件下的微生物生长状况,然而存在普适性不高的问题。一个适用性高的可靠微生物预测模型应建立在大样本容量基础上。