简介:目的构建具有高效转染率且含有标记基因的携带白介素4受体拮抗剂(IL-4RA)基因的重组逆转录病毒载体pLNC-IL-4RA。方法将IL4RA基因插入pLNC—Laz逆转录病毒载体获得重组的逆转录病毒表达载体pLNC—IL-4RA,重组的逆转录病毒表达载体pLNC—IL4RA通过质脂体转染PA317细胞进行包装,PA317抗性克隆经过G418的抗性筛选产生并扩增,将含有病毒的PA317细胞培养液上清收集后转染NIH3T3细胞进行病毒滴度的测定。结果扩增后的G418抗性克隆经过检测和滴度测定结果显示含有目的基因的逆转录病毒最高的病毒滴度为1×10^4CFU/mL。选择含有最高病毒滴度的PA317细胞抗性克隆进行基因组的提取和鉴定,结果显示目的基因IL-4RA成功地整合到了宿主的基因组中。结论含有目的基因IL-4RA的逆转录病毒载体经过PA317细胞包装后获得了较高的病毒滴度,为下一步哮喘模型的基因治疗打下了基础。
简介:摘要目的探讨IL-1β在人胎盘间充质干细胞(human placenta-derived mesenchymal stem cells,hPMSCs)调节类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者活化外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)向CD8+IL-10+T细胞亚群分化中的作用。方法应用CBA试剂盒检测RA患者血清IL-1β水平;酶消化法分离健康人hPMSCs;Ficoll密度梯度离心法分离RA患者和健康人PBMCs,分别应用PHA和CD3/CD28单克隆抗体(monoclonal antibody, McAb)活化PBMCs,并与hPMSCs进行共培养。流式细胞术(flow cytometry,FCM)分别分析在程序性死亡配体1(programmed death ligand,PD-L1)和/或PD-L2 McAb阻断及IL-1β刺激条件下hPMSCs对活化PBMCs向CD8+IL-10+T细胞亚群分化的诱导能力;应用RT-PCR和FCM分析IL-1β刺激条件下,hPMSCs中PD-L1和PD-L2的表达水平。结果RA患者血清IL-1β水平明显升高。在PHA和CD3/CD28 McAb活化条件下,RA患者PBMCs中CD8+IL-10+T细胞亚群比例明显低于健康对照组,且hPMSCs共培养组CD8+IL-10+T细胞亚群比例明显升高;IL-1β处理后,hPMSCs对活化PBMCs向CD8+IL-10+T细胞亚群分化的诱导能力比未处理组明显增强。IL-1β能够上调hPMSCs对PD-L1和PD-L2的表达;阻断PD-L1和/或PD-L2的表达后,hPMSCs对CD8+IL-10+T细胞亚群的诱导分化能力明显减弱。结论IL-1β通过上调hPMSCs对PD-L1和PD-L2的表达,增强hPMSCs对RA患者CD8+IL-10+T细胞亚群分化的诱导能力。
简介:摘要目的探讨IL-4,IL-12在宫颈病变发生发展中的作用以及对机体免疫功能的影响。方法应用RT-PCR技术检测IL-4mRNA,IL-12p35以及IL-12p40mRNA在正常宫颈组、CINⅠ、CINII-III和宫颈癌组中的表达。结果在宫颈癌组中IL-4表达高于CIN和正常宫颈组,CINII-III组高于CINⅠ和正常宫颈组(P<0.05),IL-12p35和IL-12p40mRNA表达均低于CIN和正常宫颈组,CIN各组均低于正常宫颈组(P<0.05)。结论体内IL-4,IL-12水平与肿瘤的发生密切相关,体内IL-12降低和(或)IL-4升高可促进宫颈癌的发生发展。
简介:摘要:间质性肺病(interstitial lung disease,ILD)通常是类风湿性关节炎(RA)的并发症,是一种预后不良的关节外表现,严重影响患者生存率,尽管已经在特发性肺纤维化中进行了许多关于
简介:目的:检测夏枯草对中、重度痤疮患者唾液中白细胞介素1α(interleukin-1α,IL-1α)、白细胞介素4(inter-leukin-4,IL-4)、白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)和肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)表达的影响。方法对100例中、重度痤疮患者口服夏枯草水煎液治疗,其中Ⅱ级38例,Ⅲ级27例,Ⅳ级35例,每人每日15g,连续1周。采集非刺激性全唾液,运用酶联免疫吸附法(enzyme-linkedimmunosorbentassay,ELISA)分别检测患者治疗前后及40名正常对照者唾液中IL-1α、IL-4、IL-8和TNF-α的表达水平。结果痤疮患者唾液中IL-1α、IL-4、IL-8和TNF-α水平较对照组有不同程度的升高,其变化程度均为Ⅳ级>Ⅲ级>Ⅱ级,治疗后IL-1α、IL-4、IL-8和TNF-α水平较治疗前明显降低。结论痤疮的发病与唾液中IL-1α、IL-4、IL-8和TNF-α水平的表达密切相关,说明免疫因素是导致痤疮发生发展的重要环节,夏枯草可能通过调节痤疮患者外周免疫因素起到治疗痤疮的作用。
