简介：目的：建立完整的Caco-2细胞单层模型，以利于药物转运的研究。方法：通过测量细胞生长过程中跨膜电阻（TEER）值和碱性磷酸酶活性，评估Caco-2细胞单层模型是否建立成功。结果：细胞接种到Transwell板后的第7天，TEER值就已达到209，75Q·cm^2，第10天后，几乎成线性上升，直到第22天到达-个稳定值627Q·cm^2：细胞生长的第3天，磷酸酶活性非常低，第15天时磷酸酶活性比较高。到了第22天时，磷酸酶活性进-步增加，AP／BL为第15天时的2倍。结论：建立的Caco-2细胞单层模型致密且完整，检测细胞生长过程中TEER值和碱性磷酸酶活性，可用于评估Caco-2细胞单层模型建立成功。

简介：随着环境重金属污染的加剧和营养学的发展,人们越来越重视对重金属元素及营养金属元素肠道吸收过程的探讨及其生物有效性影响因素的研究.Caco-2细胞模型能有效的模拟人体小肠上皮细胞的转运与吸收过程,可结合基因技术、分子技术等手段用于研究人体肠道吸收物质的机制和影响因素.首先,总结了近年来利用Caco-2模型对镉、铬、铅、砷等多种重金属及铜、铁、锌、钙等多种营养金属在小肠内的吸收、转运方式、代谢机制及影响吸收、转运过程的各类条件等的研究工作,然后对Caco-2细胞模型研究方法及其在未来评估金属人体生物有效性的应用进行了展望.

简介：摘要目的本研究旨在应用LC/MS/MS鉴定Caco-2细胞中吴茱萸次碱的代谢产物，推测其代谢途径。方法在Caco-2细胞中加入100μM吴茱萸次碱处理3h、6h、12h，其后收集并纯化样品，LC/MS/MS分析鉴定代谢产物。结果吴茱萸次碱的代谢产物是单羟基化吴茱萸次碱M1。结论LC/MS/MS灵敏、操作简单，可快速鉴定Caco-2细胞中的吴茱萸次碱的代谢产物。

简介：目的：研究在Caco-2细胞模型中不同转运蛋白对瑞香素吸收的影响。方法：采用Caco-2细胞单层模型研究转运蛋白对瑞香素的吸收影响。采用HPLC法检测药物浓度,计算其表观渗透系数,考察不同转运蛋白抑制剂对瑞香素吸收的影响。结果：在10μg/ml的瑞香素溶液中加入P-gp抑制剂维拉帕米50μmol后,瑞香素PBA/PAB均无显著性差异（P〉0.05）;加入MRP2抑制剂环孢素10μmol后,PBA/PAB降低了10%;加入BCRP抑制剂潘生丁25μmol后,PBA/PAB降低了29%。结论：在瑞香素的跨膜转运的过程中不存在肠道转运蛋白P-gp的作用,但可能存在MRP2、BCRP的外排。

简介：摘要目的介绍皂苷类中药成分在Caco-2细胞模型上的代谢研究进展。方法依据近年来国内外的相关文献资料，对Caco-2细胞模型在皂苷类成分的生物利用度、吸收机制、药物相互作用、代谢研究中的应用进行综述。结果和讨论对皂苷类中药成分在Caco-2细胞模型上的转运和代谢的研究，可预测药物在体内的吸收与代谢情况，为药物的研究开发提供依据。

简介：目的通过研究远志皂苷水解物主要活性成分3,4,5-三甲氧基肉桂酸（TMCA）、对甲氧基肉桂酸（PM-CA）和细叶远志皂苷（TF）的肠转运特性,预测其口服生物利用度。方法利用Caco-2细胞模型,以及所建立的LC-MS/MS分析方法,研究上述3个成分在不同浓度下从顶侧（AP）到基底侧（BL）以及从BL到AP2个方向的转运特性。结果TMCA和PMCA2个酚酸化合物具有较好的膜通透性,在不同浓度下从AP到BL的表观渗透系数（Papp）均〉10×10-6cm.s-1,而三萜皂苷TF的通透性较差,Papp值均〈1×10-6cm.s-1。3个化合物的转运量均随浓度的增加而增加,但Papp值保持基本一致,且各自2个方向的Papp值无明显差异。结论TMCA和PMCA具有良好的肠通透性,属吸收较好的化合物,而TF则通透性较差,口服吸收可能很有限;3个化合物均以被动扩散形式转运,且无外排转运机制。

