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  • 简介:摘要目的血管内皮细胞生长因子在血管再生和骨组织再生过程中起着重要的调节作用。观察hVEGF-165基因转染的兔骨髓间充质干细胞分泌VEGF的功能及转染后细胞的骨活性。方法(1)体外分离、培养兔骨髓间充质干细胞,纯化并鉴定兔骨髓间充质干细胞;免疫荧光法检测细胞表面标志;传代培养后以1μgPcDNA3.1-hVEGF165∶3μL阳离子脂质体Lipofectamine的比例转染,通过ELISA和Western-blot检测转染后细胞中外源性VEGF的表达。(2)测定在正常条件培养和骨条件培养下,转染后细胞上清中碱性磷酸酶、骨钙素的水平。结果(1)hVEGF165基因转染的骨髓间充质干细胞能成功分泌VEGF蛋白。(2)骨条件培养下,基因转染组细胞碱性磷酸酶和骨钙素的分泌量明显高于未转染组(P<005);而在正常条件培养下,基因转染组细胞碱性磷酸酶和骨钙素的表达分泌量较低。结论(1)采用基因转染技术可将hVEGF165基因转染到骨髓间充质干细胞中并可有效表达具有生物活性的VEGF。(2)在骨条件培养下,转染hVEGF165基因后骨髓间充质干细胞的骨能力增强。

  • 标签: 骨髓间充质干细胞 血管内皮细胞生长因子 基因转染 成骨
  • 简介:摘要目的制备兔脱矿骨-胶原蛋白-四环素复合材料,并研究其体外释放规律。方法将四环素和胶原蛋白包被于兔脱矿骨颗粒上,制备兔脱矿骨-胶原蛋白-四环素复合材料。采用紫外分光光度法,以水为溶质,每24小时计算累积释放的四环素量。结果对于载低、中剂量的四环素复合材料,随着时间的延长,四环素的释放是个由快到慢,四环素的累积释放量与时间的平方根线性关系,符合Higuchi方程。对于载高剂量四环素复合材料,四环素的前期释放速率明显快于其他两个释放体系。结论本课题制备的兔脱矿骨-胶原蛋白-四环素复合材料表现出良好的四环素缓释性能。

  • 标签: 兔脱矿骨 胶原蛋白 四环素 药物释放