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  • 简介:目的:基于大肠杆菌质粒pMMB207,构建贝氏柯斯体穿梭载体,建立贝氏柯斯体转化系统。方法:利用PCR分别扩增eGFP基因、Kan~R抗性基因、贝氏柯斯体组成型表达启动子P311和P1169等4段序列,然后用融合PCR技术将4段序列融合为P311-eGFP-P1169-Kan~R串联序列,经KpnⅠ和XhoⅠ酶切后,连接至经同样双酶切的pMMB207骨架上,构建穿梭载体p207-GK;将穿梭载体电转化至贝氏柯斯体,用ACCM-2培养基进行传代培养或感染BGM细胞;利用倒置荧光显微镜观察eGFP基因的表达,传代至eGFP基因高表达时,用半固体平板培养法克隆分纯贝氏柯斯体转化株。结果:构建了贝氏柯斯体穿梭载体,获得了稳定表达eGFP的贝氏柯斯体转化株,并完成了克隆分纯。结论:建立了完整的贝氏柯斯体转化系统,为后续用遗传学方法研究贝氏柯斯体奠定了基础。

  • 标签: 贝氏柯克斯体 Q热 穿梭载体 转化 RSF1010质粒
  • 简介:随着科学技术的迅速发展,多媒体技术在我们身边也随处可见.多媒体教学也深入课堂,成为现代教学的重要部分.使用多媒体进行教学可以较大程度的激发学生的学习兴趣,使学生更好的参与到学习的过程当中来.近年来,将多媒体教学应用到翻译课堂取得了一定的成效,与此同时,也存在一定的问题.本文将结合多媒体教学环境下大学英语翻译课堂存在的问题探究解决这些问题的有效对策.

  • 标签: 多媒体 翻译 教学 课堂 问题 对策