简介：

简介：目的观察烫伤大鼠伤后不同时间切痂其骨骼肌解偶联蛋白(UCP)2、UCP3mRNA表达水平的异同.方法选用120只雄性Wistar大鼠,其中8只作为正常对照组;余下112只造成30%TBSAⅢ度烫伤后分成4组:A组不切痂,分别于伤后8、24、96、120、168h处死;B组伤后8h切痂,于伤后24、96、120、168h处死;C组伤后24h切痂,伤后96、120、168h处死;D组伤后96h切痂,伤后120、168h处死.测定各组大鼠各时相点的血清瘦素、肿瘤坏死因子(TNF)α含量以及腓肠肌UCP2、UCP3mRNA表达水平.结果(1)血清瘦素水平:A组大鼠伤后24～168h均低于正常对照组(P<0.01),B、C、D组伤后120h和(或)168h均高于A组(P<0.01).(2)血清TNF-α水平:A组伤后各时相点均高于正常对照组(P<0.01),B组伤后各时相点均低于A组(P<0.05或0.01).C组伤后168h低于A组(P<0.05).(3)腓肠肌UCP2mRNA的表达量:A组大鼠在烫伤后8h即已明显升高(P<0.01),24h到达高峰,以后逐渐下降.B、C组伤后168h时分别为0.32±0.20、0.35±0.15,明显低于同时相点A组0.71±0.12(P<0.05).各组腓肠肌UCP3mRNA表达的变化趋势与UCP2类似.结论大鼠严重烫伤后UCP2、UCP3mRNA表达上调可能是代谢率升高的重要因素之一,休克期切痂可降低这一表达,降低代谢率.

简介：目的：研究板层蛋白在肾小球疾病时质或量的改变，探讨它们在肾脏中的生理功能和病理学意义。方法：本研究以板蛋白α１，α２，β１，β２，γ结构链为观察对象，用免疫组织化学和原位杂交技术研究他们在４８例肾小球疾病病理肾人组织的表达和分布是否发生质或量的改变。结果：ＬＮα１，α２，β１和γ的ｍＲＮＡ在伴系膜增生的肾小球内表达有不同程度的增加，增生的系膜细胞是主要的细胞来源，在肾小球系膜增殖节段和硬化病灶附近伴有ＬＮα１和γ１的蛋白增多和α２，β１蛋白的异常表达，而ＬＮβ２链在相应节段的系膜区和ＧＢＭ表达出现不同程度的下降。结论：在系膜增生的肾小球疾病中，增生的系膜细胞是肾小内板层蛋白量的积聚和异常合成的重要细胞来源，在肾小球疾病中，板层蛋白的合成出现量和质的变化，这可能是肾小球疾病进展和恶化的物质基础。

简介：目的初步探讨瘦素(Leptin)对成骨细胞骨保护蛋白(OPG)mRNA表达的影响.方法用SYBRGreenⅠ染料实时监测定量RT-PCR的方法测定骨保护蛋白(OPG)mRNA表达.结果瘦素(Leptin)使成骨细胞骨保护蛋白OPGmRNA表达呈剂量和时间依赖性降低.结论瘦素(Leptin)作为一种内分泌因子,可直接与成骨细胞上leptin受体特异结合,通过受体后信号转导下调节成骨细胞OPGmRNA表达,使OPGmRNA表达降低,和其它因子共同参与骨再建调节.

简介：

简介：目的新生鼠缺氧缺血性脑损伤海马caspase-3mRNA的表达。方法7日龄SD大鼠60只，分为假手术对照组和缺氧缺血模型组。运用RT-PCR方法观察损伤后Oh、6h、12h、24h和48hβ-actin以及caspase-3mRNA在两组海马区域的表达。计算、比较两组caspase-3mRNA相对含量。结果对照组caspase-3mRNA呈相对稳定的低表达状态，各时间点之间无显著性差异(F=0．0104，P>0．05)。模型组在缺氧缺血损伤后不同时间点caspase-3mRNA表达出现显著性差异(F=10．8379，P<0．01)；与对照组相比在缺氧后6hcaspase-3mRNA表达显著增高(t=2．59，P<0．05)，12h后有极显著差异(t=3．963，P<0．01)，24h这到高峰(t=6．835，P<0．001)，48h有所下降，但仍处于较高水平(t=6586，P<0．001)。结论caspase-3mRNA在新生鼠海马区域呈低水平表达，缺氧缺血损伤后表达显著增多，且随时间变化，提示caspase-3mRNA参与新生鼠缺氧缺血性脑损伤的发生与发展过程。抑制caspase-3mRNA的转录可能会减轻缺氧缺血对新生鼠的脑损伤。

简介：血吸虫病是一种遍及世界70多个国家、累及2亿多人口的地方性流行病,在我国约76万人受累.病原体为具有复杂生活史的血吸虫,其常见有6种,主要流行的是日本血吸虫(Sj)、曼氏血吸虫(Sm)及埃及血虫(Sh),具有两个宿主,即人和淡水螺类.

