简介:目的:建立近似自然感染的丙型肝炎病毒(hepatitisCvirus,HCV)体外感染细胞模型.方法:将含10%HCVRNA阳性血清的接种液和HepG2细胞在37℃、5%CO2条件下共同孵育24h,再加含新生牛血清、地塞米松、胰岛素及硫酸亚铁的维持培养液,置32℃、5%CO2条件下培养,以后每3~4d传代一次,定期收集培养上清液和细胞.应用RT-nested-PCR、免疫组化及Westernblot进行病毒核酸和蛋白质的检测.结果:RT-nested-PCR法检测发现在接种病毒后第4~16天的细胞标本中可检测到HCVRNA正链,接种病毒后第4~24天的细胞标本则可检测到HCVRNA副链.通过免疫组化和Westernblot检测,病毒蛋白(NS3)能在第4天检出.结论:HCV体外感染HepG2细胞模型的建立,可望用于HCV吸附肝细胞机制研究及疫苗中和试验.
简介:风停了,回声还没散。山里的风刮得深沉,犹如海啸雷吼一般。老铁就爱听这山风,爱听风过后的回声。站在门口听风,是老铁的爱好。这架山上没别人,老铁一个人守护着这架山林,快一年了。没人跟他说话,他只有听风。老铁转业,被分配到县公安局。当时山林破坏严重,正愁没人上山守林。领导让他上山守林,他一咬牙去了。背着从部队带回来的军用行装,一个人上了这架山,砍了些树枝搭起一个窝棚。后来,局领导筹款给他盖了间房子。在房子里住着很孤独,时间一长也习惯了。山上有了他,林木没人敢偷伐了。老铁每月下山背一回粮,喝的是山缝里流出来的一股泉水。每次下山背粮,感受着县城里的喧嚣,心里免不了一阵子酸楚。可他还得上山,他知道那架山没