简介：摘要Caco-2细胞模型（humancolonadenocarcinomacdllline）来源于人结肠腺癌细胞的Caco-2细胞，目前被公认为药物吸收研究的一种快速筛选工具；可在细胞水平上提供药物透过小肠粘膜的吸收、分布、代谢、转运的综合信息，为口服药物研究提供依据。2002年被国际认定为动物实验的替代方法，国内已有Caco-2细胞模型应用于黄酮类、生物碱类、皂苷类等口服中药成分作用机制的研究并取得了良好的成果。

简介：甘草苷和异甘草苷是中药甘草中的主要黄酮类成分，前者归属为二氢黄酮类化合物，后者归属为查耳酮类化合物。本文利用体外人源Caco-2细胞单层模型进行甘草苷和异甘草苷的肠吸收研究。通过双向转运研究，对两个化合物在该模型的渗透性进行评价，并借此预测其在人体的肠吸收机制。采用HPLC-UV方法测定化合物的浓度，并计算相关渗透参数。甘草苷和异甘草苷的表观渗透系数分别为（5．40±0．16）×10^-7和（8．69±0．15）×10^-7cm／s。虽然甘草苷和异甘草苷为两个不同类型的化合物，但均为吸收较差的化合物，吸收程度与糖基密切相关。从吸收时间、浓度依赖性上判断2个化合物主要吸收机制均为被动扩散。

简介：摘要目的通过观察高浓度丁酸钠(sodium butyrate，NaB)(5 mmol/L，8 mmol/L)对单层Caco-2细胞肠屏障模型的作用，及该过程中对NF-κB通路的影响，旨在探讨高浓度NaB破坏单层Caco-2细胞肠屏障模型的可能分子机制。方法使用不同浓度的NaB及雷公藤甲素(triptolide，TP)(特异性抑制NF-κB)50 nmol/L作用体外培养的Caco-2细胞及单层Caco-2细胞肠屏障模型，按照作用的试剂和浓度分为0 mmol/L NaB(对照组)、50 nmol/L TP组(TP组)、2 mmol/L NaB组(NaB Ⅰ组)、5 mmol/L NaB(NaB Ⅱ组)、8 mmol/L NaB(NaB Ⅲ组)、5 mmol/L NaB＋50 nmol/L TP组(NaB＋TP组)。测定单层Caco-2细胞肠屏障模型的跨上皮电阻(transepithelial electrical resistance，TER)及菊粉-FITC(inulin-FITC)的通透性；用实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction，qRT-PCR)及蛋白质印迹法检测各组IL-1β和TNF-α的mRNA及蛋白水平；用核质分离试验检测p65蛋白入核水平的变化。结果①高浓度NaB(5 mmol/L、8 mmol/L)作用于单层Caco-2细胞肠模型72 h后，与对照组相比，TER显著下降，inulin-FITC通透性显著升高；如5 mmol/L NaB作用于单层Caco-2细胞肠屏障72 h，TER降低至(106.33±4.04)(Ω×cm2)，inulin-FITC的通透性升高至(12.52±1.82)%，与对照组相比，差异均具有统计学意义(P<0.05)；而使用50 nmol/L TP特异性抑制NF-κB后，其TER升高至(398.33±3.06)(Ω×cm2)，inulin-FITC的通透性降低至(7.24±0.25)%，差异具有统计学意义(P<0.05)，提示5 mmol/L NaB对肠屏障的破坏作用被显著抑制；②高浓度NaB(5 mmol/L、8 mmol/L)作用Caco-2细胞72 h，IL-1β和TNF-α mRNA及蛋白的表达水平较对照组显著提高，且p65蛋白入核水平也显著提高，差异具有统计学意义(P<0.05)；③在5 mmol/L NaB的基础上，使用TP抑制NF-κB后，可显著抑制高浓度NaB诱导IκB-α的磷酸化及p65蛋白入核，并显著降低IL-1β与TNF-α的表达水平。结论高浓度NaB可破坏肠屏障功能，其机制可能与活化NF-κB通路，促进炎症因子释放相关。

