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  • 简介:摘要目的构建跨膜蛋白(transmembrane protein,TMEM)240慢病毒载体,并在人神经母细胞瘤细胞中表达。方法提取人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y的RNA,逆转录成cDNA并作为模板,聚合酶链反应(polymerasechain reaction,PCR)扩增TMEM240的CDS序列,与pLVX-EGFP-N1载体连接,转化、验菌送公司测序,pLVX-TMEM240-EGFP-N1质粒与慢病毒包装质粒共转染293Ta细胞,收取上清,感染SH-SY5Y,嘌呤霉素筛选,获得表达TMEM240的SH-SY5Y细胞,将感染pLVX-EGFP-N1的SH-SY5Y细胞作为对照组,感染pLVX-TMEM240-EGFP-N1的SH-SY5Y细胞为实验组。通过共聚焦显微镜、实时定量聚合酶链式反应(real-time quantitative PCR,Real-time PCR)和Western blot检测细胞中TMEM240表达。结果测序结果显示pLVX-TMEM240-EGFP-N1质粒构建成功;共聚焦显微镜下,表达TMEM240的细胞内出现点状绿色荧光;Real-time PCR及Western blot结果表明细胞内TMEM240表达。结论成功构建TMEM240慢病毒载体,慢病毒在基因和蛋白水平均引起TMEM240表达升高。

  • 标签: 跨膜蛋白240 慢病毒载体 人神经母细胞瘤细胞
  • 简介:摘要:本文详细的阐述了箱式发电机组用16V240ZD系列柴油发动机的主要技术参数和设计、研究以及开发的过程,及其在应用中可能存在的问题,并提出了解决问题的方法和思路。

  • 标签: 柴油机 4号燃料油 重柴油 16V240ZD
  • 简介:【摘 要】随着通信网络技术的高速发展,对稳定高效的电源提出更高要求,为保证机房通信设备供电不受影响,设备替换需采用不断电进行电源割接。

  • 标签: 240V高压直流 不断电 原址替换