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  • 简介:目的了解牛细胞的生长特征及构建的基因载体对细胞的转染情况和转染后阳性细胞的扩增效率。方法用透明质酸酶消化牛/卵母细胞复合体(COCs)获得牛细胞,了解牛细胞的生长特点,并用分子大小分别为7178bp和31085bp两种带有增强绿色荧光蛋白(EGFP)和新霉素抗性基因(Neor)的质粒载体pMSCV-EGFP-Neor和pGC1-collagen-EGFP-Neor分别转染靶细胞。结果用脂质体法转染对数生长期的细胞,均获得了绿色荧光阳性细胞,但小质粒的转染效率在72h时是大质粒的6倍(14%vs.2.3%)。在800μg/mLG418筛选浓度下,14d后分别获得了7个和3个较明显的单克隆细胞群,对它们进行挑选、扩大,都获得了较纯的单克隆细胞系。最后根据EGFP和collagen的已知基因序列对转染pGC1-collagen-EGFP-Neor质粒的阳性细胞进行三个不同区域DNA片段的扩增,结果表明,扩增的基因片段大小正确,数目完整。结论对细胞进行基因转染,分子大小等于或小于31kb的基因可以有效转入,但小分子载体比大分子载体具有更高的转染效率。经过筛选都可以获得纯的转基因细胞系。

  • 标签: 卵丘细胞 细胞培养 脂质体 细胞转染 转基因
  • 简介:摘要目的探讨血浆外泌体源性miR-18a-3p靶向调节Cbp/p300结合转化激活因子含Glu/Asp丰富羧基末端域2(Cbp/P300 interacting transactivator with Glu/Asp rich carboxy-terminal domain 2, CITED2)对多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)细胞(cumulus cells,CCs)凋亡和细胞周期的影响。方法qRT-PCR分别对PCOS患者血浆、血浆外泌体及CCs中miR-18a-3p的表达进行检测。将外泌体转染miR-18a-3p模拟物后与CCs共孵育后,采用流式细胞术检测CCs凋亡和周期分布情况。行基因本体论(gene ontology,GO)分析筛选CITED2纳入后续实验。构建pcDNA3.1-CITED载体转染至CCs后再与各组外泌体共培养,探究miR-18a-3p与CITED2联合作用对CCs凋亡、周期分布的影响。结果PCOS患者分离的血浆外泌体和CCs鉴定成功。相对非PCOS患者的血浆、血浆外泌体和CCs,PCOS患者血浆样本、外泌体、CCs中miR-18a-3p表达明显下降(均P<0.05)。CITED2在CCs中可作为miR-18a-3p的靶点受到其调控。相对于NC组,过表达miR-18a-3p抑制PCOS患者中CCs细胞的G0/G1期分布,并抑制其凋亡(均P<0.05),但该作用被CITED2部分挽救(均P<0.05)。结论血浆外泌体中携带的miR-18a-3p能促进CCs细胞周期中S期增多,从而抑制其凋亡,抑制PCOS的进展。血浆外泌体源性miR-18a-3p有望在PCOS的靶向治疗中发挥作用。

  • 标签: miR-18a-3p 多囊卵巢综合症 卵丘细胞 血浆外泌体
  • 简介:《语文建设》2009年第1期发表了《“狐死首丘”新解》一文,文章从一个比较独特的角度,对大家熟知的成语“狐死首丘”提出了自己的看法,观点颇有新意。作者认为:“其实这里的‘首’并非用作动词,它是‘首个,第一个’之义,用作定语。‘首’即‘(生活过的)第一座山丘’。”邱先生标新立说使笔者深受启迪,获益匪浅,然研读再三,觉文中新解颇有可商之处,兹不揣浅陋,试作辩正于此,与作者邱君商榷,并请方家指教。

  • 标签: 语文建设 作者 新意
  • 简介:摘要同三胞胎,女,6月龄,其中三胞胎之一、之二完善腹部超声、肝脏穿刺活检、神经元特异性烯醇化酶及肝脏穿刺病理等检查,诊断为神经母细胞瘤(国际神经母细胞瘤4S期,低危组),原发灶位于三胞胎之一左侧肾上腺。三胞胎之一经手术及化疗,三胞胎之二经化疗,随访肝功能正常,腹部超声示肝脏不大,腹部未见新发病灶。三胞胎之三经肝脏穿刺病理提示非嗜肝病毒性肝损伤改变。三胞胎中2例同时患有神经母细胞瘤罕见。

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  • 简介:晓,别名孙元则,男,1919年1月生,上海人。教授,新中国政治学元老之一,苏州大学政治学学科和行政管理学科创始人。1937年,晓曾是上海沪江大学的一名青年学生,在抗战爆发前后,他参加上海市学生界抗日救亡协会领导的学生运动。1937年底,进入苏中敌后,投身创建抗日民主根据地的群众思想动员和部队政治思想工作。抗日战争期间,他曾先后任《抗敌报》、《江海大众》、《文综》的编辑和主编,韬奋书店编辑部负责人,新华社苏中特派记者。

