简介：蒙古沙冬青（Ammopiptanthusmongolicus）是中国西北荒漠区唯一的常绿阔叶灌木,具有很强的抗寒抗旱特性。利用PCR方法从该植物克隆到转录因子AmDREB2C的cDNA和基因组DNA的全长编码区,二者均由1191bp组成,无内含子序列,编码由396个氨基酸残基组成的蛋白,其中含1个AP2结构域和1个核定位信号。表达分析显示,AmDREB2C的转录受低温和干旱胁迫的诱导。此外,将该基因编码区cDNA成功构建到植物表达载体pCAMBIA3300-35ST上,为后续研究其功能奠定了基础。

简介：目的转录因子MEF2通过调控肌肉特异表达基因在病理性心肌肥厚的发生发展中发挥重要的作用,但是直到目前,MEF2下游靶基因所知甚少。方法和结果我们使用自主研发的cardiosignalscan对人、小鼠和原鸡的全基因组核心启动子序列进行筛选,发现了111条启动子区含有MEF2保守结合位点的基因。整合EST表达序列数据库后,我们发现C3orf43和C10orf71是两条受MEF2调控同时在肌肉特异表达的新基因。进一步的功能研究表明,C10orf71在病理性心脏肥厚中显著升高1.6倍（P=0.012）,提示C10orf71可能参与了病理性心肌肥厚病程。结论C10orf71是一个新的受MEF2调控的在肌肉特异表达的新基因,并可能参与了病理性心肌肥厚病程。

简介：目的探索BALB/c和C57BL/6两个品系在有关实验中的不同作用。方法选取了结合随机测序与生物信息学分析设计合成的神经系统表达的一些基因的反义核酸(antisense)中的2个，用Hamilton微量注射器将其分别定量注射到BALB/c和C57BL/6小鼠的侧脑室，并分别设注射生理盐水和随机序列核酸(Scramble)的对照组。每一反义核酸实验组和对照组各注射10只小鼠，之后观察实验组与对照组在不同行为学实验中的差异。小鼠的行为学检测模型为：考察日常代谢能力的摄食量，考察Locomotionactivity(移动)的旷场行为，考察疼痛阈值的甩尾试验和考察记忆能力的步下法实验。结果注射No.1基因的反义核酸后，两品系的实验组均在测试记忆力的步下法(Step-downTest)试验中表现出记忆力减弱，且与对照组差异明显，说明No.1基因的功能确与记忆相关。注射No.2基因的反义核酸后，在测试移动能力的旷场行为(OpenFieldBehavior)试验中，BALB/c实验组跨格、直立行为均比对照组明显减少，说明受此反义核酸影响显著，而C57BL/6实验组则与对照组无大的差异。此外，在生理盐水对照组和随机序列核酸对照组的实验中以及其他行为学模型的实验中，两品系也存在着一定的差异。结论用遗传背景不同的多品系进行相关实验，可进一步建立新基因功能初筛中有显著结果的基因的复筛平台；同时，实验结果对于进一步研究什么样的品系适用于什么样的实验将具有较大的意义。

简介：摘要目的探究微小RNA-122(miR-122)抑制乙型肝炎病毒(HBV)感染相关肝细胞癌生长的分子机制。方法检测肝癌细胞HepG2、HepG2.2.15及肝细胞LO2中miR-122及N-myc下游调节基因3(NDRG3)的mRNA及蛋白表达。将HepG2.2.15细胞分为转染miR-122组(转染miR-122模拟物)、转染对照组(转染miR-122模拟物的对照物)和不作处理的对照组，检测各组细胞的miR-122、NDRG3 、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、乙型肝炎e抗原(HBeAg)表达变化，比较各组细胞的迁移、侵袭和增殖能力。结果转染miR-122组的miR-122表达量为(2.32±0.05)，高于对照组的(0.48±0.09)，转染miR-122组NDRG3的mRNA及蛋白表达量分别为(0.45±0.15)、(0.43±0.08)，均小于对照组的(1.53±0.14)、(1.68±0.25)，差异均有统计学意义(均P<0.05)。转染miR-122组HBsAg、HBeAg及HBV-DNA表达量分别为(1.05±0.05)IU/ml、(0.69±0.09)NCU/ml、(0.45±0.07)Ig/ml，均小于对照组的(1.51±0.11)IU/ml、(1.32±0.15)NCU/ml、(1.00±0.12)Ig/ml，差异均有统计学意义(P<0.05)。转染miR-122组细胞迁移率(33.48±4.12)%、侵袭率(44.11±5.96)%均小于对照组的(91.22±11.45)%、(96.76±12.58)%，转染后48和72 h的细胞增殖率也降低，差异均有统计学意义(均P<0.05)。转染对照组与对照组的各指标比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论miR-122可能通过下调NDRG3表达而抑制HBV复制及抗原表达，进而阻断HBV感染的肝细胞癌的细胞增殖、侵袭及迁移。