简介:Trichosanthin(TCS)isapotentallergentomice.Accordingtoourpreviousexperiments,itcouldbringouttheIgEresponsetoovabumin(OVA)ifTCSwasgivenonedaybeforeOVAimmunization,whileOVAalonecouldnotinduceIgEtoit.Inthiswork,thekineticsofinterleukin4(IL-4)andinterferonγ(IFN-γ)geneexpressioninthemesentericlymphnode(MLN)ofTCS-immunizedmicewasinvestigatedusingasemi-quantitativeRT-PCRmethod.ItindicatedthatTCSinducedsignificantIL-4geneexpressionandthepeaksofIL4geneexpressionwereondayoneafterTCSimmunizationinbothprimaryandsecondaryresponse.Incontrast,theIFN-γgeneexpressionwassuppressed.Furthermor,theIL-4geneexpressioninthesecondaryresponsewaslowerthanthatintheprimaryresponse.ThusthepresenceofIgEmemoryBcellswerestudied.ResultsshowedthattheamountofmatureIgEmRNAarosesignificantlyandrapidlyonedayafterTCSrestimulation,whileintheMLNofthemiceprimed30daysbeforeandwithoutboost,itwasalmostasthesameamountoftheunimmunizedcontrol.ThesefindingssuggesttheexistenceoftheIgEmemoryBcellsinthemiceaftertheprimaryTCSimmunization.
简介:摘要目的探讨了局麻和全麻对手术病人血清TL-4、IL-18水平的影响。方法根据不容的麻醉方法将62例胃溃疡病人分为硬膜外麻醉组(A组)和静吸复合全麻组(B组),每组31例。在麻醉诱导前,手术切皮和手术开始后1小时抽取静脉血3ml,分别测定血清TL-4、IL-18浓度。结果A组血清TL-4、IL-18含量在切皮和术中1小时与术前比较有显著性差异(P<0.05)、B组血清TL-4、IL-18含量无显著性差异(P>0.05);在切皮和术中1小时,B组TL-4、IL-18含量比A组含量低(P<0.05)。结论静吸复合麻醉能明显降低TL-4、IL-18浓度,有一定的临床实用价值。
简介:Thepurposeofthestudyistoestablishafluorescencequantitativereversetranscriptionpoly-merasechainresponse(FQ-RT-PCR)methodforthequantitativedeterminationofIL-2mRNAandIL-4mRNAinThcells,withwhichtheThcellsstatusofthepatientswithgynaecologicaltumorsandchronicrenalfailure(CRF)canbeanalyzed.IL-2cDNAandIL-4cDNAwereprepared,andtheplasmidpMD18carryingIL-2cDNAorIL-4cDNAfragmentwasconstructedandclonedasthetemplateforquantitativedetermination.Theprimersandprobeslabelledwith6-carboxy-fluorescein(FAM)and6-carboxy-tetrarnethylrhodamine(TAMRA)wereprepared,andtheexperimentalconditionswereoptimizedtosetuptheFQ-RT-PCRmethodforquantitativedeterminationofIL-2mRNAandEL-4mRNA.Thcellsenrichedfromperipheralbloodmononuclearcells(PBMCs)of20healthyvolunteers(HVs),16gynaecologicalbenign(GB)cases,18gynaecologicalmalignant(GM)tumorcasesand16chronicrenalfailure(CRF)patientsweretestedforIL-2mRNAandIL-4mRNAbyFQ-RT-PCR.Thehouse-keepinggeneβ-actinwasusedastheinternalcontrolgeneoftheexperiment.Thestandardcurveforlogconcentrationofseriesofquantitativetemplatesvsthresholdcycle(CT)wasestablishedbylinearregression,andthelinearrangewas102-107copies/μl.TheimprecisiontestshowedtheCVofinter-assayandintra-assayofahighcontentsamplebyFQ-RT-PCRwere7.8%and12.5%,respectively.TheCVofinter-assayandintra-assayofalowcontentsamplewere10.8%and19.5%,respectively.TheIL-2mRNAexpressionsinThofthepatientswithgynaecologicalmalignanttumor(comparedwiththeHVsandthepatientswithgynaecologicalbenigndisease)andinThoftheCRFpatients(comparedwiththeHVs)weredeclinedsignificantlyandatthesametimetheIL-4mRNAexpressionincreasedsignificantly(P<0.001).Asimple,sensitiveandaccurateFQ-RT-PCRmethodforthequantitativedetectionofIL-2mRNAandIL-4mRNAhasbeenestablished.TheIL-2mRNAandIL-4m
简介:目的:研究色素异常性皮肤淀粉样变(Amyloidosiscutisdyschromica,ACD)的OSMR基因、IL31RA基因的突变情况。方法:用PCR扩增色素异常性皮肤淀粉样变的两姐妹患者及其家系成员的OSMR基因第14、15外显子和IL31RA基因第12外显子并进行测序,以30个正常人的样本作对照。结果:患者及其家系成员OSMR基因第14、15外显子和IL31RA基因第12外显子均未发现明显突变。结论:色素异常性皮肤淀粉样变的发生可能存在遗传学上的多变性。
简介:目的:探究血清IFN-γ、IL-4、IL-5及IL-17对儿童哮喘影响及相关性。方法分析2013年1月~2014年6月在我院收治的39例哮喘急性期儿童的临床资料,并列为观察组,选取37例在我院进行健康检查的健康儿童作为对照组。结果观察组患者血清IFN-γ、IL-4、IL-5及IL-17水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组患者VC%、FEV1/FVC%、MMER水平明显低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组患者IFN-γ、IL-4、IL-5、IL-17水平与FEV1/FVC(%)水平呈现显著负相关。结论儿童哮喘发病与Th1、Th2及Th17细胞分泌的IFN-γ、IL-4、IL-5及IL-17有关,其表达水平升高与哮喘的严重程度呈正比。
简介:探讨胃癌组织中IL-4和IL-6的表达水平与临床病理特征及预后的关系。方法:收集山东大学附属省立医院2011年8月~2012年4月42例胃癌患者的癌组织标本,使用RT-PCR检测IL-4和IL-6的mRNA表达水平,分析IL-4和IL-6的表达水平与胃癌临床病理资料和预后的关系。结果:胃癌组织中IL-4呈阳性表达(27/42,64.3%),癌组织中IL-4的表达高于癌旁组织和正常组织,癌旁组织中IL-4表达亦高于正常组织。胃癌组织中IL-6呈阳性表达(30/42,71.4%),癌组织中IL-6的表达高于癌旁组织和正常组织,癌旁组织中IL-6表达与正常组织相比差异无统计学意义(P〉0.05)。IL-4阳性表达的患者生存期明显低于IL-4阴性表达的患者;IL-6阳性表达的患者复发转移率多于IL-6阴性表达的患者。结论:IL-4以及IL-6在胃癌组织中表达明显升高,IL-4、IL-6有望成为判断胃癌预后的依据。
简介:摘要目的通过实验研究分析对咳嗽变异性哮喘(CVA)发作期患儿应用滋阴清嗓汤对患儿的血清IL-4、IL-5水平的的影响。方法抽取2016年3月到2017年2月于我院治疗的咳嗽变异性哮喘发作期患儿40例,通过滋阴清嗓汤对患儿进行治疗,治疗时间为2周,采取酶联免疫吸附实验法检测经滋阴清嗓汤治疗前后患儿外周血单个核细胞(PBMC)的IL-4、IL-5水平的变化和咳嗽、咽痛、喉痒等哮喘症状的变化及改善情况。结果经治疗前咳嗽变异性哮喘患儿外周血单个核细胞IL-4水平为91.87±12.41ng/l、IL-5为11.58±0.57ng/ml,经滋阴清嗓汤治疗后患儿外周血单个核细胞IL-4水平降低为70.25±13.74ng/l、IL-5为6.14±0.28ng/ml,通过给予滋阴清嗓汤治疗后患儿的血清IL-4、IL-5水平出现显著降低,患儿的咳嗽、咽痛、喉痒等哮喘症状均有所改善,差异明显,具有统计学意义(P<0.05)。结果通过滋阴清嗓汤可以使咳嗽变异性哮喘发作期患儿的外周血单个核细胞内IL-4、IL-5的水平出现明显降低,滋阴清嗓汤可以缓解、治疗咳嗽变异性哮喘发作期的机制可能与患儿外周血单个核细胞内IL-4、IL-5的水平降低有关。
简介:摘要目的探讨Crouzon样综合征的临床表现、基因突变特点、治疗及预后。方法收集郑州大学附属儿童医院2019年5月诊断的1例 Crouzon样综合征患儿的临床资料,总结其临床特点,并结合文献分析IL11RA相关Crouzon样综合征的突变特点。结果先证者为男童,5岁4个月,主要临床表现为头痛、呕吐、眼球突出、眼距增宽、鼻根部扁平、头颅畸形呈舟状。头颅CT示小脑扁桃体略下移,枕骨大孔饱满,双侧颅板局部变薄,双侧颅骨前后径增长,颅缝均已闭合;头颅磁共振成像示Chiari畸形Ⅰ型。全基因组外显子测序发现患儿IL11RA基因外显子区域存在2处杂合突变,分别为c.40_63del和c.811-2A>G,前者为整码突变,后者为剪接突变;Sanger测序验证结果显示c.811-2A>G突变来源于患儿母亲,c. 40_63del为新发变异。结论Crouzon样综合征主要临床表现为颅缝早闭、中面部发育不全及眼部畸形。IL11RA基因复合杂合突变是本例患儿的遗传学病因,基因检测有助于明确诊断,及时手术治疗预后良好。