简介:摘要:WNT1诱导信号通路蛋白1 (Wnt1 inducible signaling pathway protein 1,WISP1) 是一种富含半胱氨酸的蛋白质,属于CCN 蛋白家族。越来越多的研究表明WISP1在各种人类恶性肿瘤中发挥不同的生物学功能。新的研究证据显示WISP1蛋白与胃癌细胞增殖、凋亡、侵袭和转移密切相关。在这篇综述中,我们描述了WISP1蛋白在胃癌中的生理功能以及其如何参与胃癌发生进展过程。此外,我们讨论了WISP1有望成为胃癌的诊断标志物和/或治疗新靶点。
简介:摘要目的探讨不同浓度人重组WNT1诱导信号通路蛋白2(WISP2)对人肝癌细胞(HepG2)脂质代谢的影响及相关作用机制。方法分别用不同浓度(0、0.4、1和2 μg/L)人重组WISP2作用于HepG2细胞48 h,Cell-Titer发光法测定细胞活力,酶法检测各组HepG2细胞内三酰甘油(TG)及总胆固醇(TC)含量,同时应用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)及免疫印迹法(western blot)检测HepG2细胞内脂质合成、分解、转运相关基因mRNA和蛋白表达水平。结果与对照组比较,各浓度人重组WISP2处理组均未降低HepG2细胞的活性;人重组WISP2处理上调HepG2细胞TG、TC含量,0.4、1、2 μg/L人重组WISP2处理组TG的含量分别为未处理组的1.254±0.039、1.216±0.028、1.174±0.014倍(F=6.791,P=0.006),TC含量分别为未处理组的1.264±0.057、1.394±0.101、1.392±0.077倍(F=7.045,P=0.005)。进一步研究发现,与对照组比较,加入人重组WISP2明显增加HepG2细胞脂质合成蛋白甾醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)、羟甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGCR)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)及二酰基甘油酰基转移酶(DGAT2)mRNA表达(均P<0.05),显著上调SREBP1、ACC及脂肪酸合成酶(FAS)蛋白水平的表达(均P<0.05);但对低密度脂蛋白受体(LDLR)、载脂蛋白B(ApoB)、载脂蛋白E(ApoE)这类脂质转运蛋白及关键的脂质分解蛋白——脂肪三酰甘油脂肪酶(ATGL)的表达无明显影响。结论rh-WISP2能显著增加肝细胞脂质含量,促进脂质合成增加可能是其作用的关键机制。
简介:摘要目的探究人体中与结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,Mtb)Rv1705c蛋白相互作用的蛋白质。方法原核表达Rv1705c蛋白基因,收集包涵体,裂解后透析纯化Rv1705c并测定其浓度,ELISA法检测细菌Rv1705c刺激巨噬细胞后细胞因子IFN-γ的分泌量,使用纯化并带有生物素标记的Rv1705c孵育人蛋白质组芯片HuProt™,筛选与Rv1705c相互作用的人类蛋白质,使用GenePix Pro 6.0软件对蛋白质芯片的信号图像进行数据提取,使用GO、KEGG等多个数据库进行生物信息学分析,GST pulldown验证Rv1705c与PSMA3、RSAD2的相互作用。结果纯化结果显示,Rv1705c在包涵体中表达,Rv1705c刺激巨噬细胞后IFN-γ分泌量显著上升。芯片结果显示共筛选出了29个与Rv1705c相互作用的潜在阳性蛋白质,其中PSMA3、NLN、THOP1、UPF3A、RSAD2、OMG、PNKD、STEAP3、MED8共9个蛋白质的信噪比(signal-to-noise ratio,SNR)>1.6。进一步的生物信息学分析发现候选蛋白PSMA3、RSAD2、C1QBP参与固有免疫应答激活信号转导,并且PSMA3、RSAD2与干扰素存在交互作用,GST pulldown验证PSMA3、RSAD2与Rv1705c确有相互作用。结论发现并验证PSMA3、RSAD2与Rv1705c存在相互作用,为Mtb感染机制的研究提供参考。
