简介:摘要:转基因是将高产、抗逆、抗病虫、提高营养品质等已知功能性状的基因,通过现代科技手段转入到目标生物体中,使受体生物获得新的功能特性,产生新的品种和新的产品。转基因在医药、工业、农业、环保、能源领域得到广泛应用。在医药领域,主要用于生物制药和重组疫苗生产,如胰岛素、乙肝疫苗、抑生长素、干扰素、人生长激素等;在工业领域,转基因技术被用于改造传统产业,包括食品工业微生物菌种改良、构建工程菌生产化工原料,如酶制剂、氨基酸、甜味剂、香料、乙醇、丁醇、乙酸、乳酸、柠檬酸、苹果酸、聚羟基丁酸等;在环保领域,用于环境治理和环境保护,如:构建工程菌对工业废水和生活污水进行净化处理。转基因在农业上主要用于微生物、农作物、动物生产,尤其是农作物生产发展最快。
简介:【摘要】近年来,随着植物基因工程技术在农业生产行业中得到越来越广泛的应用,更多的带有改良育种特性基因的新型转基因育种品种也随之在世界范围内进行了广泛种植栽培,所以随之而来的就是转基因食品迅猛地发展,与转基因农业产品规模的商业化比较更引发了人们对农产品质量安全问题的忧虑。为了能确保转基因商品管理检测制度建设的进一步顺利推行,那么建立一个迅速、正确、高通量度的定量管理检验制度手段已十分必要。该文着重阐述了实时荧光定量PCR技术及在转基因食品定量检测过程中的运用,同时展望了建立质粒标准分子的技术来进行对较高转基因植物产品的定性检验。
简介:摘要目的探讨长期高脂饮食引起的胰岛素抵抗对pR5株系MAPT Tau转基因小鼠的认知功能和大脑Tau蛋白磷酸化的影响。方法8周龄雌性pR5 MAPT转基因小鼠分为标准饮食(standard diet,STD)组(pR5 STD,n=8)和高脂饮食(high-fat diet,HFD)组(pR5 HFD,n=8),以STD喂养的雌性野生型(wild type,WT)C57BL/6小鼠为对照组(WT STD,n=8),连续干预30周,直到小鼠老龄。实验期间小鼠每周测量1次体质量,每2周测量1次空腹血糖。30周后进行葡萄糖耐量实验、胰岛素耐量实验;采用强迫游泳实验和悬尾实验评估小鼠抑郁样行为,高架十字迷宫实验评估焦虑样行为,Morris水迷宫空间探索实验评估记忆行为;Western blot检测大脑组织总Tau蛋白和磷酸化Tau蛋白H7-tau、p-tau-Ser396和p-tau-Thr231表达水平。采用SPSS 17.0进行统计分析,葡萄糖耐量数据和胰岛素耐量数据采用重复测量方差分析,其他数据多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD检验。结果高脂饮食30周时,三组小鼠的体质量和空腹血糖均差异有统计学意义(F=808.31,1 117.18,均P<0.01)。pR5 HFD组小鼠的体质量[(54.35±2.52)g]高于pR5 STD组[(24.95±1.15)g]和WT STD组[(23.86±1.10)g](均P<0.01),pR5 HFD组小鼠空腹血糖[(8.12±0.24)mmol/L]高于pR5 STD组[(4.64±0.13)mmol/L]和WT STD组[(4.45±0.22)mmol/L] (均P<0.01)。葡萄糖耐量实验显示,三组小鼠注射葡萄糖后的120 min内,血糖值存在显著时间和组别交互作用(F=113.30,P<0.01),pR5 HFD组小鼠注射葡萄糖后血糖升高的峰值延迟,提示pR5 HFD组小鼠葡萄糖耐量受损。胰岛素耐量实验显示,三组小鼠的胰岛素耐量存在显著的时间和组别的交互作用(F=209.92,P<0.01)。pR5 HFD组小鼠注射胰岛素后,血糖下降较慢,在60 min时即达谷值,之后血糖显著回升,提示pR5 HFD组小鼠对胰岛素的敏感性显著降低。