  • 标签: 抗日民主根据地 中国政治学 1937年 政治思想工作 抗日战争期间 管理学科
  • 简介:“兄弟树”是两棵根粗枝繁的白杨,扎根在祖国西北边陲深山险壑之中,与新疆塔城军分区特边防连的官兵相依相存,共同成长。“兄弟树见证着我的成长进步!”老兵退伍前,许多战士举棋不定。连队指导员刘志将大家带到“兄弟树”前,讲起了自己的故事。“当文书时,我一心想考军校,却连连失利,只得转了士官,争取提干。战友黄龙飞也有考军校的想法,我俩一起复习、做题,有时就在兄弟树下彼此考试,就像亲兄弟一样。第二年,他顺利考入南京政治学院,我也如愿进入西安边防学院学习……”

  • 标签: 兄弟 南京政治学院 新疆塔城 军分区 指导员 边防
  • 简介:利用极化注射仪—I型,对混有青鱼体外培养细胞的草鱼,鲢鱼成熟未受精进行正弦交(?)电场处理,使细胞紧密接触,继而进行两次电脉冲。结果在673粒草鱼实验中有45粒发育至囊胚期,12粒发育至血液循环期,孵出鱼苗8尾。在224粒鲢鱼实验中,有68粒发育至囊胚期,13粒发育至血液循环期,孵出鱼苗6尾。鱼类体外培养细胞和未受精卵融合后,能继续分裂发育,说明已分化的体细胞核仍具有发育的全能性。

  • 标签: 鱼类 体细胞 电融合
  • 简介:“光明产卵于我的眼中,一如苍蝇啐唾液于伤口……”此语出自米洛拉德·帕维奇虚构的人物多夫梅尔家族的一位老者之口。老者精通剑术,从不读书。他把《哈扎尔词典》阳本的书页撕下来,用于每日吸去他汤盆中的油脂。他感到他的莱汤太油腻了。

  • 标签: 小说 文学 文学作品 现代文学
  • 简介:今天,我以小说家的身份,也就是作为一个职业的说谎者,来到耶路撒冷。当然,不是只有小说家说谎。众所周知,政客也说谎,外交官和军人有时也被迫说谎。尽管如此,没有人会用道德标准去苛责小说家,因为小说家说的谎与其他人不同。事实上,

  • 标签: 小说家 耶路撒冷 说谎者 共存 文学奖 每个人
  • 简介:一市人贫甚,朝不谋夕。偶一日,拾得一鸡,喜而告其妻曰:“我有家当矣!”妻问:“安在?”持示之曰:“此是。然须十年,家当乃就。”因与妻计曰:“我持此,借邻人伏鸡乳之,待彼雏成,就中取一雌者,归而生,一月可得十五鸡;两年之内,鸡又生鸡,可得鸡三百,堪易十金。我以十金易五柠(即母牛),

  • 标签: 中学 课外阅读 阅读材料 《鸡卵家当》
  • 简介:普通的蝉喜欢产卵在干的细枝上,它选择那最小的枝,像枯草或铅笔那样粗细,而且往往是向上翘起,从不下垂,差不多已经枯死的小枝干。

  • 标签: 《蝉的卵》 小学 语文教学 阅读
  • 简介:结果表明:采用浸酸液中添加福尔马林液稍固定洗除散的新方法,对散不良的剔除工效高。尤其以不良分布较集中的蚕种剔除效率高,但不良较分散和蚕种则稍差,此法可应用于生产。

  • 标签: 家蚕 散卵种 不良卵 剔除方法 浸酸脱粒法
  • 简介:堤作品布娃娃油画50×40cm1939上海美术馆藏栀子花油画50×40cm约1942-1994平湖秋月油画53×44cm约1946静物油画53×44cm约1931-1933堤作品...

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  • 简介:“死”即印度历史上的“摩亨佐达罗”遗址。在印度语中即是“死亡谷地”的意思。在这里,考察人员找到了此地发生过多次猛烈爆炸的证据。爆炸中心1千米半径内所有的建筑物都成了粉末。距中心较远处。发现了许多人骨架。

  • 标签: 事件 建筑物 印度 爆炸
  • 简介:DirectorBruceBeresfordCastEddieMurphy…HenryChurchBrittRobertson…CharlieNataschaMcElhone…MarieLucyFry…Poppy年少的夏莉与母亲玛丽相依为命,母亲的肩膀或许不够宽阔,却已是夏莉全部的依靠。但夏莉并不知道,患有乳腺癌的母亲被告知只能活六个月。一天早上,夏莉睁开眼后发现一个黑人在自家厨房里煎鸡蛋……奇先生就这样'从天而降'。他原本与他人达成协议,只需为母女俩煮六个月的饭,他就可以领取一份终身薪水。

  • 标签: 丘奇先生
  • 简介:中有麻,彼留子嗟。彼留子嗟,将其来施施。——《诗经·国风·王风》寻找麻林村里来了一个人,不看别的,要找麻林。麻林不是一个人的名字,而是一片麻地。那时辰,太阳从东山缓缓升起,将一片亮色均匀地涂在西山沟里,坐落在西山沟里的麻地村就被笼罩在春天的暖光中。晨起,村里的劳力去南岭上、北坡洼种地,寥寥村落寂然不闻人声。

  • 标签: 张朝阳 麻林 子嗟 沈俊 丘中 张部长