药物分析中的显色反应

作者：马卫兴 许瑞波 孙吉佑

【摘要】 　　显色反应在药物分析中常用于药物的鉴别、检查和含量测定，文章着重讨论药物定量分析中的显色反应类型，特别是用于含量测定的显色反应类型——配位显色反应、氧化还原显色反应、离子缔合显色反应、重氮化-偶合显色反应、亚硝化显色反应、缩合显色反应、碱处理显色反应、脱水显色反应、电荷转移显色反应和超分子显色反应等。

【关键词】 药物分析 显色反应 讨论

　　Abstract：Color reactions are often used in the identification, check and content determination for drugs. The types of color reactions in pharmaceutical analysis were discussed in this paper such as complex color reaction, redox color reaction, ion combination color reaction, diazotization-coupling color reaction, nitrification color reaction, condensation color reaction, dewater color reaction, charge-transfer color reaction and supermolecule color reaction.

　　Key words：Pharmaceutical analysis; Color reaction; Discuss

　　所谓显色反应是指在被测药物体系中加入某种试剂而呈现颜色的反应，也叫呈色反应。显色反应在药物分析中常用于药物的鉴别、检查和含量测定。目前在药物分析中的显色反应有配位显色反应、氧化还原显色反应、离子缔合显色反应、电荷转移显色反应、重氮化-偶合显色反应、亚硝化显色反应、缩合显色反应和超分子显色反应等，但是至今未有人加以总结讨论，本文就这些显色反应类型分别加以讨论，以供同行们参考。

　　1 配位显色反应

　　配位显色反应是最为常见的一种显色反应。利用有机药物分子中含有的配位基团与金属离子或药物中含有的金属离子与含配位基团的化学试剂形成有色配合物的显色反应叫配位显色反应（后者是普遍现象，这里不再举例）。例如江虹等［1］在pH为7.0～8.0的弱碱性溶液中，利用 Th（Ⅳ）与四环素（TC）、强力霉素（DOTC）、土霉素（OTC）和金霉素（CTC）结合形成1∶2的浅黄色配合物，建立了用于市售四环素和土霉素药物含量测定的新方法。李胜等［2］在0.8～1.4 mol/L盐酸介质中，利用氟罗沙星与Fe(Ⅲ)在室温下形成组成比为2∶1的在402 nm处有最大吸收的稳定配合物，线性范围为2～48 μg/ml，建立了片剂和胶囊中氟罗沙星的测定方法，相对标准偏差小于2.8％。吩噻嗪类药物在pH 2时可与钯离子形成红色配合物，这就是测定吩噻嗪类药物的钯离子比色法［3］。

　　2 氧化还原显色反应

　　氧化还原显色反应是利用氧化性物质氧化还原性物质产生有色物质的显色反应。如在pH 2.5氯乙酸－氯乙酸钠缓冲液中，在加热条件下，偏钒酸铵迅速氧化异丙嗪，得到一种在520 nm处有最大吸收的樱红色产物，可用分光光度法测定制剂中的异丙嗪含量［4］。又如皮质激素类药物将氯化三苯四氮唑还原为在485 nm处有最大吸收的红色三苯甲臢染料，可用于皮质激素类药物（如氢化可的松）的定量测定［2］。

　　3 离子缔合显色反应

　　离子缔合显色反应是利用带电荷的有机药物分子与带相反电荷的染料分子按计量比靠静电结合形成有色离子缔合物。如在pH 3.5～4.0的缓冲介质中，西地那非与乙基曙红反应形成离子缔合物，使乙基曙红溶液颜色发生明显改变，离子缔合物的最大吸收波长在550 nm，比乙基曙红红移了30 nm，建立了万艾可中西地那非含量测定的新方法［5］。

　　4 重氮化-偶合显色反应

　　重氮化-偶合显色反应利用芳伯氨基的重氮化反应再与偶联组分形成有色偶氮化合物的显色反应。例如田孟魁等［6］利用磺胺类药物的重氮化反应再与α-萘酚偶联形成有色偶氮化合物测定了磺胺类药物的含量。利用对氨基苯磺酸重氮化溶液与胆红素偶联形成红色偶氮胆红素，建立了分光光度测定珍黄液中胆红素含量的新方法［7］。

　　5 亚硝化显色反应

　　亚硝化显色反应是含酚羟基或仲胺基的有机药物分子与亚硝酸根反应产生有色亚硝化产物的显色反应。例如孟召晖［8］利用肾上腺素与亚硝酸钠在中性介质中发生反应，在pH 4.74的醋酸－醋酸钠缓冲溶液中，其亚硝化产物具有稳定的特征吸收峰，其最大吸收波长为477 nm，测定的表观摩尔吸光系数为1.67×104 L·mol-1·cm-1。利血平是仲胺类生物碱，能在稀硫酸介质中与亚硝酸钠发生亚硝化反应，产生在390 nm处有最大吸收的黄色亚硝基利血平，可用于利血平原料药的分析［9］。　6 缩合显色反应

　　 缩合显色反应是指利用药物分子中的伯氨基与芳香羰基化合物（如芳醛、芳酮）形成有色席夫碱或利用药物分子中的羰基与含肼基的化学试剂形成有色腙类的显色反应。基于庆大霉素与３，５－二溴水杨醛缩合形成黄色席夫碱的反应建立了庆大霉素光度测定新方法［10］，测定的表现摩尔吸光系数ε430达9.98×104L·mol-1·cm-1；利用茚三酮在酸性介质中与阿米卡星发生缩合显色反应可建立阿米卡星含量的测定方法［11］；根据地塞米松磷酸钠具有△4-3-酮甾体结构，与异烟肼发生缩合反应显黄色，在404 nm处有吸收峰，建立了异烟肼比色测定麻地喷雾剂中地塞米松磷酸钠含量的方法［12］。

　　7 碱处理显色反应

　　碱处理显色反应是利用碱性溶液处理有机药物分子使其形成有色钠盐的显色反应。如大黄素与NaOH反应产生在530 nm处有最大吸收的红色大黄素钠盐，用Tween-80-(NH4)2SO4液固萃取体系萃取分离大黄中大黄素，用碱溶液处理所得大黄素，测定了中药大黄中的大黄素［13］。

　　8 脱水显色反应

　　有机药物分子通过脱水产生有色物质的显色反应叫脱水显色反应。如雌激素在硫酸-乙醇介质中发生脱水反应，进而重排形成有色物质，这就是典型的Kober反应比色法［2］。

　　9 电荷转移显色反应

　　电荷转移络合物也叫电子给予体-接受体络合物［14］，电荷转移显色反应是指一类由富有电子有机药物分子(电子给予体)和缺少电子分子(电子接受体) 两种分子形成有色电荷转移络合物的反应。电子给予体通常是含有孤电子氮原子的有机药物分子，电子接受体通常是缺少电子分子,如红霉素与结晶紫形成了电荷转移有色络合物［15］，其最大吸收波长在593 nm处，建立了测定制剂中的红霉素测定方法。

　　10 超分子显色反应

　　超分子显色反应是利用生物大分子与染料通过分子间作用力、静电引力及氢键等形成超分子而显色的反应。例如蛋白质在酸性条件下与虎红发生超分子显色反应，可以建立蛋白质的定量分析方法［16］。

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