简介:【目的】谷斑皮蠹是一种重要的检疫性害虫,在新疆周边多个国家分布,口岸检疫人员多次从进境货物中截获谷斑皮蠹,该虫对新疆的农业生产极具威胁。【方法】以谷斑皮蠹的16SrDNA基因为靶序列,用昆虫通用引物对4种供试皮蠹进行PCR扩增,将扩增产物进行克隆和测序,用生物软件设计检测谷斑皮蠹的特异性引物与探针。【结果】设计的特异性引物(TG-SNP-F/TG-SNP-R)及所建立的常规PCR方法能有效检测出谷斑皮蠹,其扩增产物的片段大小为250bp,灵敏度为3ng·μL^-1设计的特异性引物(TG-F/TG-R)和探针(TG-probe),以及所建立的实时荧光PCR方法,对谷斑皮蠹的检测特异性强,灵敏度达0.8fg·μL^-1【结论】建立的常规PCR方法和实时荧光PCR检测方法能够对谷斑皮蠹进行准确鉴定,为口岸检疫人员检测进境货物中携带的谷斑皮蠹提供技术支持。
简介:Chlorpyrifos(CPF)是用途广泛的organophosphate杀虫药剂。在昆虫的谷胱甘肽S-transferases(GST)是detoxification酶的一个家庭,他们在CPFdetoxification起关键作用。Spodopteralitura是在在世界上的热带、副热带的区域的最破坏的农业害虫之一。在这研究,从在S的gsts的46个唯一的抄本的37Slgsts。包括八以前报导的GST,lituratranscriptome数据被识别并且他们的表达式模式在易受影响并且12-generation-CPF-treated紧张被分析在CPF忍耐的尚不致命的剂量理解这些Slgsts的角色。结果显示S的成员。lituraGST总科能被区分进三个主要的组:包括六cytosolicSlgsts(SlGSTe1,SlGSTe3,SlGSTe10,SlGSTe15,SlGSTo2和SlGSTs5)和二microsomalSlgsts(SlMGST1-2和SlMGST1-3),一个组为在12-generation-treated和易受影响的紧张感应的CPF直接负责;第二组织,包括三cytosolicSlgsts(SlGSTe13,SlGSTt1和SlGSTz1)和一microsomalSlgst(SlMGST1-1),仅仅在12-generation-treated紧张被导致;第三组织,包括八cytosolicSlgsts(二epsilon,三个三角洲,一终止,一个希腊语的第六个字母和一未分类的Slgst),比在易受影响的紧张在12-generation-treated紧张更高是表示1.52-5.15-fold。
简介:土壤宏无脊椎动物在在澳大利亚的热带无树平原支撑生产和生物多样性起一个重要作用。例如,通过他们的foraging和嵌套的活动,白蚁再循环营养素和碳并且生产便于水渗入的土壤毛孔。挑战向前到份量上理解驾驶这的关系和进程。不同种类和宏无脊椎动物的功能的组在各种各样的风景过程起什么作用?是不同陆地管理的效果的,练习(例如,国内牛放牧,火)在为风景健康的这些关系,和后果上?这篇论文在北澳大利亚从研究论述初步的结果,检验在土壤宏无脊椎动物上放牧的陆地状况和国内牛的效果,并且为要用作一个工具恢复的白蚁的潜力在降级的区域玷污功能。在北澳大利亚,增加了降级似乎在差异和活动ofmacroinvertebrates与衰落被联系。白蚁看起来是最有弹性的组之一,与能够维持在降级的风景的活动的某种类。
简介:在这研究,我们描述从蚊子疟蚊属stephensi孤立的ribosomalproteinS7基因的部分genomic组织。开始558bp部分cDNAsequence作为长包含223bp的先锋信使rna顺序被放大intron。5''和3''结束序列用cDNA的特定的快速的扩大结束的结束(种族)被恢复聚合酶链反应。全身的cDNA顺序与能够长编码192氨基酸的一个开的读物框架长是914核苷酸有22174Da和pI的计算分子的质量的蛋白质点of9.94。蛋白质相同搜索揭示了>75%身份到另外的昆虫“sS7ribosomal蛋白质。顺序排列的分析揭示了几个高度保存的领域,其一个与原子本地化有关是人的rpS7的信号(NLS)区域。有趣地,有A的intron核苷酸顺序比较。gambiae作为与编码anduntranslated区域相比显示出保存的更小的度。象这一样,早在genomic组织和分析(EST)能在A的染色体注解帮助的cDNA/Expressedsequence标签上学习。stephensi,并且将可能以后被定序。
