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  • 简介:摘要目的研究荧光PCR检测MP-DNA在儿童肺炎诊断中临床应用价值。方法选择132例儿童呼吸道感染患者,以0~4岁为试验组,其他年龄段患者为对照组,分别行荧光PCR检测咽拭子或深部浓痰中MP-DNA,被动凝集检测患者血清中MP-Ab。结果试验组荧光PCR阳性率为20.3%、被动凝集阳性率为8.5%;对照组荧光PCR阳性率为20.1%、被动凝集阳性率为30.1%;经卡方检验,荧光PCR检测两组别χ2=0.19,P>0.05无统计学差异,被动凝集检测两组别χ2=10.7,P<0.05有统计学差异。结论荧光PCR具有特异性强,灵敏度高的特点,尤其在婴幼儿的肺炎支原体检测中,考虑患者免疫系统发育未全因素,荧光PCR更具优势。

  • 标签: 肺炎支原体(MP) 荧光PCR 被动凝集法
  • 简介:目的:研究膀胱肿瘤尿路脱落细胞的微卫星状态及其临床病理关系。方法:35例膀胱肿瘤尿液脱落细胞应用多重荧光PCR检测尿路的微卫星状态。结果:35例尿液样本:膀胱肿瘤组15例,有6例MSI-H,8例MSI-L,1例MSS,诊断阳性敏感度达93.33%;膀胱癌术后复查组6例,血尿及尿路上皮轻度异型组7例,正常体检组7例中,在血尿及轻度异型组发现1例MSI-L,其余均为MSS,阴性特异率达95%。结论:尿路脱落细胞的微卫星检测可作为膀胱肿瘤诊断和监测复发的有效非侵袭性检测方法。

  • 标签: 尿路脱落细胞 微卫星不稳定 多重荧光PCR
  • 简介:建立了商业化种植的NeWLeaf-YTM转基因马铃薯的筛选检测和鉴定的PCR方法.该方法根据马铃薯自身patatin基因作为内源特异参照基因扩增216bp片段,检查模板DNA提取的质量,避免了假阴性结果;同时扩增FMV35S启动子基因225bp片段和PVY-cp基因161bp片段.PCR反应循环参数是94℃2min;94℃40s,55℃60s,72℃60s,35次循环;之后72℃延伸5min.本实验中的F-primer(PVY01-5′)/R-primer(PVY01-3′)引物是针对商业化种植的NewLeaf-YTM转基因马铃薯PVY-cp抗病毒基因而设计的,具有很强的特异性,可以达到对NeWLeaf-YTM转基因马铃薯鉴定的目的.

  • 标签: NewLeaf-Y^TM 转基因马铃薯 PCR检测鉴定方法
  • 简介:目的:建立李痘病毒(PPV)特异、灵敏、快速的实时荧光定量RT-PCR检测方法,用于核果类种苗的健康评测及李痘病毒疫情监测。方法:根据PPV-D株系和PPV-M株系的外被蛋白(CP)基因保守序列,设计特异性引物和TaqMan探针,扩增全长CP基因片段,并将其克隆到pMD18-T载体上,构建质粒标准品,建立PPV的实时荧光定量RT-PCR检测方法,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行评估。结果:此荧光定量RT-PCR方法对PPV检测呈现高灵敏度和高特异性,与马铃薯Y病毒和马铃薯X病毒无交叉反应,最低检出限可达1.6×10^2拷贝/μL,标准曲线的相关系数为0.99918。结论:建立了李痘病毒的荧光定量RT-PCR检测方法,可望应用于检验检疫部门对李痘病毒的快速检测

  • 标签: 李痘病毒 荧光定量RT-PCR TAQMAN探针
  • 简介:目的了解肝癌和肝硬化患者中TTVDNA感染状况。方法采用套式PCR技术检测TTVDNA及血清稀释检测血清TTVDNA的滴度。结果山东肝癌25例标本中8例TTVDNA阳性,阳性率为32.0%;广州肝癌16例中6例TTVDNA阳性,阳性率为37.5%;广西肝癌65例中28例TTVDNA阳性,阳性率为43.1%。16例肝硬化标本中6例TTVDNA阳性,阳性率为37.5%。结论研究证实中国肝癌和肝硬化患者中存在35.7%的TTVDNA感染,这种TTVDNA感染是否对肝癌和肝硬化有促进作用,尚待进一步研究证实。

  • 标签: TTV 肝癌 肝硬化患者 DNA 阳性率 套式PCR
  • 简介:【摘要】:新型冠状病毒肺炎是由新型冠状病毒 (2019-nCoV)引起的一种急性的呼吸道传染疾病,可迅速发展为急性呼吸窘迫综合征、脓毒症休克、难以纠正的代谢性酸中毒和出凝血功能障碍,严重威胁患者的生命健康安全。经相关学者对新型冠状病毒毒株的检验研究后,确认通过实时荧光 RT-PCR核酸检测可对新型冠状病毒进行临床诊断,可以早发现、早诊断、早治疗或尽早与其他病毒感染者进行鉴别诊断。