三组小鼠强迫游泳不动时间百分比和悬尾不动时间百分比均差异有统计学意义(F=37.05,59.29,均P<0.01),pR5 STD组和pR5 HFD组的这两个指标均高于WT STD组(均P<0.01),且pR5 HFD组高于pR5 STD组(P<0.01)。高架十字迷宫结果显示,三组小鼠在开放臂中的活动距离和活动时间均差异有统计学意义(F=7.82,10.37,均P<0.05)。pR5 HFD组小鼠的活动距离[(0.40±0.21)m]和活动时间[(27.38±8.80)s]均低于pR5 STD组[(2.31±1.74)m,(63.56±27.52)s](均P<0.05)。空间探索实验显示,pR5 HFD组小鼠目标象限停留时间[(15.56±1.16)s]少于pR5 STD组[(19.18±0.64)s](P<0.01),pR5 HFD组小鼠进入平台区域时间[(1.43±0.06)s]少于pR5 STD组[(1.66±0.12)s](P<0.01)。Western blot结果显示,三组小鼠总Tau蛋白、H7-tau、p-tau-Ser396和p-tau-Thr231蛋白表达水平均差异有统计学意义(F=101.50,80.60,55.47,30.89,均P<0.05)。两两比较显示,pR5 STD组、pR5 HFD组四种Tau蛋白表达均高于WT STD组(均P<0.01),pR5 HFD组均高于pR5 STD组(均P<0.05)。结论长期高脂饮食引起肥胖、高血糖和外周胰岛素抵抗,促进了MAPT小鼠的认知损害,与MAPT小鼠大脑中Tau蛋白磷酸化增加有关。
简介:[摘要]科学运用思考、分析、推理、沟通、论辩等多种结合方法,围绕转基因生物与食品的利与弊展开交流探讨。在教学过程中,提高学生搜集资料、选择信息、口头表达、相互借鉴学习和协同合作的能力,增强团队意识,探讨基于生物学科核心素养下开展生物辩论课堂的必要性和可行性。
简介:摘要乳腺癌约占女性癌症的30%,40年至今乳腺癌的发病率总体呈上升趋势,其中人表皮生长因子受体2(Her-2)的高表达约在20%的乳腺癌患者中存在,且与不良预后密切相关。动物模型被广泛应用于肿瘤研究,在众多用于Her-2+乳腺癌研究的动物模型中,转基因小鼠应用非常广泛,可用于研究肿瘤的发生发展、转移、复发等相关机制以及肿瘤相关信号通路的作用,有助于Her-2+乳腺癌的治疗靶点筛选以及新药研发。目前,转基因小鼠主要通过组织特异性启动子来构建,本文列举了由两类启动子驱动且适用于Her-2+乳腺癌研究的转基因小鼠模型,对其原理、应用以及优缺点进行了深入的分析。
简介:摘要目的研究1例类孟买型血型的分子遗传机制。方法用血型血清学方法鉴定该献血者红细胞ABO和Lewis血型抗原表型,用PCR扩增类孟买表型个体的ABO基因第6、7外显子和FUT1基因全编码区,对PCR产物直接测序分析,并对FUT1基因的2处变异位点进行单倍体序列分析。结果血型血清学鉴定先证者为罕见的B型类孟买表型。直接测序发现先证者ABO基因为B.01/O.01.02杂合子;FUT1基因第881~882位和768位存在杂合性碱基缺失,进一步的单倍体分析显示其中1条单倍体存在c.881_882delTT,另1条单倍体存在c.768delC,基因型为FUT1*01N.13/01N.20杂合子,2个等位基因分别导致多肽链p.Phe294Cysfs*40和p.Val257Phefs*23移码变异。结论在献血人群中发现1例罕见的双等位基因复合杂合性碱基缺失导致的类孟买表型,其分子机制为c.881_882delTT和c.768delC所致的α-1,2岩藻糖基转移酶活性减弱。
简介:摘要:改革开放以来,我国经济市场蓬勃发展,城市建设进程也不断加快。如何有效地管理控制好工程项目预算投资,最大限度地发挥工程建设项目的经济效益和社会效益,也成为了预算控制的一个重要课题。本文基于财政投资评审工作,浅谈如何运用工程造价的基本理论和方法,分析和解决在招标控制价评审工程中的典型问题,达到有效控制工程造价、优化节约政府性投资建设资金的目的。
