简介:目的:构建带Myc标签的LC3B—PLA2基因的真核表达质粒,获得LC3B—PLA2融合蛋白,并应用LC3B—PLA2研究Atg4B对LC3B的切割作用。方法:以本实验室保存的乳腺文库为模板,PCR扩增获得LCgB序列,与PLA2G]O拼接后插入pCMV—Myc载体,用构建的重组质粒转染HEK293T细胞,Western印迹检测融合蛋白的表达,用LC3B—PLA2与Atg4B共转染的方法检测Atg4B对LC3B的切割作用。结果:菌液PCR、重组质粒双酶切及测序均表明重组质粒构建成功,Western印迹结果表明融合蛋白在HEK293T细胞中获得表达,LC3B—PLA2真核表达蛋白能够应用于Atg4B对LC3B切割作用的研究。结论:构建了pCMV—Myc—LC3B—PLA2真核表达质粒,LC3B—PLA2融合蛋白在Atg4B对LC3B切割作用的研究中至关重要,为进一步研究Atg4B在自噬过程中的作用奠定了基础。
简介:为第二使用订Dini上面的方向性的衍生物的LC非强迫的优化问题介绍二个算法。方法的简洁使用并且表现;重复功能的相关性质的讨论。
简介:摘要目的探讨腹腔镜胆囊切除术(LC)中转开腹治疗的原因及预防方法。方法回顾性分析我院2010年2月-2011年12月接收的行LC中转开腹的39例患者的临床资料,并对导致LC中转开腹的因素进行统计学分析。结果本组39例患者中有25例患者为主动中转开腹手术治疗,其中胆囊萎缩、胆囊及其周围组织粘连严重以及胆囊壁增厚为主要原因,且均导致胆囊三角区解剖结构不清晰或瘢痕化;其他14例患者均为被动中转开腹手术治疗,肝胆管与胆囊管解剖变异、术中失血过多以及气腹构建失败为主要原因。结论胆囊三角区解剖变异为LC中转开腹的主要原因,术前应对适应证、手术风险等进行合理评估,同时要严格操作技术与规范,以降低并发症发生率。
简介:目的建立自动化LC/LC-UV系统建立全血中环孢霉素A测定方法。方法LC1色谱柱FRO-XBCN(20mm×4.6mm,10μm,ANAX),流动相为水-乙腈=35∶65(v/v),流速为1.0mL.min-1,中央处理体系温度为40℃,LC2系统中分析色谱柱为AC-CN(200mm×4.6mm,5μm,ANAX),流动相为乙腈-水,采用梯度系统,0~15min流动相中乙腈比例从40%直线上升到53%,流速为0.7mL.min-1。转移辅助流速为0.7mL.min-1。目标物转移窗口为2.20~3.20min;定量环为500μL,样品用乙腈预处理。结果环孢霉素A在0.026~1.010μg.mL-1与峰面积线性关系良好,平均相关系数为0.9991,萃取回收率在101.0%~103.0%,最低定量浓度为0.013μg.mL-1。日内RSD〈5%(n=6),日间RSD〈5%(n=18),准确度在100.3%~102.6%。结论用自动化LC/LC-UV系统建立的环孢霉素A测定方法人为干预步骤少、准确性与精密度良好,方法开发、运行及控制自动化程度高,适合于环孢霉素A血药浓度测定及动力学研究。
简介:探讨腹腔镜胆总管探查加腹腔镜胆囊切除术(LCBDE-LC)与内镜下逆行胰胆管造影术/十二指肠乳头括约肌切开术加腹腔镜胆囊切除术(ERCP/EST-LC)2种术式对胆囊结石合并胆总管结石的疗效、安全性和手术结果。收集2012年1月-2016年3月行微创手术治疗的患者62例。其中34例行LCBDE-LC治疗,28例行ERCP/EST-LC治疗,比较两组手术成功率、手术时间、术后胃肠功能恢复时间、住院时间、住院费用及术后早期并发症等相关指标。LCBDE-LC手术成功34例,成功率100%,术后发生胆瘘2例;ERCP/EST-LC组手术成功28例,成功率100%,术后并发急性胰腺炎4例,术后出血4例。两组术后并发急性胰腺炎、术后出血发生率差异有统计学意义(χ~2=4.291、2.125,P〈0.05)。LCBDE-LC组手术时间、住院时间、术后胃肠功能恢复时间及住院费用均少于ERCP/EST-LC组,差异有统计学意义(t=-9.836、-4.397、1.345、2.451,P〈0.05)。在同样适应证下,优先选择行LCBDE+LC术式治疗胆囊结石合并胆总管结石效果较好。