简介：摘要：目的 探究抗CD19CAR-T细胞治疗难治复发B细胞肿瘤患者的效果。方法 选择2020年9月-2021年9月在本院收治的10例患者为研究对象。对于抗CD19CAR-T细胞治疗的效果观察。结果 在10例患者中，6例存活，4例死亡。对于患者产生的相关不良反应，都在治疗后得到痊愈。结论 在难治复发B细胞血液系统肿瘤的治疗中，以抗CD19CAR-T细胞进行治疗，可发挥一定作用，也能够实现对不良反应的控制。

简介：摘要目的分析复发/难治性急性B淋巴细胞白血病（R/R B-ALL）自体CD19嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞）制备过程中，培养体系中残留白血病细胞导致CD19 CAR转入白血病细胞的特征和体外杀伤研究。方法①收集30例接受CD19 CAR-T细胞治疗的R/R B-ALL患者及6例健康志愿者外周血单个核细胞（PBMC）；②流式细胞术分析R/R B-ALL患者PBMC经CD3磁珠分选后及体外培养过程中体系白血病细胞残留情况；③患者及健康志愿者PBMC CD3+ T细胞转染CD19 CAR及CD22 CAR慢病毒，制备CD19 CAR-T、CD22 CAR-T细胞；④复苏Nalm-6细胞株，CD19 CAR慢病毒转染Nalm-6细胞，制备CD19 CAR-Nalm-6细胞，同时转染患者原代ALL细胞；⑤流式细胞术检测转染率；⑥CCK-8法检测细胞增殖；⑦乳酸脱氢酶（LDH）法检测CD19 CAR-T、CD22 CAR-T细胞对Nalm-6细胞及CD19 CAR-Nalm-6细胞杀伤活性。结果①30例接受CD19 CAR-T细胞治疗的R/R B-ALL患者中，2例CD3+ T细胞中发现3.32%、2.04%的白血病细胞残留，随体外培养时间延长，在培养第4天，白血病细胞完全消失。②体外培养中CD19 CAR-Nalm-6细胞增殖率高于Nalm-6细胞。③效靶比为1∶1且共培养24、48、72 h，CD19 CAR-T细胞对Nalm-6细胞的杀伤活性高于CD19 CAR-Nalm-6细胞；与CD19 CAR-T细胞相比，CD22 CAR-T细胞对CD19 CAR-Nalm-6细胞的杀伤活性更高。④相同效靶比情况，单独应用CD22 CAR-T细胞对CD19 CAR-Nalm-6细胞的杀伤活性高于CD19 CAR-T联合CD22 CAR-T细胞。结论CD19 CAR-T细胞制备过程中培养体系残留白血病细胞可能会导致CD19 CAR被引入白血病细胞中而导致CD19 CAR-T细胞治疗失败，在细胞制备过程中需要检测培养体系中白血病细胞的残留情况。CD22 CAR-T细胞治疗可作为上述情况的挽救治疗措施之一。

简介：摘要目的分析复发/难治性急性B淋巴细胞白血病（R/R B-ALL）自体CD19嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞）制备过程中，培养体系中残留白血病细胞导致CD19 CAR转入白血病细胞的特征和体外杀伤研究。方法①收集30例接受CD19 CAR-T细胞治疗的R/R B-ALL患者及6例健康志愿者外周血单个核细胞（PBMC）；②流式细胞术分析R/R B-ALL患者PBMC经CD3磁珠分选后及体外培养过程中体系白血病细胞残留情况；③患者及健康志愿者PBMC CD3+ T细胞转染CD19 CAR及CD22 CAR慢病毒，制备CD19 CAR-T、CD22 CAR-T细胞；④复苏Nalm-6细胞株，CD19 CAR慢病毒转染Nalm-6细胞，制备CD19 CAR-Nalm-6细胞，同时转染患者原代ALL细胞；⑤流式细胞术检测转染率；⑥CCK-8法检测细胞增殖；⑦乳酸脱氢酶（LDH）法检测CD19 CAR-T、CD22 CAR-T细胞对Nalm-6细胞及CD19 CAR-Nalm-6细胞杀伤活性。结果①30例接受CD19 CAR-T细胞治疗的R/R B-ALL患者中，2例CD3+ T细胞中发现3.32%、2.04%的白血病细胞残留，随体外培养时间延长，在培养第4天，白血病细胞完全消失。②体外培养中CD19 CAR-Nalm-6细胞增殖率高于Nalm-6细胞。③效靶比为1∶1且共培养24、48、72 h，CD19 CAR-T细胞对Nalm-6细胞的杀伤活性高于CD19 CAR-Nalm-6细胞；与CD19 CAR-T细胞相比，CD22 CAR-T细胞对CD19 CAR-Nalm-6细胞的杀伤活性更高。④相同效靶比情况，单独应用CD22 CAR-T细胞对CD19 CAR-Nalm-6细胞的杀伤活性高于CD19 CAR-T联合CD22 CAR-T细胞。结论CD19 CAR-T细胞制备过程中培养体系残留白血病细胞可能会导致CD19 CAR被引入白血病细胞中而导致CD19 CAR-T细胞治疗失败，在细胞制备过程中需要检测培养体系中白血病细胞的残留情况。CD22 CAR-T细胞治疗可作为上述情况的挽救治疗措施之一。

