简介：【目的】为探究转Cry1Ac/1Ab基因棉花对异色瓢虫生长发育及其捕食功能的影响。【方法】以转Cry1Ac/1Ab基因棉与其亲本常规棉为实验材料,利用取食不同棉花品种叶片的棉铃虫饲喂异色瓢虫幼虫。【结果】与常规亲本棉相比,取食饲喂转基因棉花叶片的初孵棉铃虫幼虫的异色瓢虫幼虫从1龄发育至化蛹期时间延长0.77d,但差异不显著;除1龄幼虫体重增加(0.0773mg)外,其余各龄期幼虫体重均有所下降,但差异均不显著;异色瓢虫1、2、3、4龄幼虫对初孵棉铃虫捕食量均随棉铃虫密度的增加而增加,捕食功能反应均符合HollingⅡ圆盘方程。【结论】转Cry1Ac/1Ab基因棉花对异色瓢虫生长发育无显著影响,饲喂取食转Cry1Ac/1Ab基因棉花的棉铃虫对异色瓢虫捕食功能无显著差异。

简介：目的获得猪胰岛素启动子调控外源基因的高效表达载体,为制备转基因猪胰岛特异性表达目的基因奠定基础。方法利用猪胰岛素启动子（PIP,包含5＇调控区、第一外显子、第一内含子及第二外显子ATG前的序列共1.5kb）构建表达载体,连接PIP和EGFP的酶切位点HindⅢ设计在起始密码子前,命名为PIP-HindIIIEGFP。鉴于酶切位点的插入位置可能会影响外源基因的表达效率,对载体进行了优化：将HindIII酶切位点删除,实现PIP和EGFP无缝连接,载体命名PIP-EGFP;将第一内含子3＇端的内含子剪接受体位点（splicingacceptorsite,SA）突变为HindIII内切酶识别位点,命名为PIP-SA（M）-EGFP。三种载体分别电转染小鼠胰岛素瘤β细胞株MIN-6细胞、猪耳成纤维细胞以及猪肾细胞,48h后通过荧光强度、流式分析、RT-PCR及Westernblot检测,验证载体的表达效率。结果转染细胞后,三种载体都仅在MIN-6胰岛β细胞表达绿色荧光。RT-PCR及其产物测序结果显示三种载体的胰岛素启动子第一内含子的剪切存在差异：载体PIP-HindIII-EGFP和PIP-EGFP的内含子存在剪切和不剪切两种情况,剪切不稳定;载体PIP-SA（M）-EGFP的SA位点突变后内含子不剪切,流式细胞及Westernblot检测显示,与另外两种载体相比,该载体目的蛋白的表达量最高。结论通过突变胰岛素启动子第一内含子的3＇端的剪接受体位点,成功获得了胰岛β细胞的高效表达载体,可用于制备胰岛特异表达外源基因的转基因猪。

简介：目的：探讨BNP和D二聚体对老年心功能不全严重程度的关系及预后的影响。方法：以2010年1月-2012年12月来我院就诊的慢性心功能不全患者为观察对象，根据心功能不全程度分为无症状组、心功能不全II级、III级、IV级3，另取健康体检者为对照，比较各组间BNP、D二聚体水平及相关性分析。结果：各患者组BNP和D二聚体水平与对照组相比明显增加（P〈0．05）；BNP与心功能不全分级、LVEDD、LAD呈直线正相关关系（P〈0．05），与LVEF呈直线负相关关系（P〈0．05）；D二聚体与心功能不全分级、LVEDD呈直线正相关关系（P〈0．05），与LVEF呈呈直线负相关关系（P〈0．05），与LAD直线关系无统计学意义（P〉0．05）；BNP水平1000pg／mL以下治疗有效率80．2％，疗效优于1000pg／mL以上者（Riditz=15．245，P=0．000），D二聚体5μg／mL以下者治疗有效率85．4％，疗效优于5μg／mL以上者（Riditz=26．354，P=0．000）。结论：BNP和D二聚体与老年心功能不全严重程度和超声心动图指标密切相关，可以作为疾病预后预测。

简介：本文以中季稻区稻田主要害虫稻飞虱、稻纵卷叶螟和捕食天敌蜘蛛的田间系统调查资料为基础，以害虫—天敌—农药系统为研究对象，应用害虫管理系统工程的原理，处理害虫、捕食天敌与农药三者之间的关系。建立了稻纵叶螟—蜘蛛—甲胺磷和稻飞虱—蜘蛛—甲胺磷两系统优化管理模型，绘制了它们的优化反馈控制策略图，利用微机对系统进行最优监控。使用时输入当前田间害虫与天敌数量，就可对系统作出即时的预测和最优决策。该策略确立的控制害虫的最优性能指标，是使害虫对农作物的为害所造成的损失与防治费用之和最小，并且使害虫和天敌的数量处于系统平衡状态。文中比较分析了该策略与基于经济阈值的常规害虫管理策略，指出了新策略在害虫综合治理中对天敌数量进行控制和管理的作用及其意义。