简介：摘要目的探讨PSA值增高患者前列腺按摩后尿液沉渣中DD3mRNA检测在前列腺癌诊断中的应用价值。方法在前列腺穿刺活检前或术前麻醉后收集患者前列腺按摩后患者的尿液，离心取细胞沉淀物，用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法和荧光实时定量逆转录-聚合酶链反应(RealtimeRT-PCR)方法检测DD3mRNA和PSAmRNA含量，以PSAmRNA作为管家基因校正沉渣中的前列腺细胞，以DD3mRNA/PSAmRNA比值表示DD3mRNA含量。SPSS13.0分析相关数据，以穿刺活检或术后病理检查结果为金标准，同时探讨了前列腺按摩后尿液中DD3Mrna含量与前列腺癌病理分级之间的关系。结果PSA值增高患者中前列腺癌患者前列腺液DD3mRNA表达量明显高于BPH，差异具有统计学意义。不同病理分级之间DD3mRNA的含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论PSA值增高的患者行前列腺按摩后尿液沉渣中DD3mRNA含量检测，较前列腺活检的损伤更小，作为前列腺癌的一种非损伤性诊断方法具有良好的应用前景。

简介：血栓形成在动脉粥样硬化、急性心肌梗死及PTCA术后再狭窄等病理过程中起着重要作用.通过对血小板栓塞形成的机制研究表明:血浆中血管假性血友病因子(vWF)与血小板GPIb的相互作用在止血过程和血栓形成的早期阶段起着关键作用.vWF主要来源内皮和巨核细胞,作为分子桥介导血小板和内皮下胶原的粘附反应,与GIb结合位点位于vWF分子509～695残基之间A1重复区的二硫环上.

简介：为了研究通过功能筛选得到的一个新的红细胞分化相关的全长cDNA(命名为EDRFI)的功能,选择K562细胞作为模型细胞来观察反义EDRFI表达对细胞功能的影响.通过快速构建,同时得到了正向和反向插入片段的真核表达载体pcDNA3-EDRFI-S(sense)及peDNA3-AS(antisense),并通过改进的LipofectAMINE细胞转染和G418筛选,得到了稳定表达的细胞株,进行基因组PCR鉴定,证明了转染的高效性.NorrhemB10t试验的结果表明,反义载体转染的K562细胞中,EDRF1在mRNA表达水平上受到下调,提示EDRF1反义DNA的表达可能抑制了EDRF1mRNA的正常转录.进一步,γ-珠蛋白和PKC-α的表达在反义构建质粒转染K562细胞中的表达均受到下调,这可能传递了红细胞分化的负反馈信号,从而抑制了珠蛋白的合成.

简介：

简介：本研究探讨移植物FOXP3mRNA表达与HLA相合同胞供者异基因造血干细胞移植后急性移植物抗宿主病（aGVHD）的关系。对26例HLA相合同胞供者异基因造血干细胞移植患者移植物CD4^＋CD25^＋和CD4^＋CD25^＋ghT细胞、FOXP3mRNA表达与aGVHD的关系进行了评价。用流式细胞术检测了脐血、正常人外周血、移植物的CD4^＋CD25^＋和CD4^＋CD25^highT细胞比例；以β2-MG为内参照，实时定量RT-PCR检测了FOXP3mRNA相对表达量，采用融解曲线和琼脂糖电泳鉴定PCR产物特异性。结果表明：正常人外周血、动员的外周血干细胞（PBSC）和BM移植物CD4^＋CD25^＋T细胞为连续的细胞群，CD4^＋CD25^＋T和CD4^＋CD25^highT细胞比例分别为（48．5±16．3）％和（9．6±2．5）％，（42．1±14．7）％和（13．1±4．2）％，（43．4±9．6）％和（14．6±4．5）％。aGVHD组移植物CD4^＋CD25^highT细胞比例和绝对值与无aGVHD组相比无显著差异（P〉0．05）。不同稀释倍数的FOXP3和β2-MG实时定量PCR相对扩增效率曲线斜率为0．0826；融解曲线分析表明均仅有单一峰，Tm值分别为86．5℃和82．3℃；琼脂糖电泳显示都仅有单一扩增产物。PBSC移植中无aGVHD组FOXP3mRNA相对表达量（中位数41．0×10^-5）是有aGVHD组（中位数12．9×10^-5）的318％，二者有显著性差异（P=0.03）。COX回归法分析排除aGVHD其他相关因素的影响。结论：CD25不是CD4^＋调控性T细胞可靠的细胞标志；应用SYBRGreenI实时定量RT-PCR方法可特异定量FOXP3mRNA；aGVHD组移植物FOXP3mRNA显著低于aGVHD未发生组。FOXP3是调控性T细胞可靠标志，可能是预测aGVHD的有用指标之一。