简介：无

简介：摘要目的探讨抗CD19 CAR-T细胞治疗达深度缓解后序贯异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）治疗难治B淋巴细胞白血病的疗效及不良反应。方法回顾性分析2017年11月至2019年3月河南省肿瘤医院收治的10例抗CD19 CAR-T细胞治疗达深度缓解后序贯allo-HSCT难治B淋巴细胞白血病患者的临床资料。结果①10例患者中，男5例，女5例，中位年龄23.5（10~31）岁，其中难治急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）9例，慢性淋巴细胞白血病（CLL）1例。10例患者抗CD19 CAR-T细胞治疗后第30天及移植前评估微小残留病（MRD）均为阴性。②亲缘全相合移植2例，亲缘单倍型移植8例，抗CD19 CAR-T细胞治疗获得深度缓解至allo-HSCT中位时间为32.5（20~60）d。③10例患者获得造血重建，中性粒细胞植入中位时间为15（15~21）d，血小板植入中位时间为19（17~30）d。④预处理过程中，10例患者均未出现肝静脉闭塞病及出血性膀胱炎。1例患者出现渗漏综合征，予以限制入量、补充白蛋白及利尿等治疗后好转。移植过程中8例（80%）出现发热，均经抗感染治疗后好转。发生Ⅱ度急性移植物抗宿主病（aGVHD）2例，Ⅲ度aGVHD 1例；至随访截止9例存活患者中8例出现局限性慢性移植物抗宿主病。⑤中位随访262（150~540）d，预期1年总生存率为（90.0±1.0）%，无病生存率为（85.7±1.3）%。结论抗CD19 CAR-T细胞治疗达深度缓解后序贯allo-HSCT可作为难治B淋巴细胞白血病患者的可选治疗方案。

简介：摘要目的观察供者抗CD19嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）（HI19α-4-1BB-ζ CAR-T）治疗急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后复发患者的疗效及安全性。方法对2017年7月至2020年5月期间9例allo-HSCT后复发B-ALL患者应用供者抗CD19 CAR-T细胞治疗，FCA方案（氟达拉滨+环磷酰胺+阿糖胞苷）预处理后回输供者CD3+T淋巴细胞，其中CAR-T细胞中位数1.79（0.86~3.53）×106/kg，观察疗效和不良反应。结果①输注CAR-T细胞后28~42 d，9例患者均获得MRD阴性的完全缓解。②所有患者发生细胞因子释放综合征（CRS），其中3级2例、2级4例、1级3例；4例患者出现免疫效应细胞相关的神经毒性（ICANS），2级1例、1级3例；1例患者发生急性Ⅳ度移植物抗宿主病（GVHD），上述不良反应经治疗均控制。③4例患者再次复发，中位复发时间为CAR-T细胞治疗后8.6（4.6~19.3）个月，2例化疗后病情进展死亡，1例接受二次移植14个月后复发死亡，1例接受CD22 CAR-T细胞治疗后完全缓解，现6例患者无病存活，植入分析为完全供者嵌合体，中位无白血病生存（LFS）期18.1个月，预期1年、2年LFS率分别为63.5%、50.8%。④中位随访25.1（6.9~36.7）个月，预期2年、2.5年总生存（OS）率分别为87.5%、52.5%。结论供者抗CD19 CAR-T细胞治疗allo-HSCT后复发的B-ALL的缓解率高，不良反应可耐受，半数患者可无病生存2年以上，长期疗效有待进一步观察。中国临床试验注册中心：ChiCTR1900025419