简介：基于工作过程的学科课程体系开发与优化,是与现如今新课改教学理念相融合,以行动体系为基础,以培养能力为主线,以促进学生实践探究为目标,结合工作过程中不同任务的相关性来进行知识、实践技能的整合,形成'串行'的学科体系。高职教育应该以就业为目标,以学生的'学'为中心,转变以往循序渐进学习各门课程为更加贴近于实践,更加符合与接近工作过程的需要。工作过程与行动导向、目标导向、实践能力导向、工作需要导向等贴近生产生活需要的能力导向相符合,是现阶段对高职教育教学理念的重新审视与革新。本文分析了优化基于工作过程电气自动化专业课程体系教学策略的方案。

简介：目的：研究双歧杆菌三联活菌片对溃疡性结肠炎患者免疫功能及Fas/FasL表达的影响.方法：选取2014年7月至2015年6月本院收治的84例溃疡性结肠炎患者,根据患者入院顺序分为观察组（42例）和对照组（42例）两组.对照组采取美沙拉秦肠溶片进行治疗,观察组在此基础上结合双歧杆菌三联活菌片进行治疗.分析两组患者治疗前和治疗2个月后炎症因子水平、T细胞亚群以及Fas/FasL表达情况,并比较两组患者的临床疗效.结果：观察组总的有效率显著高于对照组（P＜0.05）.治疗后,观察组的血清白介素-1（IL-1）、白介素-6（IL-6）、白介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平显著低于对照组（P＜0.05）,CD4＋、CD4＋/CD8＋T细胞亚群显著高于对照组,CD8＋、Fas/FasL表达显著低于对照组,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论：使用双歧杆菌三联活菌片治疗溃疡性结肠炎患者能改善患者的免疫功能及Fas/Fasl表达,减轻炎症反应,临床效果良好.

简介：目的：初步探究十五肽BPC-157调节人脐静脉内皮细胞（HUVEC）功能的信号通路作用机制。方法：首先利用生物芯片筛选BPC-157参与激活的细胞信号转导通路途径，进而通过real—timePCR证实BPC-157对候选信号通路中相关基因的mRNA表达水平的影响，最后采用Western印迹观察BPC-157对候选信号通路中相关蛋白的磷酸化水平影响。结果：10μg／mLBPC-157作用于HUVEC24h后，信号转导通路发现者芯片结果显示，与18条信号转导通路相关的96个关键基因中分别有4个基因的mRNA表达水平上调和下调，其中与MAPK信号通路相关的3个关键基因c—ns、c—Jun和Egr-1的mRNA表达水平显著性上调；低剂量BPC-157（1Ixg／mL）作用于HUVEC12h后，能够促进早期即刻基因c—ns、c—Jun和酝卜1的mRNA表达水平；10μg／mLBPC-157作用于HUVEC30min后，可明显促进ERKl／2、p38蛋白磷酸化。结论：BPC-157可能通过活化MAPK信号转导通路途径后，激活下游早期即刻基因转录，启动靶基因的表达，从而发挥促进HUVEC增殖、迁移等功能。

简介：目的：探讨老年代谢综合征（MS）患者颈动脉内膜中层厚度（IMT）与血管内皮功能及血管粘附因子-1（VCAM-1）的相关性。方法：选取2013年1月~2014年10月我院收治的50例MS患者分为老年组（n=25）和中青年组（n=25）,又根据IMT分为正常组和增厚组两个亚组。比较老年组和中青年组患者的临床资料,采用放射免疫分析法检测所有患者内皮素-1（ET-1）水平,采用分光光度计间接比色法检测一氧化氮（NO）水平,采用ELISA法检测VCAM-1水平,采用超声诊断仪检测IMT。结果：老年MS组和中青年MS组临床资料比较,差异均无统计学意义（均P〉0.05）;MS患者IMT增厚组的NO水平均低于IMT正常组,而ET-1和VCAM-1水平均高于IMT正常组,比较差异有统计学意义（均P〈0.05）。IMT增厚组间比较,老年MS组的NO水平低于中青年MS组,VCAM-1水平高于中青年MS组,比较差异均有统计学意义（P〈0.05）;老年MS组和中青年MS组的IMT与NO水平呈负相关（r=-0.415,-0.411;P=0.043,0.049）,与ET-1和VCAM-1水平呈正相关（r=0.585,0.576;P=0.030,0.036;r=0.547,0.552;P=0.033,0.031）。结论：血管内皮功能障碍和动脉粥样硬化等多重因素促进了MS患者IMT增厚中病理过程的发生和发展。