简介:【背景】米尔顿姬小蜂是一种入侵我国台湾地区的植食性小蜂,能够严重影响水果的产量和食用价值。目前在我国大陆没有分布,由于其个体微小,与近似种区别较小,通过传统的形态学分类方法难以鉴定,因此有必要研究其基因片段序列,探讨分子鉴定方法。【方法】利用PCR方法扩增并测定了米尔顿姬小蜂线粒体16SrRNA和COⅠ基因的部分序列,并对各序列的碱基组成进行了分析。然后根据COⅠ基因部分序列,利用DNAMAN的MaximumLikelihood方法构建了米尔顿姬小蜂与膜翅目其他科的系统发育树。【结果】16SrRNA基因的PCR扩增产物为426bp,COⅠ基因的PCR扩增产物为488bp。通过测序获得米尔顿姬小蜂16SrRNA和COⅠ基因部分序列,序列分析表明,16SrRNA和COⅠ基因的A+T含量均较高,存在较强的A+T偏向性。系统发育树显示,米尔顿姬小蜂与蚜小蜂科的Encarsiaberlesei亲缘关系最近,与姬小蜂科的Chrysocharisnautius、C.eurynota亲缘关系较远。【结论与意义】本研究为米尔顿姬小蜂的分子鉴定提供了依据。
简介:【背景】烟粉虱作为世界性的多食性害虫,对我国农业生产造成了严重危害。已有研究表明,许多植物的次级代谢产物能够对烟粉虱解毒酶和靶标酶活性产生影响。【方法】采用常规生化方法研究了辣椒碱对烟粉虱体内羧酸酯酶(CarE)、谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)和乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响。【结果】与对照相比,500mg·L^-1辣椒碱处理烟粉虱成虫后6h,CarE活性被激活,其他时段被抑制;1000mg·L^-1辣椒碱处理后6、12、48h,CarE活性受到抑制,其他时段被激活;2000mg·L^-1辣椒碱处理后6h,CarE活性受到抑制,其他时段被激活;d000mg·L^-1辣椒碱处理后3、12h,CarE活性受到抑制,其他时段被激活;8000mg·L^-1辣椒碱处理后1h,CarE活性被激活,其他时段受到抑制。辣椒碱对烟粉虱体内GSTs活性的诱导存在剂量和时间效应,8000mg·L^-1辣椒碱处理烟粉虱成虫后24和48h,GSTs活性受到明显抑制,其余各处理在任何时段GSTs活性均被激活而高于对照。辣椒碱各浓度处理对烟粉虱体内AChE活性的诱导存在时间效应,各处理均在处理后48h对AChE活性产生了抑制作用。【结论与意义】辣椒碱对烟粉虱体内的解毒酶CarE和GSTs、靶标酶AChE活性具有明显影响,且存在剂量或时间效应,这可为辣椒碱在生物农药领域的应用提供理论依据。
简介:从胖身体和棉花一种蛾的幼虫的中间的勇气的细胞色素P450(Cyt-P450)蛋白质,Helicoverpa有佩带徽章权利的人一,被一套纯化过程部分分别地包括微分离心分离,小伙子的增溶,由木钉降水的蛋白质降水和DE-32柱层析净化。Cyt-P450被COdifference光谱和SDS页的方法检测。从胖身体ofH的净化的solubilized微体的部分。有佩带徽章权利的人一多于17褶层被净化。三个蛋白质乐队被SDS页与分子的群众检测70600,63300和571200Da。有63300和571200Da的分子的质量的蛋白质是Cyt-P450的isozymes,是可能的。