简介：摘要目的探讨脑梗死阿司匹林抵抗（AR）患者C3435T基因多态性的变化。方法收集2018年10月至2019年10月收治的脑梗死患者180例，所有患者均接受至少1周的阿司匹林治疗（用药规律），按照血栓弹力图（TEG）检查结果对阿司匹林敏感性进行评估，并分成敏感组、抵抗组，其中花生四烯酸（AA）抑制率低于50%纳入抵抗组，AA抑制率超过50%（包含50%）纳入敏感组。经聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术（PCR-RFLP）与直接测序法分析患者C3435T基因频率以及等位基因频率分布情况。经logistic回归模型对脑梗死患者阿司匹林抵抗危险因素进行分析。结果在180例患者中，阿司匹林抵抗者41例（22.78%），阿司匹林敏感者139例（77.22%）。抵抗组C3435T基因CC型占比为19.51%，显著低于敏感组的34.53%；抵抗组TT型占比为39.02%，显著高于敏感组的17.99%，两组比较差异均有统计学意义（均P<0.05）。抵抗组C等位基因频率占比为39.02%，显著低于敏感组的58.27%；抵抗组T等位基因频率占比为60.98%，显著高于敏感组的41.73%，两组比较差异均有统计学意义（均P<0.05）。logistic多因素分析显示，体质量指数≥24 kg/m2、高血糖、C3435T基因的TT分型、C3435T的T等位基因频率均是患者阿司匹林抵抗的危险因素（均P<0.05），而C3435T基因的CC分型是预防阿司匹林抵抗的保护性因素（P<0.05）。结论脑梗死AR者的C3435T基因TT分型较敏感者明显增多，其等位基因频率以T等位基因频率为主，且C3435T基因的TT分型、T等位基因频率与患者AR发生密切相关，而CC分型能降低抵抗率。

简介：摘要目的研究C-反应蛋白（CRP）基因rs3093059多态性与脑梗死的相关性。方法采用酶联免疫吸附法测定CRP水平；用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术检测CRP基因rs3093059多态性。结果病例组CRP水平高于对照组；各基因型之间的CRP水平无明显差异。结论CRP基因rs3093059多态性与脑梗死无关。

简介：摘要目的对1例颅锁骨发育不全症(cleidocranial dysplasia，CCD)患儿进行基因变异分析，明确其可能的致病原因。方法应用二代靶向测序与Sanger测序进行基因变异分析。结果基因测序结果显示患儿RUNX2基因存在c.196C>T(p.Glu66*)无义变异，根据美国医学遗传学与基因组学学会遗传变异分类标准与指南，判定为致病性变异(PVS1+PS2)。结论RUNX2基因c.196C>T可能为患儿的致病原因，新变异的检出丰富了RUNX2基因变异谱。

简介：摘要目的探讨1例结节性硬化症(tuberous sclerosis complex, TSC)患者可能的遗传学病因。方法应用高通量测序技术、多重连接探针扩增技术和Sanger测序技术对1例疑似结节性硬化症患者行基因变异分析，并在家系其他成员及100名正常对照中进行验证；通过反转录-PCR及Sanger测序技术确定该变异可能导致的mRNA转录变化。结果测序结果显示该家系中先证者发生了TSC2基因的c.2355+1G>C杂合变异，cDNA的序列分析表明该变异导致TSC2基因在第21外显子3′端插入62个碱基序列，这种剪切位点变化导致蛋白翻译提前终止，预测产生截短蛋白。结论TSC2基因c.2355+1G>C变异可能是该患者的致病原因。本研究结果不仅进一步丰富了TSC2基因的变异谱，同时为产前诊断和胚胎植入前遗传学检测的开展提供了理论基础。

