简介:摘要目的探讨过敏性紫癜(HSP)患儿血清中可溶性CD137的表达水平及其与病情严重程度相关性。方法选择HSP患儿46例作为研究组,健康儿童37例作为正常对照组,用ELISA法检测两组血清可溶性CD137水平。用统计学分析两组血清中可溶性CD137水平及其与病情严重程度的相关性。结果研究组血清可溶性CD137水平显著高于正常对照组(P<0.05)。即与健康儿童对照组相比,HSP患儿血清中可溶性CD137呈现异常高表达,且HSP患儿血清中可溶性CD137含量与病情严重程度呈正相关。结论HSP患儿血清中可溶性CD137水平显著升高及其与病情严重程度正相关,提示CD137可能参与了HSP的发生、发展。
简介:摘要目的探讨CD137-CD137L信号(简称CD137信号)是否通过调控巨噬细胞M1/M2极性转变促进血管新生。方法将3%巯基乙酸盐肉汤诱导的小鼠腹腔原代巨噬细胞分3组,即对照组、CD137信号激动组和CD137信号抑制组,通过检测M1和M2型巨噬细胞的相关特异性标志物观察巨噬细胞表型的变化,采用流式细胞术(FCM)检测巨噬细胞表面CD137、CD86及CD206的表达,Western blot和RT-PCR检测巨噬细胞诱导性一氧化氮合酶(iNOS)、Ⅰ型精氨酸酶(Arg-1)的蛋白和mRNA表达。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测巨噬细胞培养上清中白细胞介素(IL)-12和IL-10分泌水平。将巨噬细胞和内皮细胞(bEnd.3)共培养,上室种植巨噬细胞,下室基质胶种植内皮细胞,实验分为3组,即对照组、CD137信号激动组和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)抑制组,检测各组内皮细胞的管腔形成能力。结果(1)分离的小鼠腹腔原代巨噬细胞纯度为(97.93±1.31)%,巨噬细胞表面CD137表达为(97.40±2.70)%。(2)与对照组比较,CD137信号激动组Arg-1 mRNA和蛋白表达水平较高(P<0.05),iNOS mRNA和蛋白表达水平较低(P<0.05);与CD137信号激动组比较,CD137信号抑制组Arg-1 mRNA和蛋白表达水平较低(P<0.05),iNOS mRNA和蛋白表达水平较高(P<0.05)。流式细胞术显示,CD137信号激动组CD206平均荧光强度高于对照组(P<0.05),而CD86平均荧光强度低于对照组(P<0.01);CD137信号抑制组CD206表达明显低于CD137信号激动组(P<0.05),CD86表达高于CD137信号激动组(P<0.01)。ELISA显示,CD137信号激动组IL-10分泌高于对照组(P<0.01),IL-12分泌明显低于对照组(P<0.01);而与CD137信号激动组比较,CD137信号抑制组IL-10分泌较低(P<0.05),IL-12分泌较高(P<0.05)。(3)内皮管腔形成实验显示,CD137信号激动组内皮细胞小管长度大于对照组,分支数量多于对照组(P<0.05);PPAR-γ抑制组的内皮细胞小管长度及分支数量的形成明显被抑制(P<0.05)。结论CD137信号可能通过调控巨噬细胞M1/M2极性转变促进血管新生。
简介:摘要目的构建并制备表达人CD137L蛋白的5型重组腺病毒(Ad5-CD137L),并初步研究其在小鼠中的抗肿瘤免疫效果。方法将密码子优化CD137L蛋白的表达基因插入pDC316穿梭质粒,并与pBH-GloxΔE1,3Cre腺病毒骨架质粒,共同转染HEK293细胞,构建Ad5-CD137L种子。扩增并纯化后,对所得Ad5-CD137L重组腺病毒的插入目的基因与蛋白表达情况进行鉴定。检测Ad5-CD137L在C57BL/6小鼠体内的特异性细胞免疫和抗肿瘤免疫水平。结果成功地构建了Ad5-CD137L,PCR和测序结果表明插入目的基因与构建理论值相符。免疫荧光法鉴定Ad5-CD137L能在HEK293细胞中表达目的蛋白,经Western印迹法鉴定该目的蛋白的相对分子质量约为25 000,与理论值相符。与空腺病毒相比,Ad5-CD137L能显著诱导小鼠特异性IFN-γ(t=6.315,P=0.003),抗肿瘤免疫效果更显著(t21 d=8.275,t29 d=4.492;t39 d=5.101,P均<0.001)。结论成功构建了Ad5-CD137L,该重组病毒具有特异性细胞免疫原性和抗肿瘤免疫效果。