简介：阿魏为伞形科植物，是新疆特色资源植物。本课题组前期研究表明，新疆阿魏乙酸乙酯提取物对人结肠癌细胞HCT116具有增殖抑制作用[1]。

简介：摘要目的观察苦参碱(Matrine，MA)体外诱导人结肠癌Caco-2细胞的凋亡作用并探讨其机制。方法分别采用不同浓度苦参碱作用Caco-2细胞24小时后，MTT法检测细胞增殖,流式细胞仪检测苦参碱对Caco-2细胞凋亡和细胞周期的影响，Westernblot法检测线粒体凋亡途径相关蛋白Bax、Bcl-2的表达水平。结果在2～16mg/mL苦参碱作用下，Caco-2细胞增殖被明显抑制，且呈时间和剂量依赖性(P<0.05或P<0.01)；采用4、8和16mg/mL苦参碱作用Caco-2细胞24h后，细胞凋亡率分别为(14.64～2.45)％、(37.60～2.39)％和(53.10～1.70)％，均明显高于对照(4.36～0.22)％(P<0.05)；经苦参碱作用24h后，细胞Bax蛋白表达增加，而BeL-2表达减少，呈剂量依赖性。MA显著诱导Caco-2细胞凋亡；16mg/mlMA作用Caco-2细胞24小时后，caspase-9，-3酶活性明显升高；Westernblot结果显示MA处理组促凋亡蛋白Bax表达明显升高，抗凋亡蛋白Bcl-2表达明显降低。结论MA具有促进结肠癌细胞凋亡的作用，且具有剂量依赖性，其机制可能与线粒体凋亡途径有关。

简介：摘要目的研究马钱科胡蔓藤属植物钩吻种钩吻素子在人源肠Caco-2细胞单层模型中的吸收特性。方法利用人源结肠腺癌细胞Caco-2细胞单层模型测试钩吻素子从AP端到BL端以及BL端AP端2个方向的转运过程研究，采用HPLC法对钩吻素子进行定量分析，计算累积吸收量和表观渗透系数(Papp)，并与对照药普萘洛尔和阿替洛尔进行比较。结果不同浓度钩吻素子由AP端到BL端(A-B面)的Papp、吸收量与浓度成线性关系，而由BL端到AP端(B-A面)的Papp约为A-B面的2倍，提示存在外排现象。结论钩吻素子可能以被动扩散为主要转运方式被小肠上皮细胞摄取和转运，可以通过小肠上皮细胞被动吸收进入体内。

简介：摘要目的探讨肠炎沙门菌spvD基因对人克隆结肠腺癌Caco-2细胞侵袭力及胞内增殖力的影响。方法利用自杀质粒介导的同源重组技术构建spvD基因缺失株，PCR扩增并克隆spvD基因于pBAD33表达载体获得回补质粒，导入相应缺失株得到回补株，并将pBAD33导入野生株及缺失株作为空载对照。荧光定量反转录聚合酶链式反应检测spvD mRNA表达水平。以Caco-2细胞作为体外模拟人肠上皮细胞模型，分别将野生株、缺失株及回补株与其共培养，探究spvD基因对Caco-2细胞的毒力。使用LSD-t检验进行3组间spvD mRNA表达水平比较及胞内活菌数比较，使用χ²检验进行3组间侵袭率的比较。结果以野生株spvD mRNA表达量作为单位“1”，缺失株为“0.00”、回补株为“2.60”（LSD-t野生株，缺失株=1.11，P=0.31；LSD-t野生株，回补株=-1.77，P=0.13；LSD-t缺失株，回补株=-2.88，P=0.03），该结果证实了缺失株及回补株的成功构建。上述3组肠炎沙门菌对Caco-2细胞的侵袭实验结果显示，野生株侵袭率为0.23%，缺失株侵袭率为0.16%，回补株侵袭率为0.16%，差异无统计学意义（χ2=1.13，P=0.570）。通过比较细菌干预Caco-2细胞后不同时间点胞内活菌数，发现在干预16 h时，野生株（6.50×106 CFU/ml）、回补株（7.25×106 CFU/ml）胞内活菌数明显增多，均高于缺失株（1.90×106 CFU/ml）（LSD-t野生株，缺失株=7.95，P=0.00；LSD-t野生株，回补株=-1.27，P=0.25；LSD-t缺失株，回补株=-9.22，P=0.00）。结论尚不能认为spvD基因影响肠炎沙门菌对Caco-2细胞的侵袭力，但该基因可促进肠炎沙门菌在Caco-2细胞内增殖。