简介：目的观察缺血和再灌注不同时间大鼠海马不同区域神经营养因子-3(NT-3)mRNA表达的变化及其与神经元凋亡的关系.方法用Smi山法制备前脑缺血和再灌注大鼠模型;随机引物法标记NT-3cDNA探针;原位杂交检测NT-3mRNA表达情况;原位末端标记法检测凋亡神经元.结果前脑短暂缺血后,海马CAl、CA2、CA3区和齿状回NT-3mRNA表达均一过性下降,并随再灌注进一步加重,尤以CAl区下降幅度明显,且持续时间长,此后各区逐渐恢复正常水平;CA4区NT-3mRNA表达无显著性变化;各脑区、各时段NT-3mRNA表达水平与神经元凋亡呈显著负相关.结论前脑缺血和再灌注后,NT-3表达的减少可能是神经元凋亡的重要原因之一.

简介：心脏型肌球蛋白结合蛋白C(cMYBPC)不仅参与正常肌小节和肌丝的组装,稳定肌小节的结构,而且通过磷酸化等调节横桥循环参与肌肉的收缩和舒张包括.编码肌小节结构蛋白的基因突变是家族性肥厚型心肌病的主要致病原因,其中编码cMYBPC的基因是肥厚型心肌病的最为常见的致病基因之一,本文就cMYBPC以及编码基因的结构、功能以及致病基因型、表型和可能的致病机制进行了较全面的阐述.

简介：脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)为G-杆菌的外膜组成部分,它作为一种免疫分子可刺激机体的天然免疫反应,然而机体内高水平LPS会导致体内过度分泌、释放炎症介质,从而引发败血症休克、多器官功能衰竭(MOF)等.与LPS相互作用并参与天然免疫反应的一系列细胞因子如脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharide-bindingprotein,LBP)、杀菌/通透性增加蛋白(bactericidal/permeability-increasingprotein,BPI)、CD14、阳离子抗菌蛋白(cationicantimicrobialpeptides,CAP)18等已得到较深入研究.本文就近年来LBP、CD14基因表达调控及其在细胞激活、信号传递中的调节作用和杀菌肽的研究进展作如下介绍.

简介：Objective:Toobservetheinfluenceofintra-articularinjectionofsodiumhyaluronate(HA)onthemRNAexpressionsofmatrixmetalloproteinase-1,-3(MMP-1,-3)andtissueinhibitorofmetalloproteinase-1(TIMP-1)incartilageandsynoviumoftraumaticosteoarthritis(OA).Methods:Sixteenwhiterabbitsunderwentunilateralanteriorcruciateligamenttransection(ACLT)weredividedinto2groupsrandomly5weeksaftertransection.Theexperimentalgrouprabbitsreceived0.3mlof1%HAbyintra-articularinjectiononceaweek.Animalsinthecontrolgroupweretreatedunderthesameconditionsusingphysiologicalsaline.Tenweeksfollowingsurgery,cartilageandsynoviumwereharvested.ThemRNAexpressionsofMMP-1,MMP-3andTIMP-1wereanalyzedusingreversetranscription-polymerasechainreaction(RT-PCR).Results:Insynovium,themRNAexpressionofMMP-3wassuppressedintheHAinjectiongroup.HAtreatmenthadnoeffectontheMMP-3expressionincartilage.NosignificantdifferenceofMMP-1andTIMP-1expressionsincartilageandsynoviumwasfoundbetweentheHAinjectiongroupandthecontrolgroup.Conclusions:OneofthemechanismsofthetherapeuticeffectofHAmaybetheinhibitionofexpressionofMMP-3insynoviumduringearlystageoftraumaticOA.