简介：目的：查明CYP2C9、CYV2C8等抗糖尿病药物主要代谢酶的基因多态性在中国2型糖尿病（T2DM）A-群中的分布频率和分布特征。方法：运用多聚酶链反应．限制性长度多态性（PCR．RFLP）方法和变性高效液相色谱法（DHPLC）对222名中国T2DM患者进行了有功能意义的CYP2C8＊3、CYP2C8P404A和CYP2C9＊3，以及可能存在功能意义的CYP2C8IVs2（-5insertt）突变体等等位基因型检测，并计算了各等位基因的频率。结果：222名中国T2DM患者的CYP2C8基因中未检出CYP2C8＊3、P404A型，CYP2C8IVS2（-5insertt）和CYP2C9＊3等位基因的频率分别为43．0％、2．48％，二者突变等位基因在男、女性别分布中不存在差异（P〉0．05），同时为CYP2C8IVS2（-5insertt）和CYP2C9＊1＊3基因的频率为6．3％，该联合突变基因型的分布也不存在性别差异（P〉0．05）。结论：中国T2DM患者中CYP2C9＊3的等位基因频率为2．48％；未检出CYP2C8。3和P404A型，CYP2C81VS2（-5insertt）突变体发生频率为43．0％，其是否影响CYV2C8的代谢活力有待于进-步研究。

简介：目的：对1例ABO正反定型不一致患者的血标本进行鉴定,并探索其潜在的分子机制。方法：血清学标准方法鉴定ABO血型,并进行血浆总体A糖基转移酶（glucanotransferase,GTA）活性测定。对ABO基因7个外显子及其侧翼序列行PCR扩增、直接测序或克隆后测序分析。结果：本例血清学鉴定为AxB亚型;血浆总体GTA活性明显下降（效价为±）;ABO基因外显子1的第2位核苷酸存在T〉C错义突变。结论：ABO基因c.2T〉C突变导致翻译起始位点被跨膜结构域或茎区域中的Met替代,从而形成N端截短的GTA的表达,进而引起此例患者AxB表型。

简介：目的：比较抗失巢凋亡及正常贴壁生长肺腺癌A549细胞基因组表达差异,从中筛选肺癌抗失巢凋亡相关基因,并探讨C8orf4基因的高表达及其对失巢凋亡的正性调剂作用意义。方法：建立抗失巢凋亡肺癌A549细胞系;用基因芯片技术检测其与正常贴壁生长A549细胞的差异基因,利用NCBIPubmed数据库筛选出肺癌细胞抗失巢凋亡相关的基因,找出差异表达倍数最大的基因,运用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术及蛋白质印迹技术测定其表达。结果：共检测到表达差异的基因745个,筛选出63个与肺癌细胞抗失巢凋亡相关的基因,C8orf4基因差异表达倍数最大,在脱落培养A549细胞中C8orF4基因及其编码蛋白表达明显高于贴壁培养A549细胞,P〈0.02。结论：基因芯片技术为筛选肺癌抗失巢凋亡相关基因提供了有效方法,C8ORF4基因可能参与调控肺癌细胞抗失巢凋亡过程。

简介：无

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简介：目的研究CUTA基因对人胰腺癌CaPanC-2细胞和小鼠胰腺癌PanC-02细胞主要组织相容性复合物（MHC）Ⅱ类分子表达的影响。方法将携带CIITA基因的腺病毒（Ad-CⅡTA）分别感染人胰腺癌CaPanC-2细胞和小鼠胰腺癌PanC-02细胞，培养24、48、72h。实时PCR法检测感染细胞C11TAmRNA的表达，蛋白质印迹法检测CIITA蛋白表达，流式细胞仪检测MHCⅡ类分子阳性表达细胞百分比。结果CaPanC-2细胞感染后24、48、72h的CⅡTAmRNA表达量分别为对照组的（16769±6455）、（261568±348850）和（834816-4-97783）倍（P〈0．05）；PanC-02细胞为对照组的（548546±87755）、（1242684±624888）和（1401647±726145）倍（P〈0．05）。CaPanC-2和PanC-02细胞均不表达CⅡTA蛋白，感染后48h，CaPanC-2、PanC-02细胞CⅡTA蛋白表达量为0．746±0．499和0．631-4-0．244。感染24、48、72h组CaPanC-2细胞表达MHCⅡ类分子的细胞百分比分别为（8．1±0．3）％、（18．9±0．3）％、（78．5±0．9）％，显著高于对照组的（7．0±0．1）％（P〈0．01）；PanC-02细胞表达MHCII类分子的细胞百分比分别为（5．1±0．2）％、（37．34-2．0）％、（68．8±2．2）％，显著高于对照组的（2．2±0．2）％（P〈0．01）。结论Ad-CⅡTA体外感染胰腺肿瘤细胞可促进cⅡTA基因的表达，从而促进细胞表面MHCⅡ类分子的表达。

