简介:为获得快速生长的泥鳅(Misgurnusanguillicaudatus),研究了泥鳅β-actin基因启动子介导的革胡子鲶(Clariasgariepinus)生长激素(growthhormone,GH)重组基因。采用PCR和RT-PCR技术克隆泥鳅β-actin基因近端启动子、3′-UTR及革胡子鲶GH基因编码区,构建一个长为2418bp的GH重组基因DPRK。首先,构建了以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因作为报告基因的重组表达载体pAF(pβ-actinpromoter-EGFP),然后转染DF1真核细胞,同时经酶切线性化后显微注射到斑马鱼(Daniorerio)和泥鳅的受精卵中,以评价泥鳅β-actin启动子的启动活性。其次,将重组基因DPRK显微注射到泥鳅受精卵中。结果显示:泥鳅β-actin启动子能在DF1细胞、斑马鱼和泥鳅的受精卵中启动绿色荧光蛋白的表达;泥鳅的荧光表达率(78.44%)显著高于斑马鱼(29.62%);泥鳅受精卵显微注射DPRK20d后,在mRNA水平检测到GH基因的表达。这表明泥鳅β-actin基因近端启动子具有显著的启动活性,且重组基因DPRK能在泥鳅体内表达,为下一步泥鳅的基因工程育种奠定了理论基础。
简介:为了解新疆石河子地区猪呼吸与繁殖障碍综合征(PRRS)免疫抗体水平及其消长的规律,采集周边不同地区13个猪场共726份血清,采用间接ELISA方法检测PRRS免疫抗体水平并进行分析。结果显示,该地区PRRS免疫抗体阳性率平均为87.33%,免疫抗体阳性率超过80%的猪场占全部猪场的76.92%,同时,母猪、种公猪、育肥猪免疫抗体的整体水平均超过85%,而仔猪的免疫抗体水平较低,仅为71.11%。结果表明当地应用的PRRS疫苗的免疫原性较好,免疫效果确实;仔猪免疫抗体水平较低的具体原因尚不清楚。该结果可为进一步了解石河子周边地区猪场PRRS免疫抗体的现状,制定合理的治疗措施和免疫程序提供参考。