简介:摘要目的建立自身免疫性肝炎小鼠模型,研究CD137在小鼠脾脏CD4+T细胞上的表达及其意义。方法采用易感动物C57BL/6小鼠,在第1天和第7天分别以新鲜制备的S-100肝抗原0.5ml与等体积的弗氏完全佐剂充分乳化后予腹腔注射,4周后流式细胞术检测脾脏CD4+T细胞上CD137的表达,ELISA实验检测T细胞培养上清液中IL-17的浓度。结果模型组小鼠血清中ALT、AST、球蛋白水平较对照组明显升高,白蛋白水平降低(P<0.05),血清中可见抗核抗体,肝组织学可见汇管区和肝实质界面的炎症。流式细胞术结果显示活化前后模型组小鼠CD4+T细胞上CD137的表达均明显高于正常对照组(P<0.05)。ELISA实验结果示活化前后模型组T细胞培养上清液中IL-17水平均显著高于对照组(P﹤0.05)。结论实验性自身免疫性肝炎小鼠脾脏CD4+T细胞上CD137高表达,且与促炎因子IL-17的产生可能有一定的关联。
简介:摘要目的探讨人自然杀伤(NK)细胞在CD137抗体作用下通过抗体依赖性细胞毒性作用(ADCC)介导对乳腺癌细胞的杀伤作用。方法NK细胞表型和细胞因子检测实验分组:阴性对照组(未用人CD137抗体处理的NK细胞)、CD137抗体处理组(10 μg/mL人CD137抗体处理4 h的NK细胞);NK细胞毒性检测实验分组:根据体系中是否添加NK细胞、人CD137抗体和西妥昔单抗分为8组。流式细胞术检测两组NK细胞表面CD16分子的表达情况,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测两组NK细胞培养上清液中干扰素(IFN)-γ和肿瘤坏死因子(TNF)-α的浓度,乳酸脱氢酶(LDH)法检测8组反应体系中表皮生长因子受体(EGFR)高表达乳腺癌细胞系MDA-MB-231和EGFR低表达乳腺癌细胞系MDA-MB-453的杀伤比例,并采用t检验或析因分析进行统计学分析。结果与阴性对照组比较,CD137抗体处理组CD16+NK细胞比例(79.57﹪ ±0.92﹪比90.43﹪±0.67﹪)、细胞因子IFN-γ浓度[(388.90±7.02) pg/ mL比(523.90±1.90)pg/ mL]和TNF-α浓度[(20.59±4.09)pg/mL比(47.22±2.14)pg/mL]均升高,差异有统计学意义(P < 0.05);MDA-MB-231细胞杀伤的三因素析因分析结果显示:NK细胞、人CD137抗体和西妥昔单抗3个因素分别对MDA-MB-231细胞的杀伤都有作用(F = 5227.276、201.473、1792.242,P均< 0.001),3个因素两两之间的交互作用对MDA-MB-231细胞的杀伤也都有作用(F =183.903、1517.187、33.483,P均< 0.001),3个因素的二级交互作用差异有统计学意义(F = 41.505,P < 0.001)。结论人CD137抗体可增强NK细胞分泌细胞毒性因子IFN-γ和TNF-α的能力,同时可上调NK细胞表面CD16分子的表达,从而使得NK细胞可能通过西妥昔单抗介导的ADCC作用增强对表皮生长因子受体(EGFR)高表达乳腺癌细胞的杀伤作用。
简介:摘要目的探讨急性ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者血清可溶型CD137(sCD137)和膜结合型CD137(mCD137)水平与缺血再灌注损伤(IRI)的关系。方法本研究为横断面研究。连续纳入2019年5月至2020年9月于江苏大学附属医院心内科接受急诊经皮冠状动脉介入治疗(PCI)的急性STEMI患者,依据是否发生IRI分为IRI组和非IRI组。收集并比较两组患者的临床资料,采用酶联免疫吸附法检测两组患者血清sCD137水平,采用Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞(PBMC)并提取RNA,聚合酶链式反应法检测mCD137 mRNA表达水平。分析PCI术前、术后即刻、术后24 h血清sCD137及PBMC的mCD137 mRNA变化趋势。