简介：目的探讨以最近发展起来的核转染技术直接将编码绿色荧光蛋白DNA质粒转染到兔原代骨髓基质细胞的细胞核内进行基因修饰的可行性。方法从兔股骨抽取骨髓，密度梯度离心法获取原代骨髓基质细胞。以Nucleolector^TM技术转染pEGFP-C2（EGFP组），以同期培养未转染的细胞作为对照组。测定细胞的活力、贴壁率、生长曲线以及转染的效率。结果在转染后24h成功发现EGFP的表达。两组细胞具有相似的形态学变化、贴壁率以及生长曲线。EGFP的表达逐渐增强，至第6天达到最高峰（47．8％），观察一个月未发现表达减弱。结论pEGFP-C2基因核转染对兔原代骨髓基质细胞的体外增殖无明显影响；EGFP可以作为兔骨髓基质细胞有效的基因表达标记；Nucleofector^TM技术是一种简易而高效的转染兔原代骨髓基质细胞的方法。

简介：目的了解甲基叔丁基醚（MIBE）对中枢神经系统的作用部位，为进一步探讨MTBE对中枢神经系统的急性毒作用机制。方法雄性SD大鼠腹腔注射MIBE（0．075mL／50g）染毒1h后，应用免疫组织化学、显微图像分析技术检测Fos蛋白阳性神经元在中枢神经系统内的分布。结果7MTBE染毒组大鼠大脑皮质、下丘脑、小脑皮质均有Fos阳性神经元核团表达。结论MTBE对中枢神经系统具有明确的毒作用位点。

简介：摘要目的探讨IκB激酶(IKK)/核因子-κB(NF-κB)信号通路对Myc过表达诱导的小鼠原发性肝癌发生发展的影响。方法利用转基因小鼠将LAP-tTA小鼠与Alb-cre小鼠杂交，再与NEMOf1(NEMO为NF-κB必需调节蛋白)小鼠杂交，以产生LAP-tTA＋/Alb-cre＋/NEMOfl/wt小鼠，最后与tetO-Myc＋小鼠杂交。本实验包括4组：(1)WT小鼠；(2)NEMOΔLPC小鼠(肝细胞中NEMO敲除，无Myc过表达)；(3)MycLAP-tTA小鼠(Myc过表达，无NEMO敲除)；(4)MycLAP-tTA/NEMOΔLPC小鼠(肝脏Myc过表达和NEMO敲除)。记录小鼠的生存曲线，观察肝脏大体形态。苏木精-伊红(HE)染色观察肝组织病理结构，免疫组织化学染色、蛋白质印迹法(Western blot)检测肝脏肿瘤指标及肝祖细胞指标、定量聚合酶链反应(qPCR)方法检测相关蛋白的mRNA水平。使用t检验比较独立样本组与相应组。结果小鼠带瘤生存曲线显示MycLAP-tTA/NEMOΔLPC小鼠中位生存期明显短于MycLAP-tTA小鼠(中位生存期M/P50 56 d比83 d，P<0.01)；MycLAP-tTA/NEMOΔLPC小鼠对比MycLAP-tTA小鼠，谷草转氨酶[(739.40±35.61) U/L比(441.50±78.79) U/L，t＝2.464，P<0.05]、碱性磷酸酶[(3 142.0±287.6) U/L比(1 702.0±278.8) U/L，t＝3.129，P<0.01]、γ-谷氨酰基转移酶[(101.70±12.82) U/L比(37.31±9.34) U/L，t＝3.927，P<0.01]和总胆红素[(1.281±0.232) mg/dl比(0.618±0.051) mg/dl，t＝3.889，P<0.01]均显著升高，且差异有统计学意义；Western blot检测显示细胞角蛋白19(CK19)、性别决定区Y框蛋白9(SOX9)水平在MycLAP-tTA/NEMOΔLPC较MycLAP-tTA组小鼠肝脏亦明显升高；肝祖细胞标志物如角蛋白(CK19，4.336±1.970比0.680±0.234，t＝1.843，P<0.01)、CK7(3.884±0.338比2.370±0.525，t＝2.422，P<0.01)、甲胎蛋白(AFP，3 614.0±2 070.0比1 399.0±319.9，t＝1.057，P<0.01)、上皮细胞黏附分子(EpCAM)的mRNA水平在MycLAP-tTA/NEMOΔLPC较MycLAP-tTA组小鼠肝脏显著增高(7.900±0.997比3.084±0.711，t＝3.943，P<0.01)。结论肝细胞中特异性敲除NEMO从而抑制经典的IKK/NF-κB信号通路，可促进肝肿瘤的发生发展，并诱导混合型肝细胞癌-胆管细胞癌的发生。白细胞介素(IL)-6/信号转导与转录激活因子-3(STAT3)通路与细胞外信号调节激酶(ERK)/丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路可能参与混合型肝癌的发生发展。

