作者:武秀萍,李 冰,牛云萍,葛学军,王锦荣,张并生
【摘要】 目的 研究食醋对乳牙牙釉质的脱矿作用。方法 采用微量化学分析法检测食醋处理乳牙牙釉质后食醋中钙含量的变化。采用维氏显微硬度仪测定经食醋涂擦后乳牙牙釉质表面显微硬度的变化。结果 食醋能导致乳牙牙釉质钙溶出和表面显微硬度下降,随时间延长钙溶出减少,表面显微硬度降低的程度减弱。结论 食醋对乳牙牙釉质具有脱矿作用并可使釉质表面显微硬度降低
【关键词】 醋;牙釉质;表面显微硬度(SMH)
【Abstract】 Objective To research the deciduous enamel demineralization caused by vinegar.Methods The calcium of the vinegar were analyzed by UV spectrophotometry, and then the deciduous enamel was immersed in vinegar. And the calcium in the vinegar were analyzed by EL 312e microplate. The enamel surface microhardness was measured by a microhardness tester.Results The vinegar had demineralizing effect on deciduous enamel and decreased the surface microhardness of deciduous enamel. Conclusion The vinegar may have erosive effect on deciduous enamel.
【Key words】 vinegar;enamel;surface microhardness
食醋作为日常生活中的调味品,为人们所接受所喜爱。最近研究表明食醋中的发酵糖可扩散到牙菌斑,经微生物发酵产酸引起牙釉质脱矿。本实验的目的是通过食醋处理乳牙牙釉质,对食醋中钙含量以及牙釉质表面显微硬度的测定,以进一步改善食醋的成分和提醒消费者注意食用食醋后的口腔卫生。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 牙齿 采用新鲜拔除的滞留乳牙40颗,挑选无龋,无裂纹,无白斑者。截根去髓,将冠部牙片置于0.2%的苯扎溴胺生理盐水溶液中,4℃保存备用。
1.1.2 食醋 选用太原市超市内售的山西老陈醋。
1.1.3 人工唾液 配方采用ISO/TR/0271:1993标准。
1.2 方法
1.2.1 食醋导致乳牙牙釉质钙含量变化的测定
1.2.1.1 食醋中钙浓度的测定 取食醋0.1ml加入0.2ml的钙反应液,用紫外-可见分光光度计在612nm处测定钙的吸光度值,根据标准溶液的浓度换算成食醋中钙的浓度。
1.2.1.2 牙釉质样本的制备 将20颗分为2组,每组10颗,于乳牙唇中1/3开窗,直径4mm,经酒精消毒后,取15μl食醋滴加于釉质面,于37℃处理牙釉质,5次/d,5min/次[1],处理在12h内完成,处理间隙置于人工唾液恒温水浴,共7天。设去离子水为对照组。实验期间每天更换一次人工唾液,处理后的食醋收集于0.5ml的Eppendorf管中,于-20℃冻存、备用。
1.2.1.3 食醋处理后钙离子浓度的测定 每10μl加入280μl的Ca离子反应液,震荡混匀后立即于EL312e自动微板读数仪测定Ca离子吸光度值A,同期作标准曲线,将A值换算成Ca离子的浓度(单位mmol/L)。
1.2.2 食醋致釉质表面显微硬度的改变
1.2.2.1 乳牙釉质样本制备 将20颗备用乳牙分为2组,用无氟石英粉驱除釉质表面菌斑及色素,流水冲洗干净后用自凝塑料包埋,釉质表面包露,用金相砂纸将釉质表面打磨成镜面状,置于10ml食醋中浸泡,对照组置于去离子水中,于37℃孵育5min,5次/d,处理在12 h内完成,处理间隙置入37℃人工唾液恒温水浴。分别在处理前和处理的第1、2、3、4、5、6、7天测定釉质的表面显微硬度。
1.2.2.2 显微硬度的测定 利用奥地利产MeF3A型金相显微镜及附件硬度仪,物镜(×40)视野下测出实验前后1~7天的SMH值。用维氏金刚锥压头,加载0.981kg负荷,持续15s,打出菱形压痕,通过光子分析系统测量菱形压痕的垂直向、水平向直径的长度,输入计算机,自动计算出硬度值。每一标本测定3点,取其均值作为该标本的硬度值。
