简介：κ-银环蛇毒素(κ-bungarotoxin，κ-BGT)属于突触后神经毒素，能选择性的识别α3β2亚型的神经元烟碱乙酰胆碱受体，可作为药理学研究的工具药。由于κ—BGT分离提取比较困难，难于从自然界中大量获取，无法满足各项研究的需要，所以本文探讨在大肠杆菌和毕赤酵母表达体系中表达κ—BGT及其在实验室规模生产的可行性。

简介：应用DNA重组技术，构建了金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)的原核表达载体pET22b(+)-SEB，在大肠杆菌BL21(DE3)中进行表达。经终浓度为0．4mmol／LIPTG的诱导作用，可获得分子量约为29KD的表达蛋白。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析结果表明，重组表达的SEB主要以可溶的形式存在于细胞周质中，表达SEB的量约占菌体总蛋白的30％左右。重组表达的SEB经HiTrap^TMchelatingHP柱纯化能达到SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳纯。ELISA试验表明纯化的重组SEB与抗天然野生型SEB单克隆抗体呈现明显的阳性免疫反应。

简介：真核细胞表达载体在生物技术的许多领域都具有很好的应用前景，尤其在防化研究中的应用受到了各国军界的重视。对目前国内外真核表达载体的构建策略、IRES序列的应用及存在的问题进行了评述，并对其发展趋势进行了探讨。

简介：为满足科研和医学应用上的需要，用基因工程的方法制备海蛇神经毒素。首先人工合成海蛇神经毒素Erabutoxin（Eb）的基因，重组到T载体。通过PCR扩增Eb基因，用限制性内切酶把基因片段酶切成黏性末端，然后将目标基因插入表达载体pPET22b（＋），电转重组质粒到宿主菌BL21（DE3），在25℃0．5mmol／LIPTG诱导培养8h收获培养物，SDS-PAGE电泳检测目标蛋白大部分存在于包涵体中，用8mol／L尿素溶解后，利用C末端的His-6与Ni^2＋离子亲和层析纯化，得到单一的电泳蛋白带。