采用Spearman相关分析术前血清sCD137、术后即刻PBMC的mCD137 mRNA水平与临床指标的相关性。采用单因素和多因素logistic回归分析影响IRI的独立相关因素并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析其预测价值。结果最终纳入112例STEMI患者,非IRI组42例,男性33例(78.6%),年龄(58.6±12.7)岁;IRI组70例,男性56例(80.0%),年龄(64.5±11.6)岁。与非IRI组相比,IRI组的患者住院天数长,年龄大,肥胖比例低,入院时收缩压、舒张压低,罪犯血管为右冠状动脉的比例高,血管紧张素转化酶抑制剂/血管紧张素Ⅱ受体阻滞剂/血管紧张素受体脑啡肽酶抑制剂的使用率低,尿素氮、肌酐高,肾小球滤过率低,甘油三酯低,D-二聚体和B型钠尿肽max高,Killip分级Ⅳ级的比例和心血管不良事件发生率高(P均<0.05)。IRI组术前、术后即刻、术后24 h的sCD137水平均高于非IRI组;两组mCD137 mRNA水平无差异。两组患者PCI术后即刻sCD137水平均较术前降低,mCD137 mRNA水平较术前升高(P<0.05)。相关性分析显示,急性STEMI患者血清sCD137水平与住院天数、年龄、B型钠尿肽、肌酐、缺血时间、C反应蛋白(CRP)、CRP/血清白蛋白(Alb)呈正相关(P<0.05),与体重指数、肾小球滤过率、Alb呈负相关(P<0.05)。PBMC的mCD137 mRNA表达水平与住院天数、年龄、B型钠尿肽、缺血时间、CRP、CRP/Alb呈正相关(P<0.05),与体重指数、肾小球滤过率、Alb呈负相关(P<0.05)。多因素logistic回归分析显示,术前sCD137(OR=1.038,95%CI 1.009~1.069)升高、天冬氨酸氨基转移酶(OR=1.029,95%CI 1.009~1.050)升高、Alb(OR=0.829,95%CI 0.703~0.829)下降是IRI发生的独立正相关因素(P均<0.05)。其中sCD137预测IRI的曲线下面积(AUC)=0.672,95%CI 0.574~0.770(P=0.002),最佳阈值为28.43×10-3 μg/L,敏感度为95.2%,特异度为48.6%。结论发生再灌注损伤的急性STEMI患者sCD137水平显著升高,是IRI发生的独立正相关因素,可能与IRI的预后相关。
简介:CD137,acostimulatoryfactorofTNFRfamily,isexpressedonactivatedTcellsandfreshlyisolatedmousedendriticcells(DCs).Todate,thereareonlylimiteddatadealingwiththeexpressionandtheeffectofCD137onhumanDCs.WereportinthisworkthatCD137cancoexpresswithCD137Lonimmatureperipheralblood-derivedhumanDCs(9.77%).ThematureDCsstimulatedbyLPSshowedamuchhigherlevelofCD137expression(36.06%).LigationofCD137onthesurfaceofDCswithanti-CD137monoclonalantibody(mAb)couldenhancethedirectanti-tumoreffectmediatedbyhumanDCsinvitro.Theagonisticanti-CD137mAbwasabletoelevatebyabout20%oftheDC-mediatedinhibitionoftumorgrowthinfivetumorcelllines.Theseresultsindicatethattheapplianceofanti-CD137mAbmightbeusedasanewstrategyfortumorimmunotherapy.Cellular&MolecularImmunology.2004;1(1):71-76.