1.3 统计学分析 采用SPSS9.0统计软件的方差分析对实验组与对照组在不同时间内溶出的Ca离子及牙釉质表面显微硬度值进行统计,检验水准为0.05。
2 结果
实验所用食醋中Ca2+浓度为3.06mmol/L。
食醋对乳牙牙釉质有脱矿作用,随时间延长,钙溶出浓度减低。见表1。表1 食醋处理牙釉质,不同时间点钙溶出浓度的影响 (mmol/L,x±s,n=20)
食醋实验组处理前与对照组其SMH差异无显著性(P>0.05),处理后1~7天均差异有显著性(P<0.05),食醋能导致乳牙牙釉质显微硬度降低,且随处理时间的延长,乳牙显微硬度值逐渐降低。见表2。
表2 牙釉质浸泡于食醋中不同时间牙釉质表面显微硬度的改变 (mmol/L,x±s,n=20)
3 讨论
目前国内外对可口可乐等饮料脱矿能力的研究已在体内外的实验中进行,然而对于人们日常生活中常食用的食醋对乳牙牙釉质脱矿的研究国内外尚无报道。Maupome等[1]的研究结果表明实验条件越接近现实生活对鉴定饮料的实际作用会更有利。本实验选用食醋是从山西省太原市超市随机选购的,通过食醋处理牙釉质前后,食醋中Ca2+浓度的变化及釉质SMH变化,来探讨食醋对乳牙牙釉质脱矿的作用。结果显示,食醋对乳牙牙釉质具脱矿作用,导致釉质Ca2+溶出以及牙釉质表面SMH降低。
食醋呈酸性,各种醋pH值较低,在2.87~3.34之间,都处于临界pH之下,而乳牙釉质本身矿化程度就较低,当食醋接触牙釉质表面时,其中的酸作用于釉质,使釉质中的羟基磷灰石晶体发生溶解,导致无机盖的溶出。
牙釉质硬度主要取决于无机物晶体,显微硬度的降低与矿物质的量减少有关。Featherstone等[2]的研究表明矿物质含量的减少与硬度变化之间存在线性关系。本研究将牙釉质浸泡于食醋中,分别在1~7天检测牙釉质SMH的变化,反映牙釉质矿物质的丢失。Maupome[3,4]的设计是将牙釉质块浸泡于10ml饮料中1~7天,不更换饮料。本实验为了与生活真实情况更加符合,每次用新鲜食醋处理,且处理间隙置于人工唾液中,结果显示,食醋能导致牙釉质SMH的降低,前3天降低明显,而3天以后处于相对稳定状态。
当然整个实验都在体外进行,与真实口腔毕竟有差异,所以食醋导致牙釉质脱矿可能还受其他因素影响,例如宿主唾液分泌流量及易感程度等。但本研究至少可以提醒消费者对牙釉质的损伤,合理饮用食醋。同时也可以通过食醋中增加F 制剂来保护牙齿,这仍有待进一步研究。
【参考文献】
1 Maupome Carrantes G, Sanchez Reyes V, Laguna Ortega S, et al. Soft drink consumption patterns in a Mexico population.Salud Publica Mex,1995,37(4):323.
2 Featherstone JD, Ten Cate JM, Shariati M, et al. Comparison of artificial caries-like lesions by quantitative microradio graphy and micro-hardness profiles. Caries Res,1983,17(5):385.
3 Maupome G,Diez de Bonila J,Torres Villasenor G, et al.In vitro quantitative assessment of enamel microhardness after exposure to eroding immersion in a cola drink.Caries Res,1998,32(2):148.
4 Maupome G, Aguilar Avila M,Medrano Ugalde H,et al. In vitro quantitative microhardness assessment of enamel with early salivary pellicles after exposure to an eroding cola drink. Caries Res,1999,33(2):140.