简介：目的：探讨经椎旁肌间隙入路治疗胸腰椎骨折的临床疗效及对Cobb’S角与椎体功能的影响。方法：选择2013年8月至2015年8月我院接诊的94例胸腰椎骨折患者，通过随机数表法分为观察组（n=47）和对照组（n=47），观察组使用经椎旁肌间隙入路椎弓根螺钉内固定术，对照组使用传统开放式置入椎弓根螺钉内固定术。比较两组围术期情况及术前术后视觉模拟评分法（VAS）、下腰痛功能障碍指数（ODD、Cobb’S角和椎体前缘高度的变化。结果：观察组切口长度、手术时间、住院时间、卧床时间均明显短于对照组，术中出血量明显少于对照组（P〈0．05）；两组手术前VAS评分、ODI评分、Cobb’S角、椎体前缘高度比较差异均无统计学意义（P〉0．05），手术后7d、1个月时VAS评分、ODI评分均较治疗前显著降低（P〈0．05），手术后1个月、1年时Cobb’S角、椎体前缘高度均显著改善（P〈0．05），且观察组手术后7d、1个月时VAS评分、ODI评分均明显低于对照组（P〈O．05），手术后1个月时Cobb’s角、椎体前缘高度均优于对照组（P〈0．05），但两组手术后1年时Cobb’S角、椎体前缘高度比较无显著差异（P〉O．05）。结论：在胸腰椎骨折患者中应用经椎旁肌间隙入路椎弓根螺钉内固定术效果显著，其具有创伤小、手术时间短、出血量少、术后椎体功能恢复快等优点。

简介：目的：探讨二甲双胍对多囊卵巢不孕患者卵巢功能、雌激素水平及胰岛素抵抗的影响。方法：选取我院收治的多囊卵巢不孕症患者72例，根据用药不同分为对照组与实验组，每组36例。对照组患者给予来曲唑促排卵治疗，实验组患者在对照组基础上予以二甲双胍治疗。观察并比较治疗前后两组患者的卵巢功能、雌激素水平、胰岛素抵抗及受孕情况。结果：与治疗前比较，两组患者治疗后卵巢功能、雌激素水平、胰岛素抵抗及受孕情况均得到改善，差异具有统计学意义（（P〈0．05）；与对照组比较，实验组患者治疗后卵巢功能显著改善，雌激素水平显著提高，胰岛素抵抗情况明显好转，受孕情况显著改善，差异均具有统计学意义（P〈0．05）。结论：二甲双胍能够调节多囊卵巢不孕症患者的卵巢功能，提高雌激素水平，改善胰岛素抵抗，提高受孕率，值得临床推广应用。

简介：T细胞表位在抗病毒的T细胞免疫中发挥核心作用，目前已在多种病原微生物的蛋白序列上发现存在T细胞表位的聚集现象。本文建立了一套功能学与结构学结合的策略鉴定病原体上细胞毒性T细胞（CytotoxicTLymphocyte，CTL）表位富集区的方法，并以严重急性呼吸道综合征（SARS）相关冠状病毒（SARS．CoV）的M蛋白为例，成功地鉴定了一个HLA—A2限制性的表位富集区。首先通过生物信息学的方法预测并合成M蛋白跨膜区的HLA—A2潜在结合多肽，通过体外复性实验和T2细胞结合实验验证多肽与HLA．A2的结合力；然后在HLA—A2．1／Kb转基因小鼠中检测这些多肽的免疫原性；最后通过x射线衍射技术，成功解析了其中一条多肽与HLA—A＊0201的复合物结构，其结构显示该多肽具有典型的HLA—A＊0201表位的结构特点，但却呈现出与以往鉴定多肽不同的构象和锚定残基。本文对于理解机体对SARS—CoV等病原体产生的T细胞免疫反应，以及为更广泛的人群设计T细胞疫苗具有重要意义。

简介：目的:构建斑马鱼FOXP3A融合蛋白的原核表达系统,诱导表达并制备多克隆抗血清。方法:选取斑马鱼foxp3a基因cDNA的894bp特异区段(s-foxp3a),对该片段进行密码子优化后构建原核表达载体pET-32a-s-foxp3a,转化大肠杆菌BL21(DE3),诱导表达斑马鱼S-FOXP3A-His融合蛋白并纯化,纯化后的蛋白免疫家兔,制备斑马鱼FOXP3A蛋白的多克隆抗血清,4次免疫后取血清,采用间接ELISA法检测抗血清效价。结果:在16℃经0.5mmol/LIPTG诱导10h的条件下,SDS-PAGE分析表明斑马鱼S-FOXP3A-His融合蛋白以包涵体形式产生;间接ELISA检测结果显示,FOXP3A蛋白多克隆抗血清的效价在1.6×10^5以上。结论:制备了高效价的斑马鱼FOXP3A多克隆抗血清,为进一步解析斑马鱼FOXP3A蛋白的功能提供了基础工具。