简介:摘要: 目的 研究大豆分离蛋白及混合蛋白质粉对正常小鼠免疫功能的调节作用。方法 昆明种小鼠240只,随机分为4组,每组60只,即空白对照组、大豆分离蛋白低、高剂量组(0.24、0.48g/kg)、混合蛋白质粉低、高剂量组(0.05、0.15g/kg)连续灌胃30d,测定小鼠脾淋巴细胞增殖反应能力和自然杀伤(NK)细胞活性;观察二硝基氟苯(DNFB)诱导迟发型变态反应(DTH);通过血清溶血素和抗体生成细胞(PFC)检测体液免疫功能;利用单核巨噬细胞的吞噬功能检测小鼠非特异性免疫功能。结论 大豆分离蛋白及混合蛋白质粉对正常小鼠免疫功能均有一定调节作用,可增强小鼠免疫能力。
简介:摘要:本研究比较了市售黄豆和黑豆中水溶、盐溶、醇溶、碱溶性蛋白质的含量、分子量组成、游离氨基酸组成以及其它营养成分含量的差异,以期为黑豆的日常食用以及综合加工利用提供参考。研究发现,黑豆的蛋白质、灰分和α-氨基氮含量均高于黄豆。黄豆中蛋白质含量为39.95%,黑豆中蛋白质含量达到42.36%。从蛋白质组成上看,黄豆以水溶性蛋白质为主,占总蛋白的88.21%;黑豆以水溶和碱溶性蛋白质为主,分别占总蛋白的55.43%和38.69%。黄豆中水溶性蛋白质含量较黑豆中高主要表现在分子量为83.44kDa,74.58kDa和35.74kDa的较大分子量的水溶性蛋白质含量较高。黑豆中碱溶性蛋白质高于黄豆,主要表现为分子量为20.71kDa和36.29kDa的较小分子量的碱溶性蛋白质含量较高。研究还发现苏氨酸、天冬氨酸是黄豆和黑豆中的主要游离氨基酸,且黑豆中的谷氨酸、苏氨酸含量明显比黄豆中高,分别高出116.021mg/L,197.996mg/L。
简介:[摘要]目的 探讨某品牌蛋白质粉对小鼠的免疫调节作用。方法 依据《保健食品检验与评价技术规范》(2003版)增强免疫力功能检验方法,将某品牌蛋白质粉按0.25、0.5、1.5g/(kg·BW)3个剂量灌胃给予实验小鼠,同时设阴性对照组,每天灌胃1次,连续灌胃30d后,进行各项免疫指标的测定。结果 小鼠足跖肿胀度增加明显,在中、高剂量组与阴性对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。血清溶血素水平检测中,受试物中、高剂量组的溶血素水平高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。小鼠的单核-巨噬细胞碳廓清指数,受试物各剂量组与阴性对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。ConA诱导的淋巴细胞转化能力、抗体生成细胞数、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率及吞噬指数、NK细胞活性试验中,各剂量组与阴性对照组比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论 某品牌蛋白质粉具有增强免疫力的功能。
简介:摘要:本研究比较了市售黄豆和黑豆中水溶、盐溶、醇溶、碱溶性蛋白质的含量、分子量组成、游离氨基酸组成以及其它营养成分含量的差异,以期为黑豆的日常食用以及综合加工利用提供参考。研究发现,黑豆的蛋白质、灰分和α-氨基氮含量均高于黄豆。黄豆中蛋白质含量为39.95%,黑豆中蛋白质含量达到42.36%。从蛋白质组成上看,黄豆以水溶性蛋白质为主,占总蛋白的88.21%;黑豆以水溶和碱溶性蛋白质为主,分别占总蛋白的55.43%和38.69%。黄豆中水溶性蛋白质含量较黑豆中高主要表现在分子量为83.44kDa,74.58kDa和35.74kDa的较大分子量的水溶性蛋白质含量较高。黑豆中碱溶性蛋白质高于黄豆,主要表现为分子量为20.71kDa和36.29kDa的较小分子量的碱溶性蛋白质含量较高。研究还发现苏氨酸、天冬氨酸是黄豆和黑豆中的主要游离氨基酸,且黑豆中的谷氨酸、苏氨酸含量明显比黄豆中高,分别高出116.021mg/L,197.996mg/L。