简介：目的探讨多药耐药基因（MDR）IC3435T基因多态性对胃溃疡患者抗幽门螺杆菌（rio）治疗的影响。方法共采集Hp阳性的胃溃疡患者106例，按抽签法随机分成EAC组（埃索美拉唑20meg次、克拉霉素0．5eg次、阿莫西林1．0g/次，均2次，d）和0AC组（奥美拉唑20mg/g次、克拉霉素0．5g，次、阿莫西林1．0g/次，均2次／a），每组53例，进行为期1周的抗Hp治疗，治疗结束至少4周检测Hp；采用聚合酶链反应．限制性内切酶技术检测两组MDR1基因多态性，记录并分析MDR1C3435T基因多态性对抗Hp治疗的影响。结果EAC组Hp根除率为84．9％（45／53），与OAC组的77．4％（41／53）比较差异无统计学意义（P〉0．05），两组MDR1C3435T不同基因型间Hp根除率比较差异亦无统计学意义（P〉0．05）。携带TT型基因Hp根除率为66．7％（16／24），携带CT型基因为86．3％（44／51），携带CC型基因为83．9％（26，31），携带，TT型基因Hp根除率最低，差异有统计学意义（P〈0．05）。两组携带TT型基因患者Hp根除率均低于其他两种基因型，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论MDR1C3435T基因多态性与胃溃疡患者Hp根除疗效有关，携带TT型基因患者Hp根除率低。

简介：摘要目的探讨N-myc下游调节基因2(N-myc downstream regulated gene 2，NDRG2)在癫痫小鼠海马中的表达及其对小鼠脑星形胶质细胞谷氨酸和葡萄糖摄取的影响。方法采用氯化锂-匹鲁卡品诱导法建立癫痫小鼠模型，在造模后1 d、7 d、15 d、6周处死小鼠取取海马区脑组织，Western blot检测NDRG2蛋白表达变化。原代培养野生型、NDRG2＋/＋和NDRG2-/-小鼠的星形胶质细胞并进行基因型鉴定。使用谷氨酸含量测定试剂盒及紫外分光光度计检测星形胶质细胞培养上清液中谷氨酸含量。流式细胞术检测2-NBDG荧光标记星形胶质细胞的阳性率。结果(1)与对照组(0.25±0.07)比较，小鼠海马区NDRG2表达量在癫痫急性期1 d(0.45±0.06，t＝－3.84，P<0.05)、7 d(0.54±0.09，t＝－4.30，P<0.05)、15 d(1.04±0.06，t＝－15.08，P<0.01)均有明显增加，癫痫慢性期6周(1.30±0.16，t＝－10.40，P<0.01)依然保持明显的高表达。(2)检测原代细胞培养上清液剩余的谷氨酸含量，发现NDRG2-/-组星形胶质细胞对谷氨酸的摄取相对于NDRG2＋/＋组明显减少[(689.03±101.78)μmol/L，(113.67±37.35)μmol/L；t＝9.19，P<0.01]。(3)Western blot分析NDRG2-/-组原代星形胶质细胞中EAAT1蛋白的表达显著低于NDRG2＋/＋组[(0.34±0.03)，(1.16±0.21)]，差异有统计学意义(t＝－6.59，P<0.01)。(4)流式细胞术检测发现，NDRG2-/-组细胞的阳性率明显低于NDRG2＋/＋组细胞阳性率[(17.60±5.72)%，(72.22±8.35)%]，差异有统计学意义(t＝－13.22，P<0.01)。结论NDGR2与癫痫疾病的发生发展密切相关。NDRG2的表达有利于EAAT1发挥其生理功能，促进星形胶质细胞对谷氨酸和葡萄糖的摄取，可能是一种潜在细胞保护因子，促进神经保护和修复。

简介：