简介：摘要目的探讨高迁移率族蛋白B1（high mobility group box 1，HMGB1）在脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导的Caco-2细胞肠上皮屏障损伤中的作用及机制。方法用Transwell小室培养Caco-2细胞，检测跨上皮电阻值（TEER值），当TEER值达到500 Ω·cm2时，单层上皮屏障模型建立成功，将其分为对照组，LPS组，LPS+丙酮酸乙酯（ethyl pyruvate，EP）组，LPS和EP的处理浓度分别为100 μg/mL、50 μg/mL，分别于处理后12、24、48、72 h用电阻仪测量各组TEER值；24 h时用酶标仪检测FITC-右旋糖酐通透率。将细胞接种于6孔板，融合达到80%时给予以上分组及处理，24 h后用蛋白印迹法（Western Blot）检测各组细胞Occludin蛋白、HMGB1、核转录因子（NF-κB）蛋白表达水平；实时聚合酶链式反应技术检测各组细胞Occludin、HMGB1、NF-κB mRNA表达情况。应用SPSS 21.0软件进行统计分析。计量资料多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。结果与对照组相比，LPS组12、24、48、72 h TEER值（Ω·cm2）明显减少[(514.22±12.59) vs (304.96±9.69), (521.65±13.35) vs (276.21±7.82), (523.99±8.18) vs (206.64±15.85), (491.21±6.72) vs (156.33±10.83),均P<0.05]，24 h时FITC-右旋糖酐通透率明显增加[(2.58±0.07) vs (1.04±0.06)，P<0.05]，Occludin蛋白及mRNA表达减少(均P<0.05)，HMGB1、NF-κB蛋白及mRNA表达明显增加(均P<0.05)；与LPS组比较，LPS+ EP组12、24、48、72 h TEER值（Ω·cm2）增加[(519.00±5.66) vs (304.96±9.69), (504.69±8.57) vs (276.21±7.82), (453.65±10.74) vs (206.64±15.85), (385.28±7.57) vs (156.33±10.83),均P<0.05]，24 h时FITC-右旋糖酐通透率明显减少[(1.23±0.11) vs (2.58±0.07), P<0.05]，Occludin蛋白及mRNA表达明显增加(均P<0.05)，HMGB1、NF-κB蛋白及mRNA表达减少(均P<0.05)。结论LPS引起肠上皮通透性升高，减少细胞间紧密连接蛋白的表达，其机制可能与HMGB1及下游NF-κB蛋白表达增加有关。

简介：目的建立胰高血糖素样多肽2受体（glucagonlikepeptide-2receptor，GLP-2R）上调表达的Caco2细胞株，为研究GLP-2肠道保护机制构建体外模型。方法常规扩增抽提GLP-2R／pcDNA3．1质粒，经酶切、测序鉴定正确后，用脂质体转染法将其转染至Caco2细胞。G418抗性筛选，挑选耐药细胞克隆培养获得稳定细胞株。以HER293细胞、VE细胞、正常Caco2细胞及正常人小肠组织为对照，采用逆转录聚合酶链反应与蛋白质印迹法检测稳定转染细胞中mRNA及其蛋白的表达。结果扩增抽提GLP-2R／pcDNA3．1质粒后经酶切、测序结果正确。GLP-2RmRNA及其蛋白在HER293细胞及VE细胞中无表达，在正常Caco2细胞中表达微弱，在人小肠组织中有较强表达；转染GLP-2R后，Caco2／GLP-2R（＋）细胞中GLP-2RmRNA及其蛋白表达明显增强。结论GLP-2R分布具有相对特异性，正常Caco2细胞中GLP-2R表达较弱；构建的caco2／GLP-2R（＋）细胞模型成立，为深入研究GLP-2的作用机制奠定了良好基础。

