简介:2019年12月以来,湖北省武汉市部分医院陆续发现了多例有华南海鲜市场暴露史的不明原因肺炎病例,现已证实为2019新型冠状病毒感染引起的急性呼吸道传染病。继而全国陆续各地爆发新型冠状病毒肺炎病,该病毒以接触传播、飞沫传播、气溶胶传播。国家卫健委已发布公告,将新型冠状病毒感染的肺炎纳入传染病防治法规定的乙类传染病,但采取甲类传染病的预防、控制措施,同时将其纳入检疫传染病管理。通过核酸检测是确认新型冠状病毒肺炎的常用方法,该方法简单,但是也需要一定的技巧,需要在采样前后做好各项准备工作。
简介:摘要:新型冠状病毒肺炎属于一种急性感染性肺炎,具有极强的传染性。当前,新型冠状病毒肺炎并没有特效疗法,只有早期诊断并及时进行防控,才能够阻止疫情的传播。新型冠状病毒核酸检测技术有实时荧光定量RT-PCR技术、数字PCR技术、核酸POCT技术等,在大人群样本的新型冠状病毒筛查中,通过混采和混样进行检测,核酸检测阳性是确诊标准。本文主要对新型冠状病毒核酸检测技术和检测方式展开探究。
简介:摘要目的利用室间质量评价(EQA)评估实验室新型冠状病毒(2019-nCoV)核酸检测项目的检测能力。方法室间质量评价选用经特殊处理的2019-nCoV RNA作为EQA样本,甲型流感病毒、乙型流感病毒、呼吸道合胞病毒灭活临床样本作为阴性样本,分别评价其适用性、均匀性和稳定性后,将6份样本(第一轮不分组/第二轮分组)经冷链快递发送至参评实验室,要求实验室在规定时间内检测并回报检测信息和结果,然后对回报数据进行分析评价。结果EQA样本适用于市面上主流核酸检测试剂。均匀性和稳定性均符合中国合格评定国家认可委员会对能力验证样品的要求。第一轮和第二轮分别收到有效回报结果243份和60份,回报结果完全正确的实验室分别为98.8%(240/243)和73.3%(44/60),成绩不合格实验室分别为1.2%(3/243)和26.7%(16/60)。第一轮和第二轮样本的整体符合率分别为99.8%(1 455/1 458)和94.7%(341/360),其中假阳性率分别为0.1%(1/729)和2.5%(3/120),假阴性率分别为0.3%(2/729)和6.7%(16/240)。结论目前参评实验室对2019-nCoV核酸检测的整体能力较好,假阴性结果是影响其检测的主要问题。各实验室在常规应用相关试剂前,应对不同厂家试剂进行性能验证与比对。
简介:摘要目的评估新型冠状病毒(2019-nCoV)样本混采对提取、扩增步骤的影响。方法取10只阴性咽拭子储存在6 ml病毒保存液中,充分混匀后1∶2、1∶10稀释,加入灭活2019-nCoV病毒培养液,以模拟10混1、5混1和单人份检测。使用a、b、c 3种提取方式和体系不同的核酸提取试剂及A~E 5种模板上样量和检测灵敏度不同的扩增试剂分别进行提取和扩增。结果对于相同的模拟混采样本,a提取的模板比b、c提取的模板检测循环阈值(Ct)分别提前2.10±0.47和3.46±0.62;扩增相同的混采核酸模板,A试剂的N基因Ct值比B试剂提前1.16±0.48,ORF1ab基因Ct提前2.36±0.54。扩增体系中加入10拭子核酸使A试剂检测Ct值滞后1.36±0.32,对B试剂无影响。使用a试剂提取,10混1混采后,C、D、E试剂的扩增Ct值比检测单拭子样本高1.66±0.39。对于400拷贝/ml的10混1样本,C、E试剂均可检出,D试剂的N基因漏检。结论混采引入的大量人基因组DNA干扰提取和扩增效率。在加大样本提取体积、提高提取试剂性能的同时,应选择大模板量上样、检测灵敏度高的扩增试剂,方可提高系统灵敏度和结果稳定性,大大降低漏检风险。
简介:【摘要】:新型冠状病毒肺炎是由新型冠状病毒 (2019-nCoV)引起的一种急性的呼吸道传染疾病,可迅速发展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍,严重威胁患者的生命健康安全。经相关学者对新型冠状病毒毒株的检验研究后,确认通过实时荧光 RT-PCR核酸检测可对新型冠状病毒进行临床诊断,可以早发现、早诊断、早治疗或尽早与其他病毒感染者进行鉴别诊断。
简介:【摘要】目的:观察分析新型冠状病毒实验室核酸相关原理方法,在新型冠状病毒实验过程中使用实时荧光定量PCR检测方法,分析此种检测方法的临床检验价值以及相关实验室注意内容。方法:随机选择我院近两个月时间内(2022年1月至2022年3月)在对患者所检测的咽拭子(共计10000例),对其使用实时荧光定量PCR方式进行临床检测工作,进而分析其临床检测价值。结果:2019nCoV核酸检测结果为阳性的患者例数为13例,结果为阴性的患者例数为9987例,为此阳性率为0.13%。结论:及时开展2019-nCoV核酸检测工作尤为关键,荧光实时定量PCR实验室检测方式使用于2019-nCoV核酸检测工作中,具有较高的安全性与有效性,可以及时对等待检测的样本开展检测处理,能够有效对新型冠状病毒进行检测与抑制。