简介:目的分析肠套叠的腹痛、呕吐、腹部包块、果酱样血便四大临床症状与体征以及X线表现。评价它们对诊断婴幼儿肠套叠的临床价值。方法对临床疑诊肠套叠的137例患儿的临床表现与X线表现进行回顾性分析。以清洁洗肠后经肛门插管向结肠注气,结肠内出现套叠头部软组织块影诊断为肠套叠阳性。经肛门注气后,气体顺利通过结肠,进入小肠,注气全过程中结肠未见套叠头部软组织块影及梗阻现象为阴性。结果①腹痛、呕吐、腹部包块触诊不满意、无果酱样血便患者34例,仅11例阳性。②临床触诊有腹部包块而无果酱样血便58例,阳性33例。③有果酱样血便45例,肠套叠阳性41。④同时有果酱样血便及腹部包块45例,阳性45例。结论腹部包块加果酱样血便是诊断婴幼儿肠套叠的特征性表现。
简介:2000年5月~2001年5月,笔者单位收治小儿烧伤137例,并对该组病例的年龄、烧伤原因、创面、愈合后瘢痕等方面进行了调查分析,现报告如下。临床资料:本组137例,男87例,女50例。年龄为0.5~13岁。烧伤面积5%~25%TBSA。烧伤深度为浅Ⅱ~Ⅲ度。烧伤原因:热水烫伤96例,火焰烧伤38例,其他3例。本组病例若以1岁为一个年龄组,发病率最高为2~3岁,共57例,占41.61%,随着年龄的增长,发病率逐渐下降。烧伤部位及创面处理:小儿烧伤好发部位为躯干、四肢、臀部。伤后1~3d内送医院行正确及时的创面处理87例,占烧伤总数的64%。另外50例,伤后未引起家长重视,自行去小诊所或自购“美宝”湿润烧伤膏(北京光明创疡研究所)外涂的轻、中度烧伤患儿,由于创面处理不正确,来院求治时,创面大多污浊呈肉芽状。烧伤创面瘢痕增生情况:本组137例患儿,手术治疗67例(48.9%),术后瘢痕增生严重者48例(35.04%),其中39例患儿创面自行涂抹“美宝”湿润烧...
简介:摘要目的探讨新生儿感染时外周血CD64及CD3、CD4、CD8的表达,为新生儿细菌感染的早期诊断和细菌感染时细胞免疫功能的评价提供循证支持。方法应用流式细胞仪定量检测120例感染和非感染新生儿外周血CD64分子及CD3、CD4、CD8的表达变化,并将败血症组患儿的CD64与C反应蛋白(CRP)、白细胞计数及血培养进行比较。结果败血症组CD64为(6.7±2.8),高于局部感染组(4.1±1.4)与非感染组(2.9±0.5),差异有统计学意义(P<0.01);局部感染组CD64高于非感染组,差异有统计学意义(P<0.01)。在诊断新生儿败血症中,CD64灵敏度为86.4%,特异度为87.9%,阳性预测值83.8%,阴性预测值92.0%,均高于CRP,CD64的检测阳性率为87%,高于血培养;败血症组的CD3为(46.3±12.3)%、CD4为(31.0±10.0)%低于局部感染组CD3(62.6±10.3)%、CD4(45.4±10.8)%和非感染组CD3(61.6±11.3)%、CD4(45.4±13.4)%,差异有统计学意义(P<0.05),局部感染组的CD3、CD4与非感染组之间比较,差异无统计学意义差异有统计学意义(P>0.05),各组间CD8差异无统计学意义(P>0.05)。结论CD64可作为新生儿细菌感染的早期诊断指标,严重细菌感染患儿存在细胞免疫功能紊乱,T淋巴细胞亚群检测对新生儿细胞免疫功能的评价有重要意义。
简介:Forthepurposeofbreedingnewandfinevarietiesofturfbamboo,5turfbamboospecies(Sasapygmaea,Indocalamusdecorus,I.latifolius,Shibataeachinensis,andS.fortune)wereradiatedthrough137Csγ-rayintissueculturesatdifferentradiationdose.Itwasshownthat:1)Fourspeciesofturfbambooweresensitivetoradiation,lowdoseradiationhadnoeffectonbudgermination,highdoseradiationdelayedbudgermination;2)Radiationat5and10Gyhadnotimpactonshootemergence,butradiation...