简介：AIMToexploretheprotectiveeffectsandunderlyingmechanismsoftotalpolysaccharidesoftheSijunzidecoction(TPSJ)ontheepithelialbarriersinvitro.METHODSCaco-2cellmonolayersweretreatedwithorwithoutTPSJinthepresenceorabsenceofTNF-α,andparacellularpermeabilityandtransepithelialelectricalresistance(TEER)weremeasuredtoevaluatetheepithelialbarrierfunction.Immunofluorescenceandwesternblottingwererespectivelyusedtoevaluatethedistributionandexpressionofthetightjunctionproteinsclaudin1,claudin2,zo3,andoccludininCaco-2cells.Westernblottingwasalsousedtoevaluatethecellularexpressionofmyosinlightchain(MLC),phosphorylatedMLC(pMLC),MLCkinase(MLCK),andnuclearfactor(NF)-κBp65.RESULTSTPSJpromotedtheproliferationofCaco-2cellsandinhibitedTNF-α-inducedsecretionofpro-inflammatorycytokines.Furthermore,TPSJsignificantlyamelioratedboththereductionofTEERandtheincreasedparacellularpermeabilityobservedintumornecrosisfactor(TNF)-α-damagedCaco-2monolayers.Furthermore,TPSJremarkablyattenuatedTNF-α-inducedmorphologicalchanges,downregulatedtheexpressionofclaudin1,claudin2,zo3,andoccludin,andmarkedlysuppressedTNF-α-mediatedupregulationofp-MLCandMLCKexpression.Finally,TPSJinhibitedtheactivationandexpressionofNF-κBp65.CONCLUSIONOurresultsdemonstratethatTPSJalleviatestheTNF-α-inducedimpairmentoftheintestinalepithelialcellbarrierfunctionbysuppressingNF-κBp65-mediatedphosphorylationofMLCKandMLC.

简介：TheeffectofyttriaonthesolidreactionmechanismofaCaHPO4·2H2O+CaCO3systematdifferenttemperatureswasexperimentallystud-ied.Thesampleswithandwithoutyttriaweresubjectedtothermogravimetric/differentialscanningcalorimetrymeasurement.ThesampleswereheattreatedatthetemperaturescorrespondingtothepeaksontheDSCspectra,andtheresultedphasecompositionswereidentifiedbyX-raydiffraction.Thetransformationmechanismwasdeducedbycomparingthephasesobtainedatdifferenttemperatures.Theresultsshowthatthetransformationsatbelow1073Karenotaffectedbyyttria,butallthoseatabove1073Karecompletelyaltered.Theformationtem-peratureofhydroxyapatitedecreasesby134K,andthedecompositiontemperatureincreasesby38K.ThepolymorphoustransformationofCa3(PO4)2fromβphasetoαphaseincreasesby47K.Thethermodynamicpropertiesofthetransformationsatabove1073Karealsomodi-fiedbytheadditionofyttria;thatis,theendothermalpeaksaresubstitutedbyexothermalpeaks.

简介：TheencapsulationofstearicacidcoatednanometerCaCO3byapolystyrene(PS)networkviaemulsionpolymerizationisdescribed,whereγ-methacryloxypropyltrimethoxysilane(MPS)wasusedasanefficientcrosslinker.TheimportantfactorssuchasthetypeandamountofsurfactantandinitiatorandthecontentofCaCO3areinvestigatedaswellastheroleofMPS.IthasbeenshownthatlittlePSwasextractablewithonly0.6wt%ofMPS(relativetostyrene).Thecationicsurfactantcetyltrimethylammoniumbromide(CTAB)provedmoreeffectivethantheanionicsurfactantsodiumdodecylsulfonate(SDS).Theyieldrises,particlesbecomesmallerandsizedistributionbroadenswithincreasedamountofCTAB.Itisalsofoundthateither2,2′-azobis(isobutyronitrile)(AIBN)orammoniumpersulfate(APS)issuitableforattaininghighmonomerconversion.WithincreasedamountofCaCO3,theencapsulationratiocanbevariedfrom17.9to3.6,whilemonomerconversionandyielddecreaseslightly.FT-IRspectraoftheproductsafterextractionindicatetightencapsulationbetweenPSandCaCO3,andTEMphotographsofcompositeparticleswithwell-definedcore-shellstructuregivedirectevidenceofencapsulation.

简介：然而Wei等[5]在神经元细胞GT1-7中发现Bcl-2中发现Bcl-2可抑制由TG所诱导的凋亡,Yang等[9]与Kluck等[10]发现Bcl-2可以通过抑制线粒体释放Cytc来抑制凋亡,　　Bcl-2抑制细胞凋亡可能与其以下几种作用有关

简介：采用纳米粒子二元复配填充改性及冷压烧结工艺,制备了Al_2O_3/CaCO_3/PTFE三元复合材料,对其力学性能进行了探讨。实验结果表明,纳米粒子的填充显著提高了PTFE的摩擦磨损性能、硬度、抗蠕变性能及拉伸强度,降低了断裂伸长率。当Al2O3质量分数为20%、CaCO_3质量分数为10%时,PTFE复合材料综合力学性能优异。