简介：摘要目的观察供者抗CD19嵌合抗原受体T细胞（CAR-T）（HI19α-4-1BB-ζ CAR-T）治疗急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）异基因造血干细胞移植（allo-HSCT）后复发患者的疗效及安全性。方法对2017年7月至2020年5月期间9例allo-HSCT后复发B-ALL患者应用供者抗CD19 CAR-T细胞治疗，FCA方案（氟达拉滨+环磷酰胺+阿糖胞苷）预处理后回输供者CD3+T淋巴细胞，其中CAR-T细胞中位数1.79（0.86~3.53）×106/kg，观察疗效和不良反应。结果①输注CAR-T细胞后28~42 d，9例患者均获得MRD阴性的完全缓解。②所有患者发生细胞因子释放综合征（CRS），其中3级2例、2级4例、1级3例；4例患者出现免疫效应细胞相关的神经毒性（ICANS），2级1例、1级3例；1例患者发生急性Ⅳ度移植物抗宿主病（GVHD），上述不良反应经治疗均控制。③4例患者再次复发，中位复发时间为CAR-T细胞治疗后8.6（4.6~19.3）个月，2例化疗后病情进展死亡，1例接受二次移植14个月后复发死亡，1例接受CD22 CAR-T细胞治疗后完全缓解，现6例患者无病存活，植入分析为完全供者嵌合体，中位无白血病生存（LFS）期18.1个月，预期1年、2年LFS率分别为63.5%、50.8%。④中位随访25.1（6.9~36.7）个月，预期2年、2.5年总生存（OS）率分别为87.5%、52.5%。结论供者抗CD19 CAR-T细胞治疗allo-HSCT后复发的B-ALL的缓解率高，不良反应可耐受，半数患者可无病生存2年以上，长期疗效有待进一步观察。中国临床试验注册中心：ChiCTR1900025419

简介：摘要目的探讨异基因造血干细胞移植后复发急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）CD19 CAR-T细胞治疗缓解后的维持治疗，观察单独输注供者造血干细胞和供者T淋巴细胞对CD19 CAR-T细胞扩增的影响。方法1例难治B-ALL患者，CD19 CAR-T（鼠源，克隆号：FMC63）细胞治疗后桥接同胞全相合异基因造血干细胞移植，后再次复发。接受CD19 CAR-T（可变区人源化的FMC63）细胞治疗再次缓解，缓解后先后接受单独输注供者造血干细胞、供者T淋巴细胞的维持治疗，期间监测患者细胞因子水平、CD19 CAR-T细胞比例、CD19 CAR的DNA表达变化，观察骨髓白血病细胞比例及供者嵌合情况。另外，通过制备小鼠CD19 CAR-T（FMC63）细胞，并将CAR-T细胞注射至同窝小鼠体内，14 d后，再次注射同窝小鼠的B淋巴细胞，在此过程中观察CAR-T细胞、B淋巴细胞比例以及CD19 CAR的DNA表达，以此来模拟临床治疗过程。结果①患者输注人源化CD19 CAR-T细胞后第14天，疗效评估达完全缓解（CR），供者嵌合率为99.76%，细胞因子释放综合征1级。②人源化CD19 CAR-T细胞治疗缓解后，单独输注供者造血干细胞维持治疗，输注后第24天出现移植物抗宿主病（GVHD），患者GVHD期间伴有外周血CD19 CAR-T细胞比例及CD19 CAR DNA水平的升高，并随GVHD缓解下降。过程中患者维持CR且供者嵌合率为99.69%。③随后单独输注供者T淋巴细胞维持治疗，回输后第12天患者出现GVHD，而患者外周血CD19 CAR-T细胞比例及CD19 CAR的DNA水平并未出现再次升高。过程中患者维持CR且供者嵌合率为99.87%。④C57小鼠体内试验证实，CAR-T细胞输注后小鼠体内CAR-T细胞扩增及DNA表达上调，同时CD19+ B淋巴细胞耗竭。之后输注CD19+ B淋巴细胞，CD19 CAR-T细胞扩增和CD19 CAR的DNA表达再度上调。结论供者造血干细胞、供者T淋巴细胞的单独输注，可作为异基因造血干细胞移植后复发B-ALL接受CD19 CAR-T治疗缓解后的维持治疗手段，且输注供者造血干细胞诱发GVHD同时出现CD19 CAR-T细胞和CD19 CAR的DNA表达上调，有可能进一步清除残留灶。

