简介:近年来,石墨烯(GN)由于具有非凡的物理和化学性质而受到广泛关注,这为分析化学的发展带来了新的活力。电化学器件与GN的耦合提供了一个很好的平台,来实现对许多生物材料的诊断和检测。我们小组首次报道,利用石墨烯电极电化学自发检测存在于ssDNA和dsDNA的所有4个DNA碱基,该检测是在生理pH条件下,并且不需要预水解步骤。我们研究证明了利用独特的GO/适配体相互作用和特异性核酸适体目标识别,GO/适配子系统可以程序化地完成较复杂的ORandINHIBIT逻辑门。在不同输入相同波长的不同荧光强度下,进行多靶点调节荧光强度和ORandINHIBIT逻辑门,从而组合成组合逻辑门。组合逻辑门可利用荧光成像进行高通量诊断。在组合逻辑门的输出的基础上,我们可以找出ATP和凝血酶是否存在。这个概念的证明可以为多重分析和纳米生物医学器件对多个输入的化学物质响应提供一种新方法。
简介:用化学方法合成随机DNA库,应用SELEX技术筛选能与苏云金芽孢杆菌(Bt)结合的DNA适配子,经过12轮的筛选后,适配子与Bt结合的亲和力达到饱和。在克隆获得的18个适配子序列中,有3个适配子具有较高的亲和力,其中多数具有典型的三茎环结构。
简介:摘要目的利用指数富集的配体系统进化技术(SELEX)筛选与大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)特异性结合的核酸适配子(apt),探讨apt与BMSCs的结合方式及能力。方法利用SELEX技术,以大鼠BMSCs为靶点,从构建的核酸文库中反复筛选、克隆、测序及分析,获得候选apt。流式细胞术测定和软件分析获得不同浓度(0、4、8、16、32、64、128、256 nmol/L)候选apt与BMSCs的结合曲线及平衡解离常数。胰酶消化实验探究apt与BMSCs结合的靶点,并观察apt体外捕获BMSCs的能力。结果流式细胞术与荧光共聚焦实验表明SELEX筛选第9轮文库与BMSCs结合能力最高。经序列分析适配子apt7与BMSCs的亲和力最高,平衡解离常数为(11.79±0.72) nmol/L。胰酶消化实验表明当胰酶消化细胞时间超过10 min后,apt7与BMSCs的亲和力下降甚至消失。体外捕获实验表明固定于培养皿上面的apt7能体外捕获骨髓细胞液中的大鼠BMSCs。结论本研究通过SELEX技术成功分离出能高亲和力、高特异性结合大鼠BMSCs的特异性适配子apt7,为进一步将适配子应用于组织工程支架表面招募循环干细胞研究提供了实验依据。
简介:摘要结合减数分裂过程,通过构建模型、运用模型分析,使学生直观了解生物的配子中染色体组合具有多样性,以及多样性的原因和规律。培养学生正确的生命观和科学思维的能力。
简介:配子体自交不亲和由具有多基因的单一位点S位点控制,该位点包括紧密连锁的雌性(雌蕊)和雄性(花粉)S决定因子.本文综述了近年来金鱼草、矮牵牛、李亚科植物花粉特异性F-box基因的鉴别及雄性S决定因子的鉴定,论述了雄性决定因子在自交不亲和反应中的功能研究进展.当前对雄性决定因子的功能研究认为,在亲和反应中它非特异地与S-RNases作用,通过形成一个功能的SCF复合体仅使非自身S-RNase被泛素介导的26S蛋白酶体降解,花粉管得以继续生长至胚囊完成双受精;而自身S-RNase的活性被特异保留,作为细胞毒素降解花粉管RNA,从而抑制自身花粉管的生长.