简介:【摘要】目的:比较硒粉-硫酸钾、硫酸铜-硫酸钾混合催化剂在血液制品蛋白质含量测定中的消化时间及测定结果差异情况。方法:采用凯氏定氮法对人血白蛋白、静注人免疫球蛋白(pH4)、人免疫球蛋白测定蛋白质含量,各品种分别使用硒粉-硫酸钾、硫酸铜-硫酸钾两种混合催化剂进行消化。结果:硒粉-硫酸钾催化剂消化时间约50分钟;硫酸铜-硫酸钾催化剂消化时间约90分钟;两种催化剂测定血液制品的蛋白质含量结果无显著性差异。结论:凯氏定氮法测定血液制品蛋白质含量时,硒粉-硫酸钾催化剂的消化时间相对于硫酸铜-硫酸钾催化剂大大缩短,且对测定结果无显著性影响。
简介:摘要:目的 考察不同厂家辛酸钠对人血白蛋白产品质量的影响。方法 对两种不同厂家的辛酸钠生产的人血白蛋白分别在25±2℃和5±3℃保存0个月、1个月、2个月、3个月、6个月取样检测,进行质量可比性研究,研究的质量指标主要包括外观、可见异物检查、渗透压摩尔浓度、pH值、蛋白质含量、纯度、钠离子含量、钾离子含量、吸光度、多聚体、辛酸钠含量、铝残留量、激肽释放酶原激活剂(PKA)、无菌检查、热原检查等。结果 两种厂家辛酸钠生产的人血白蛋白各项指标均合格,A、B厂家辛酸钠生产人血白蛋白产品在25±2℃和5±3℃放置6个月后各项指标均符合要求,质量指标无显著性差异。结论 A、B厂家的辛酸钠均可应用于人血白蛋白生产。
简介:摘要目的探讨壳多糖酶3样蛋白质1(chitinase-3-like protein 1,CHI3L1)对软骨细胞生物学功能的影响在关节突关节退行性病变中的作用。方法收集人关节突关节软骨组织标本,检测CHI3L1基因的mRNA相对表达量,分析关节突关节退变等级与患者性别、年龄、CHI3L1基因mRNA相对表达量的相关性。体外培养人软骨细胞,检测CHI3L1组与对照组软骨细胞增殖、周期、凋亡和相关炎症因子表达的差异,以信号传导通路蛋白芯片分析CHI3L1调节软骨细胞退变的作用机制。结果关节突关节退变等级与CHI3L1基因mRNA相对表达量呈正相关(r=0.76,P<0.001),与性别不相关(r=-0.12,P=0.500),与年龄呈正相关(r=0.47,P=0.005)。退变组CHI3L1基因mRNA表达量升高,且随退变等级加重表达量升高(F=18.90,P<0.001)。与对照组比较,CHI3L1组软骨细胞在培养48 h(OD490/fold=7.132)、72 h(OD490/fold=4.803)、96 h(OD490/fold=2.431)和120 h(OD490/fold=0.009)的增殖倍数显著降低。CHI3L1组软骨细胞处于G1期、S期和G2/M期的比例分别为85.03%±3.05%、12.78%±2.29%和0.90%±0.76%,对照组分别为73.93%±2.73%、22.81%±1.93%和0.99%±0.87%;两组软骨细胞G1期比例(t=4.70,P<0.001)和S期比例(t=5.80,P<0.001)的差异均有统计学意义;两组软骨细胞凋亡百分比分别为8.64%±0.76%和5.68%±1.13%,差异有统计学意义(t=4.47,P<0.001);CHI3L1组软骨细胞IL-6的表达量为(49.60±0.01) pg/ml,大于对照组的(47.88±0.01) pg/ml(t=132.72,P<0.001),TNF-α的表达量为(95.93±0.02) pg/ml,大于对照组的(90.69±0.02) pg/ml(t=376.10,P<0.001)。蛋白芯片检测到表达量显著差异的蛋白共53个,蛋白磷酸化水平显著差异的蛋白43个。通过生物信息学分析筛选出差异蛋白可能参与的信号通路共16个。MAPK信号通路中,CHI3L1组软骨细胞MAPK1和RAF1蛋白的表达量(分别为1.094±0.00、0.988±0.00)较对照组(分别为0.814±0.00、0.786±0.00)升高(t=103.16,P<0.001;t=54.32,P<0.001)。结论CHI3L1的表达与关节突关节退行性病变相关:CHI3L1可抑制关节软骨细胞增殖,抑制软骨细胞周期由G1期进入S期,促进软骨细胞凋亡,促进软骨细胞表达IL-6和TNF-α;可通过调节MAPK信号通路调节软骨细胞的生物学功能,是关节突关节退行性病变临床诊疗的潜在生物标志物。
简介:摘要:本实验以广西港青油脂有限公司的成品豆粕为原料,用烘箱在50℃,80℃,105℃,130℃温度下处理不同时间,和原样品共得到35种不同加热程度的豆粕,进行氢氧化钾蛋白质溶解度的研究,用以指导大豆生产工艺和后期豆粕储藏。结果表明,各指标均随加热时间的延长和加热温度的升高而逐渐下降。