  • 标签: 2019新型冠状病毒 病原学 RNA反转录 聚合酶链式扩增 核酸检测
  • 简介:摘要随着时代的进步,社会的发展,大多数疾病已经可以得到很好的治愈,但是大规模的流感病毒的爆发,仍然困扰着我们,特别是甲型H1N1流感。流感病毒传染性强,变异性强传播速度快,爆发后难以控制,极大的危害了社会的安定和谐,,影响了人们的生活质量。所以及早点了检测发现流感病毒是抑制病毒传播,控制流感病毒爆发程度的最为关键的步骤。现在国内外常用的检测流感病毒的方法主要有血清学检测、核酸扩增检测、细胞培养、流感病毒抗原检测等。但是这些常用的方法耗费大量时间和精力,不适用于流感病毒的快速检查。相反,荧光定量RT-PCR是各种检测方法中最灵敏、最有效、最准确的。所以对于荧光定量RT-PCR检测流感病毒的应用的研究是有很大医学价值。

  • 标签: 荧光定量RT-PCR 检测 流感病毒 应用
  • 简介:建立一种检测HSV2的实时定量PCR,而实时定量PCR检测出HSV2DNA阳性标本有l9例,HSV2的FQPCR定量检测 

  • 标签:
  • 简介:摘要探讨乙型肝炎血清标志物和乙型肝炎病毒DNA量之间的关系,分析荧光定量PCR在乙型肝炎检测中的作用。HBVDNA定量是目前诊断乙型肝炎、判断病毒复制和评价患者肝脏病变、预后及药物疗效的重要指标之一,但在指导诊疗时仍需结合血清标记物、肝损害指标乃至HBV基因分型。方法PCR核酸探针杂交、RELISA、竞争定量PCR、实时荧光定量PCR,本文综述定量检测HBVDNA意义及PCR检测方法。结论实时荧光定量PCR检测乙型肝炎病毒DNA是反映HBV复制水平的可靠指标,有助于疾病的诊断及预后判断。

  • 标签: 乙型肝炎病毒 核糖核酸 实时荧光定量PCR
  • 简介:【 摘要 】 目的: 评价实时荧光定量 PCR 在病毒检测中的应用效果 。 方法: 研究我中心 2019年 3月 ~2019年 9月期间纳入的 158例疑似 HFMD患者,研究中使用到的核酸检测仪器选取 ABI-7300进行 FQ-PCR检测,观察并分析 FQ-PCR检测病毒发生情况。 结果: 经检测, 158例疑似 HFMD患者中, FQ-PCR检测的 EV阳性确诊为 115例,阳性率 72.78%,其中 EV71RAN阳性有 109例, CA16PNA检测的阳性 53例;而 ELISA检测出的 EV阳性确诊为 63例,阳性率 39.87%,两者 差异大, P<0.05。 15例 HFMD患者实行 FQ-PCR检测到的 EV阳性 12例,而 ELISA检测 6例阳性数,差异显著, P<0.05。 结论: 实行 FQ-PCR检测对 HFMD病毒检测率提升,值得临床进一步研究。

  • 标签: 病毒检测 实时荧光定量 PCR 应用效果 评价
  • 简介:DNA探针和PCR(PolymeraseChainReaction聚合酶链式反应)技术是近年来发展起来的两种高新生物技术,并以其敏感性、特异性、简便、快速的优点,在食品科学领域得到了广泛的应用.该文着重介绍了这两种技术的基本原理及其在食品检测中的应用概况,并对其在食品检测领域里应用存在的问题进行了分析和阐述.

  • 标签: DNA探针 PCR技术 食品检测
  • 简介:摘要近年来,随着信息技术的不断发展,各类食品的安全问题也经常暴露在人们的视野中,应用PCR技术在食品检测方面能快速准确的检测出食品中蕴含的微生物,本文主要通过PCR技术在食品微生物检测中的优势和实际的应用情况,进行简要的分析,对于在食品安全检测方面引进PCR技术的重要性。

  • 标签: PCR技术 微生物 检测
  • 简介:【摘要】目的:主要了解荧光定量PCR技术应用到临床微生物检测所产生的具体价值。方法:随机选择进入到我院开展治疗的80例患者作为本次实验对象,通过应用荧光定量PCR技术来做好临床微生物检测,了解具体的临床微生物的实际情况。结果:荧光定量PCR技术临床检查效果非常好,数据准确性高,能够作为临床检测技术应用。结论:荧光定量PCR技术可以实现临床微生物检测,实际应用价值比较高。

  • 标签: PCR技术 临床微生物 检测 应用
  • 简介:为建立食品中副溶血性弧菌(VP)的PCR检测方法,选取tl基因作为靶序列设计一对引物,用该引物对14株从国内食品中分离的副溶血性弧菌(经传统方法验证)和30株非副溶血性弧菌进行PCR扩增,并用此方法对人工污染食品进行检测.扩增片段表现出极好的特异性,对人工污染的冷冻虾仁、沙丁鱼的检出限为10CFU/g,且与传统方法结果吻合.该方法适宜于食品中副溶血性孤菌的检测.