简介：摘要目的研究靶向CD19的嵌合抗原受体T细胞（CAR-T细胞）治疗复发难治Ph染色体阳性急性B淋巴细胞白血病（R/R Ph+ B-ALL）的安全性及有效性。方法对2016年11月至2019年4月采用CD19 CAR-T细胞治疗的14例R/R Ph+ B-ALL患者的临床资料进行回顾性分析。结果14例患者中，男7例，女7例，中位年龄33（7~66）岁。输注CAR-T细胞后第28天近期疗效：总反应率（ORR）为100.0%（14/14），其中完全缓解（CR）率为92.9%（13/14）；部分缓解（PR）率为7.1%（1/14）。CAR-T细胞治疗后有12例（85.7%）发生细胞因子释放综合征（CRS），其中1级1例、2级4例、3级6例、4级1例；1例（例3）发生CAR-T细胞相关脑病综合征（CRES）；全部14例患者均有Ⅲ~Ⅳ级血液学不良反应；13例CR患者均发生B细胞发育不全。上述不良反应均可控。中位随访441（182~923）d，中位总生存期、无进展生存期分别515（95% CI 287~743）d、207（95% CI 123~301）d。结论CD19 CAR-T细胞治疗复发难治性Ph+ B-ALL安全有效，短期疗效显著，长期疗效有待进一步提高。

简介：造血干细胞移植是治疗造血系统疾病的有效方法，但是发生率及死亡率都很高的移植物抗宿主病（GVHD）限制了这一治疗方法的广泛应用。目前免疫抑制药物虽然是最有效的治疗GVHD的办法，但是患者长期服用容易导致严重感染和肿瘤。因此，人们在寻找能够诱导抗原特异性的移植耐受的方法，以减少或减轻GVHD发生。目前发现体内存在一类CD4^＋CD25^＋免疫调节性T细胞（regulatoryTcells，Treg细胞）在减少或减轻GVHD发生方面显示了一定的应用前景，本文就CD4^＋CD25^＋Treg细胞在GVHD防治中的应用前景进行了综述。

简介：摘要目的通过体外试验探究慢性淋巴细胞白血病细胞损害CD8+T细胞的线粒体代谢功能影响嵌合抗原受体的T淋巴细胞(chimeric antigen receptors modified T cells，CAR-T)的效能。方法将培养得到的CAR-T细胞和CD8+T细胞作为正常组，感染组为加入慢性淋巴细胞白血病细胞进行侵染的CAR-T细胞和CD8+T细胞。采用FACScan流式细胞仪检测CAR-T细胞的凋亡情况；Western blot检测细胞凋亡相关的蛋白Bcl-2、cleaved-caspase-3和Bax的相对表达量；酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)检测炎症因子肿瘤坏死因子(tumour necrosis factor-alpha，TNF-α)、白细胞介素(interleukin，IL)-6和IL-10的变化；使用Pierce BCA蛋白检测试剂盒测定蛋白质浓度；化学发光发检测细胞内三磷酸腺苷(adenosine triphosphate，ATP)水平，分光光度计检测线粒体丙二醛(malondialdehyde，MDA)、还原型谷胱甘肽(glutathione，GSH)的含量；荧光探针法检测胞内钙离子浓度的变化，实时荧光定量PCR检测线粒体DNA表达水平的变化。结果正常组CAR-T细胞凋亡率显著低于感染组CAR-T细胞凋亡率，差异有统计学意义[(4.58±0.16)%比(7.06±0.74)%，χ2＝5.674，P<0.05]。感染组的Bax和cleaved-PARP表达量明显高于正常组，Bcl-2表达量明显低于正常组，差异具有统计学意义[(3.51±0.01)%比(1.07±0.01)%，(2.34±0.05)%比(1.36±0.04)%，(0.66±0.02)%比(1.17±0.02)%，χ2值分别为298.838，26.509和31.231，P值均<0.05]。感染组的IL-6、TNF-α表达量较正常组明显升高，IL-10表达量较正常组明显降低，组间差异具有统计学意义[(87.69±21.07)ng/L比(43.25±5.36)ng/L，(65.12±15.75)ng/L比(33.14±5.23)ng/L，(16.02±1.69)ng/L比(24.33±2.33)ng/L，t值分别为3.54，3.338和4.988，P值均<0.05]。感染组的ATP和总钙离子浓度低于正常组，差异具有统计学意义[(0.15±0.03)μmol/g比(0.32±0.06)μmol/g，(12.46±2.74)μmol/L比(25.97±3.49)μmol/L, t值分别为4.389和5.274，P值均<0.05]。感染组的MDA含量高于正常组，GSH含量低于正常组，差异具有统计学意义[(1.84±0.23)μmol/L比(1.34±0.21)μmol/L，1.07±0.17)pg/mg比(5.23±0.36)pg/mg，t值分别为2.781和18.098，P值均<0.05]。感染组CD8+T细胞线粒体基因蛋白的表达量明显低于正常组，差异具有统计学意义[(0.62±0.03)%比(1.01±0.06)%, χ2＝10.070，P<0.05]。结论离体状态下慢性淋巴细胞白血病细胞通过损害CD8+T细胞的线粒体代谢功能促进CAR-T细胞的凋亡。