简介:摘要目的构建新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2)和甲型流感病毒双价DNA疫苗,并在小鼠模型中评价其免疫原性。方法将SARS-CoV-2 Beta突变株S1蛋白编码序列和甲型流感病毒Cambodia (H3N2)株HA蛋白编码序列进行密码子优化合成,采用Over-lapping PCR方法,将两个编码基因通过自裂解2A肽(self-cleaving 2A peptides)序列连接成S1-2A-HA片段,构建能同时表达S1蛋白和HA蛋白的双价DNA疫苗,命名为pVRC-S1-2A-HA,间接免疫荧光和Western blot验证S1蛋白和HA蛋白的表达。将DNA疫苗以肌肉注射加电转途径(IM+EP)免疫BALB/c小鼠,间接ELISA、假病毒中和试验和血凝抑制试验检测小鼠体液免疫应答,IFN-γ ELISPOT、胞内细胞因子染色(intracellular cytokine staining,ICS)和CBA法检测小鼠细胞免疫应答。结果双价DNA疫苗pVRC-S1-2A-HA可以同时表达S1蛋白和HA蛋白,初次免疫后能够显著诱导小鼠产生针对S1蛋白的特异性细胞免疫和针对HA蛋白的特异性IgG结合抗体;加强免疫后特异性免疫应答都显著增强,针对S1蛋白的特异性IgG结合抗体几何平均滴度(geometric mean titer,GMT)提高至3 251,细胞免疫提高至1 238 SFC/106个细胞,针对HA蛋白的特异性IgG结合抗体GMT达到45 407。ICS法检测到疫苗加强免疫可诱导小鼠CD4+和CD8+T细胞产生IL-2、IFN-γ、TNF-α;CBA结果显示单针免疫后小鼠脾细胞分泌多种细胞因子(IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ)。结论本研究成功构建能同时表达SARS-CoV-2 S1蛋白和甲型流感病毒H3N2亚型HA蛋白的双价DNA疫苗,该疫苗可诱导产生针对S1蛋白和HA蛋白的特异性体液免疫和细胞免疫应答,具有较好的研发与应用前景。
简介:摘要目的建立采用国产填料纯化四价流感疫苗病毒的生产工艺。方法分别使用进口填料Sepharose 4FF和国产填料Seplife 4FF,对多价流感疫苗进行纯化。对纯化后的病毒液进行单向免疫扩散检测、ELISA、电子显微镜(电镜)观察,综合评估分离纯化效果。结果在50 cm/h流速时,Seplife 4FF对血凝素的回收率高于Sepharose 4FF,卵清蛋白的去除率相当,4个型别流感病毒的卵清蛋白去除率和血凝素回收率的95%置信区间分别为91.5%~94.6%和92.4%~100.8%,两种填料纯化的电镜观察结果一致。结论成功建立了用国产填料高效纯化流感病毒的方法。
简介:[摘要]招标控制价是招标人根据国家或省级、行业建设主管部门颁发的有关计价依据和办法,以及拟定的招标文件和招标工程量清单,结合工程具体情况编制的招标工程的最高投标限价。国有资金投资的工程建设项目应实行工程量清单招标,并应编制招标控制价。按财政部关于印发《财政投资评审管理规定》的通知(财建〔2009〕648号)规定,财政部门通过对财政性资金投资项目预(概)算和竣工决(结)算进行评价与审查,对财政性资金投资项目资金使用情况,以及其他财政专项资金使用情况进行专项核查及追踪问效,是财政资金规范、安全、有效运行的基本保证。本文从评审项目的设计风险、现场风险、量价风险、特征风险等几个角度,对招标控制价评审中的风险进行了论述,并提出了评审的要点和注意事项,有效的规避风险的发生,提高资金的利用效率。