  • 标签: 食品 副溶血性弧菌 PCR技术 检测方法 分子生物学
  • 简介:目的快速准确地检测副溶血性弧菌(VP)和伤寒沙门氏菌(ST).方法:根据VP的tdh基因和ST的H1-d基因顺序设计二对引物,通过聚合酶链反应检测食品或其它待检样品中的VP和ST,将扩增产物电泳.结果:分别出现与已知阳性对照细菌条带大小一致的202和458bp的tdh和H1-d基因片断的条带,判定该样品中相应细菌为阳性.结论:本法特异性强、灵敏度高,能在24小时内出结果,可适用于食品或其它样品中VP和ST的快速检验.

  • 标签: 副溶血性弧菌 伤寒沙门氏菌 聚合酶链反应
  • 简介:随着现代分子生物学技术的发展,反转录聚合酶链式反应技术在甘薯病毒检测上的应用越来越广泛。采用该技术可检测出甘薯组织中含量极低的病毒RNA,具有灵敏度高、特异性强等优点。在本研究中根据NCBIGenBank中收录的SPCSV病毒外壳蛋白(CP)基因核苷酸序列的保守区域设计了3对特异性引物,使用天根生化科技(北京)有限公司生产的QuantOneStepRT-PCRkit试剂盒,针对影响扩增产物的影响因素退火温度进行优化,建立了甘薯退绿矮化病毒的RT-PCR检测方法。该方法使RT-PCR在一管内完成,大大降低了外源物质的污染及RNA降解的几率,可作为甘薯SPCSV病毒的快速检测方法。

  • 标签: 甘薯 退绿矮化病毒 RT-PCR检测技术
  • 简介:近年手足口病(hand-foot-mouthdisease)在儿童中流行情况较为严重,由肠道病毒感染引起,可经消化道、呼吸道传播,易造成流行[1]。主要表现为口腔黏膜溃疡性疱疹及四肢末端水疱样皮疹,主要病原为柯萨奇病毒A组16型(CoxA16)和肠道病毒71型(EV71)[2]。1资料与方法1.1研究对象2009年南京儿童医院确诊为手足口病,持续发热并出现嗜睡、易惊、烦躁不安、抽搐等神经、呼吸系统症状,住院隔离治疗的患儿161例。男95例,女66例。年龄最小7个月,最大11岁。手足口病诊断标准参照卫生部办公厅《手足口病诊疗指南(2008年版)》[3]。1.2研究方法1.2.1标本采集征得患

  • 标签: 肠道病毒感染 手足口病 实时荧光定量 检测 柯萨奇病毒 咽拭子
  • 简介:犬细小病毒病感染是由犬细小病毒(cPv)引起犬只死亡的最重要传染病之一,目前诊断该病的方法主要是胶体金快速检测试板,虽然检测方法较简便快速,但其敏感性较差。通过对NCBI网站GenBank发表的CPV-2基因组序列的分析,选择该病毒VP2基因保守序列设计引物,通过对阳性病料扩增及扩增产物测序,与NCBI发表的相关基因对比,同源性在99.8%-100%,成功建立了特异性、灵敏度高的PCR方法,最低只需2.5PgDNA模板。在对28例可疑CPV病例检测中,本方法检出25例阳性、3例阴性,阳性率为89.28%;胶体金检测检测出20例阳性、8例阴性,阳性率为71.42%,证实PCR方法比胶体金检测更敏感。

  • 标签: 犬细小病毒 PCR 检测方法
  • 简介:摘要:近年来,随着信息技术的不断发展,网络上经常爆出食品安全问题。在食品微生物检测内,PCR技术(聚合酶链反应技术,polymerase chain reaction, 简称PCR)具有显著应用价值,可实现快速、精准检测食品内的微生物。本文探寻PCR技术在食物微生物检测内的应用,探寻PCR技术的潜在价值。

  • 标签: PCR技术 食品 微生物检测
  • 简介:摘要:手足口病是儿科的多发病和常见病,具有较高的传染性和流行性,通常发生在夏秋季节,以5岁以下的婴幼儿最为常见。其中,以手、足部出疹,口腔黏膜疱疹或溃疡等为特征性表现。一般情况下患儿在发病的5~7天自行缓解,也有少部分患儿会发展至重症,即出现脑膜炎、脑炎、脊髓炎、脑脊髓炎等中枢神经系统受累并发症,甚至伴有肺水肿、肺出血及循环衰竭等症状。危重症患儿与轻症患儿不同,因其病情进展较快,若不及时接受有效治疗,可危及生命安全。目前临床上诊断手足口病的金标准为病毒分离培养,虽然准确率高,但检测时间长,在现实应用过程中存在比较明显的缺陷,因此寻求一种操作简单、方便、费用低、准确率高、灵敏度高的检查方法十分必要。以PCR为基础的分子检测,具有准确率高、灵敏度高,适合临床的需求。

  • 标签: 荧光PCR 测序 手足口病 病毒