简介：[摘要]嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞治疗被认为是治疗复发或难治性肿瘤，特别是血液系统恶性肿瘤的有效方法。尽管最初批准的抗CD19 CAR-T疗法取得了令人印象深刻的结果，但也经历了高复发率和耐药性等挫折，促使人们需要发现更有效的工程CAR-T细胞用于治疗。CAR-T细胞在结构和制造方面的创新导致了疗效和持久性的显著改善，特别是随着第四代CAR-T细胞的发展。与免疫调节剂配对，第四代和下一代CAR-T细胞的使用将不会因为细胞毒效应而受到限制，将成为克服肿瘤微环境的有效工具。本文综述了CAR-T细胞结构在胞外区、跨膜区和胞内区的最新变化，结合创新的制造技术和改进的细胞来源，展望了CAR-T细胞治疗的未来发展前景。

简介：摘要：CAR-T疗法是一种治疗肿瘤的新型精准靶向疗法，它是依托基因工程技术，人工改造肿瘤患者的T细胞，在体外大量培养后生成肿瘤特异性CAR-T细胞，之后将其回输入患者体内用以攻击癌细胞。近几年，CAR-T细胞疗法成为医学科研人员的重要研究课题。本文回顾了CAR-T细胞疗法的发展历程，分析最新的研究进展，并对未来进行展望，以期为肿瘤免疫疗法的研发提供参考。

简介：无

简介：无

简介：目的寻找能调节T细胞功能的相关分子,进行与T细胞介导的自身免疫性疾病相关的研究。方法从BALB/c小鼠骨髓中收集树突状细胞,免疫Wistar大鼠,进行细胞融合,建立杂交瘤细胞系。筛选得到很多株能调节T细胞功能的杂交瘤细胞系,对其中一株最能抑制T细胞增殖的杂交瘤细胞系进行了进一步的深入研究。结果显示其目标分子是CD45,同时增殖实验结果显示该抗体能显著抑制T细胞增殖反应。结论抗CD45单克隆抗体能有效抑制T细胞增殖,有望将本抗体用于T细胞介导的自身免疫性疾病的相关预防及治疗中。

简介：摘要目的比较非小细胞肺癌（non-smallcelllungcancer，NSCLC）患者外周血CD3+T细胞、CD4+CD25high调节性T细胞（regulatoryTcell，Tregcell）健康人的差异，并分析其临床意义。方法选取NSCLC患者和健康对照组各20例。分别抽取患者和志愿者的外周血3ml，分离其外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell,PBMC)，采用流式细胞仪检测CD3+T细胞比例、CD4+CD25highTreg细胞比例(%)。结果健康组CD3+T细胞比例为61.52±13.46%，肺癌组CD3+T细胞比例为55.15±20.11%，两组比较无显著性差异。健康组CD4+CD25highTreg细胞的比例为2.14±0.85%；肺癌组CD4+CD25highTreg细胞的比例为2.76±0.53%，较健康人明显升高（p<0.05）。结论非小细胞肺癌患者存在免疫受损，可能对此开发有效的免疫治疗方法。

简介：摘要：肿瘤免疫治疗开启了癌症治疗的新纪元，其中CAR-T免疫细胞疗法成为了肿瘤免疫治疗的热点领域。本文从全球及中国角度对CAR-T细胞治疗领域的关键技术CAR-T细胞制备进行研究，从技术发展趋势、技术发展路线两方面对CAR-T的制备相关技术的主要分支领域进行深入研究。

简介：摘要：临床治疗的应用是对CAR-T技术的有效性检验，本文从技术发展趋势、重点专利分析两方面对CAR-T细胞临床治疗应用的关键技术进行梳理分析，期望对未来CAR-T细胞临床治疗的研究提供新思路。

简介：