简介:摘要目的评价TANK结合激酶1(TBK1)过表达对小鼠高糖离体心肌细胞缺氧复氧损伤的影响及其与线粒体自噬的关系。方法正常培养的对数期小鼠HL-1心肌细胞,以1×106个/ml的密度接种于6孔板,采用随机数字表法分为4组(n=10):对照组(C组)、高糖组(HG组)、高糖缺氧复氧组(HG+H/R组)和TBK1过表达组(TBK1组)。细胞密度达到50%时使用含1%胎牛血清+1%双抗培养基孵育细胞24 h,细胞密度达到80%时,以pcDNA3.1(+)为载体进行TBK1过表达。采用高糖培养基(33 mmol/L)培养24 h,37 ℃培养箱缺氧(94%N2+5%CO2+1%O2)24 h,37 ℃含5%CO2培养箱复氧12 h,制备高糖心肌细胞缺氧复氧损伤模型。细胞复氧后采用CCK-8法检测细胞活力,采用LDH试剂盒检测上清液LDH活性,采用Mito-Tracter绿色荧光探针检测线粒体含量,采用Western blot法检测TBK1及线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin、LC3B和P62的表达。结果与C组比较,HG组和HG+H/R组小鼠心肌细胞活力降低,上清液LDH活性增加,线粒体含量减少,TBK1、PINK1、Parkin和LC3B表达下调,P62表达上调(P<0.05);与HG组比较,HG+H/R组小鼠心肌细胞活力降低,上清液LDH活性增加,线粒体含量减少,TBK1、PINK1、Parkin和LC3B表达下调,P62表达上调(P<0.05);与HG+H/R组比较,TBK1组小鼠心肌细胞活力升高,上清液LDH活性减少,线粒体含量增加,TBK1、PINK1、Parkin和LC3B表达上调,P62表达下调(P<0.05)。结论TBK1过表达减轻小鼠高糖离体心肌细胞缺氧复氧损伤的机制与其恢复线粒体自噬有关。
简介:摘要最新研究表明,cGAS/STING信号通路必须通过诱导产生I型干扰素来激活基因敲除小鼠模型的固有免疫和适应性免疫,进而发挥抗肿瘤免疫。cGAS/STING信号通路在各种人类癌症中都检测到有所表达,但这种信号通路在人类癌症免疫中的作用至今尚未清楚。我们的研究发现,cGAS/STING信号通路中的四个关键分子(cGAS,STING,TBK1和IRF3)在卵巢癌组织中表达相比于正常组织较低。研究还发现,cGAS/STING信号通路的表达水平与卵巢癌组织微环境的免疫细胞浸润之间有相关性。然而,cGAS/STING信号通路的表达水平不能预测卵巢癌患者的预后。这项研究表明,在施用激动剂激活STING抗肿瘤免疫疗法之前必须充分评估cGAS/STING信号通路,并明确其在肿瘤发生和肿瘤免疫中的功能。
简介:你知道不莱梅吗?噢——它是一个美丽快乐的地方。不莱梅在哪儿呢?噢——有梦想的地方就有不莱梅。没错儿,不莱梅这个地方,早就存在于“很久很久以前”的童话里了……