简介:[目的]随着杀虫剂阿维菌素的广泛应用,靶标生物对其抗性问题日益严重。以往的研究显示,细胞膜转运蛋白P糖蛋白可能与抗药性有关。但在昆虫对阿维菌素的抗性研究中,由于目前市场上缺少专门针对昆虫的商业化抗体,使得这一研究受限。为此,本研究尝试应用其他物种的抗体开展P糖蛋白的检测。[方法]以果蝇为测试昆虫,以阿维菌素作为测试药物,采用免疫印迹方法用鼠抗人P糖蛋白单克隆抗体检测阿维菌素敏感品系与阿维菌素抗性品系果蝇中的P糖蛋白的表达水平。[结果]检测出果蝇体内P糖蛋白的特异性表达,且无明显非特异性条带;与敏感品系果蝇相比,阿维菌素抗性品系果蝇P糖蛋白的表达水平明显升高。[结论]用针对人及其他脊椎动物的P糖蛋白单克隆抗体检测果蝇P糖蛋白的表达可行,且果蝇对阿维菌素的抗性可能与P糖蛋白的表达升高有关。
简介:Polydnaviruses(PDV)是一组昆虫DNA病毒,它与他们的特定的主人黄蜂展出一种相互的共生关系。而且,到目前为止在PDV识别的大多数encapsidated基因与发源昆虫的基因,然而并非与发源病毒的基因分享相同。同时,与2黄蜂类Cotesia和Glytapanteles联系的PDV大概编码一些基因从另外的病毒发源。Cotesiaplutellaebracovirus(CpBV)编码对baculoviralp94相应的4基因:CpBV-E94k1,CpBV-E94k2,CpBV-E94k3,和CpBV-E94k4。这研究被进行由baculoviralorthologs把他们的序列与那些作比较预言CpBV-E94ks的起源并且在nonparasitized幼虫和随后的特定的RNA干扰由他们的短暂表情决定生理的功能。我们的种系发生的分析显示CpBV-E94ks与另外的E94ks被聚类从不同PDV发源并且与betabaculoviralp94s分享了高类似。这4CpBV基因在Plutellaxylostella的幼虫的很发展的阶段期间被表示由C寄生于。plutellae。这4E94ks的表示主要在血球和胖身体被检测。随后的功能的分析由在vivo,短暂表示证明显著地禁止的所有4病毒的基因两个都招待有免疫力、发展的进程。这些结果建议CpBV-E94ks与betabaculoviralp94s分享起源并且在压制主人免疫者和发展过程起寄生作用。
简介:细胞色素P450基因的新奇完整的长度被孤立在杀虫药剂抵抗(命名CYP6CX1v1)并且易受影响(命名CYP6CX1v2)Bemisiatabaci,作为B遗传因子型被识别,福建,中国(Sj)。CYP6CX1(1940bp包含了1557bp开的读框架)对CYP6成员普通的包括的保存领域在carboxyl附近的helix-K,氧绑定主题AGLDPV和保存顺序PEKFNP的通常认为的曲流绑定顺序ETLR和PERF例如heme有约束力的主题PFGEGPRFCIA,结束。有在R和SB之间的氨基酸残余的四不同代替。tabaci(Thr300翼,Thr354Pro,Arg486His和Ile503Thr),在哪个之中替换Ile503Thr位于底层识别地点区域。CYP6CX1v1的mRNA抄写水平象CYP6CX1v2的一样高是2.38褶层。结果显示了从B遗传因子型B的CYP6CX1。在Sj的tabaci是CYP6成员之一,并且提高了CYP6CX1表示和氨基酸残余的代用品可能在域B涉及抵抗机制。tabaci。
简介:【目的】薇甘菊颈盲蝽是入侵植物薇甘菊的天敌昆虫。CYP4家族基因在专食性昆虫与宿主植物的相互作用中发挥着极其重要的作用,探明其在不同部位的表达情况,可为薇甘菊生物控制提供科学依据。【方法】采用RACE技术克隆薇甘菊颈盲蝽CYP基因,实时荧光定量PCR检测其在不同部位的表达情况。【结果】PmCYP4C1基因全长1713bp,其中ORF长1500bp,共编码500个氨基酸,理论分子质量为57.44ku,无信号肽;与其他昆虫CYP4家族基因的同源性大于40%,与温带臭虫CYP的亲缘关系最近。该基因在雌、雄虫各部位均有表达,且都是足部的表达量明显地高于其他部位;雌、雄虫的表达差异在于雄虫翅膀中的表达量明显地高于触角和残体,但在雌虫中这3个部位的表达量无显著差异,且雄虫翅膀中的表达量显著地高于雌虫,是其2.37倍。【结论】薇甘菊颈盲蝽PmCYP4基因除参与代谢有毒物质外,其主要功能可能是编码与薇甘菊颈盲蝽运动相关的酶。