简介：Thepurposeofthestudyistoestablishafluorescencequantitativereversetranscriptionpoly-merasechainresponse(FQ-RT-PCR)methodforthequantitativedeterminationofIL-2mRNAandIL-4mRNAinThcells,withwhichtheThcellsstatusofthepatientswithgynaecologicaltumorsandchronicrenalfailure(CRF)canbeanalyzed.IL-2cDNAandIL-4cDNAwereprepared,andtheplasmidpMD18carryingIL-2cDNAorIL-4cDNAfragmentwasconstructedandclonedasthetemplateforquantitativedetermination.Theprimersandprobeslabelledwith6-carboxy-fluorescein(FAM)and6-carboxy-tetrarnethylrhodamine(TAMRA)wereprepared,andtheexperimentalconditionswereoptimizedtosetuptheFQ-RT-PCRmethodforquantitativedeterminationofIL-2mRNAandEL-4mRNA.Thcellsenrichedfromperipheralbloodmononuclearcells(PBMCs)of20healthyvolunteers(HVs),16gynaecologicalbenign(GB)cases,18gynaecologicalmalignant(GM)tumorcasesand16chronicrenalfailure(CRF)patientsweretestedforIL-2mRNAandIL-4mRNAbyFQ-RT-PCR.Thehouse-keepinggeneβ-actinwasusedastheinternalcontrolgeneoftheexperiment.Thestandardcurveforlogconcentrationofseriesofquantitativetemplatesvsthresholdcycle(CT)wasestablishedbylinearregression,andthelinearrangewas102-107copies/μl.TheimprecisiontestshowedtheCVofinter-assayandintra-assayofahighcontentsamplebyFQ-RT-PCRwere7.8%and12.5%,respectively.TheCVofinter-assayandintra-assayofalowcontentsamplewere10.8%and19.5%,respectively.TheIL-2mRNAexpressionsinThofthepatientswithgynaecologicalmalignanttumor(comparedwiththeHVsandthepatientswithgynaecologicalbenigndisease)andinThoftheCRFpatients(comparedwiththeHVs)weredeclinedsignificantlyandatthesametimetheIL-4mRNAexpressionincreasedsignificantly(P<0.001).Asimple,sensitiveandaccurateFQ-RT-PCRmethodforthequantitativedetectionofIL-2mRNAandIL-4mRNAhasbeenestablished.TheIL-2mRNAandIL-4m

简介：Clusterinisa75-80kDaheterodimericglycoprotein,thatisproducedinmosttissuesbutwhichexactbiologicalroleisstillnotclear.Particularly,itsroleinprotectionorpromotionofapoptosisisheavilydisputed,sincedatasupportingbothviewshavebeenreportedinseveralindependentstudies.Toclarifythisissue,andalsotodeterminewhetherclusterinexpressionitselfmightbeaffectedbyapoptosis,inthepresentstudy,ratthymocytesweretreatedwithdexamethasone,-asyntheticglucocorticoidthatelicitsapoptosisinthymocytes-,andclusterinmRNAexpressionwasanalyzedbysemi-quantitativeRT-PCRbeforeandafterinductionofapoptosis.Interestingly,neitherthetreatmentwithdexamethasoneinvitronortriggeringofapoptosisinvivoup-regulatedclusterinexpression,opposingtheviewthatclusterinisinvolvedinapoptoticprocesses.Ontheotherhand,anewclusterinmRNAisoformwasdetectedandisolated,whoseexpressionwasrestrictedtofreshlyisolatedthymocytes.Thisnovelisoformlacksthepost-translationalproteolyticcleavagesiteandisthereforepredictedtoencodeamonomericprotein.Thebiologicalfunctionundernormalcircumstances,however,willneedfurtherinvestigationsforclarification.Whileapoptosiscouldnotmodulateclusterinexpression,activationofthymocyteswithconcanavalinAandinterleukin-2resultedinup-regulationofclusterinmRNAlevel,indicatingthatclusterinexpressionisratherunderthecontrolofcellactivation-mediatedratherthanapoptosis-inducedsignals.

简介：肠CYP3A4介导的生物转化和P糖蛋白介导的药物主动泵出肠细胞是决定口服药物生物利用度的主要因素.有证据显示CYP3A4和P糖蛋白在小肠不是共同调节的,但两者在药物肠道处置中的协同作用已得到体外试验和动物体内试验的证实.进一步了解两者的相互作用有助于改善CYP3A4/P糖蛋白底物的生物利用度.

简介：Chordin基因主要与BMP2、BMP4结合,脊椎动物形态发生是BMPs及其对抗物chordin基因,BMPs、BMP感受器、细胞外基质、BMP对抗物－BMP结合蛋白、BMP活性增效剂之间复杂的相互作用