斑蝥素提取研究进展

斑蝥素提取研究进展 ;

吴亚男 邓秀玲 王海生 马世琦 王煌东

内蒙古医科大学 010110

[摘要]斑蝥，是鞘翅目芫菁科（Meloidae）昆虫的干燥虫体，性寒味辛，其有效成分为斑蝥素（Cantharidin, CA），一种天然防御性毒素，广泛存在于1500多种斑蝥体内，具有抗肿瘤、病毒、升高白细胞，增强免疫等功能。本文对斑蝥素的分布、性质及提取方法的研究概况做一综述，以期为相关研究提供一定的依据。

[关键词]斑蝥；斑蝥素；提取

基金项目：内蒙古自治区科技创新引导项目（KCBJ201802）

第一作者：吴亚男，内蒙古医科大学基础医学院17级研究生

第二作者：邓秀玲，内蒙古医科大学生物化学与分子生物学教研室

第三作者：王海生，内蒙古医科大学生物化学与分子生物学教研室

第四作者：马世琦，内蒙古医科大学基础医学院17级研究生

第五作者：王煌东，内蒙古医科大学药学院

吴亚男E-mail： E-mail:138443344@qq.com

通信作者E-mail：2234789568@qq.com；电话：13664882364

收稿日期：2019-04-04

Advances in the extraction of cantharidin

WU Yanan，DENG Xiuling，WANG Haisheng，MA Shiqi，WANG Huangdong

(Graduate student, grade 17, school of basic medicine, Inner Mongolia medical university，hohhot 010110，Department of immunology, Inner Mongolia medical university，hohhot 010110，Department of immunology, Inner Mongolia medical university，hohhot 010110，Graduate student, grade 17, school of basic medicine, Inner Mongolia medical university， Hohhot 010110，Department of pharmacy， inner Mongolia medical university， Hohhot 010110 )

Abstract：Cantharidin (CA), a natural defensive toxin, is widely present in more than 1500

species of Cantharidin . It has anti-tumor , viral, leukocyte-elevating and

immune-enhancing functions .In this paper, the distribution, properties and extraction methods of cantharidin were reviewed, in order to provide some basis for related

research.

Key Words: cantharides; cantharidin; extract; assaying

1.资源分布：《中国药典》规定药用斑蝥主要有2种 , 即南方大斑蝥（ Mylabris halerata Pallas）和黄黑小斑蝥 （Mylabris cichorii Linaeus）[1]。斑蝥在我国分布比较广泛，南方大斑蝥主要分布于江苏、浙江、湖北、江西、福建、台湾、广东、广西、贵州、云南等地；黄黑小斑蝥主要分布于河北、北京、安徽、江苏、浙江、湖北、福建、台湾、广东、广西、云南等地。斑蝥因其所在地理位置和种类的不同，体内所含斑蝥素的含量亦有较大差异[2]。

2.斑蝥素的性质：斑蝥素，是芫菁科类昆虫在遭受攻击时分泌的一类防御性液体中的一类活性物质。雄虫与雌虫都可产生斑蝥素，且斑蝥素的含量与虫体重量成正比[3]。化学式为（C10H12O4）,是一种倍半萜类衍生物。升华温度120℃， 熔点215~ 216℃，极微溶于冷水，微溶于热水，易溶于丙酮(1g∶40mL)、氯仿(1g∶65mL)、二氯甲烷、乙醚(1g∶560mL)、乙酸乙酯等油脂(1g∶150mL)[4]。斑蝥素在不同的溶剂中表现出不同的晶型，在丙酮中呈白色针状; 在乙醇中呈白色糠片状; 在氯仿中呈白色斜方棱柱形[5]。

3.斑蝥虫体显微的鉴别

3.1 南方大斑蝥：体表刚毛极多，这是大斑蝥的主要特征之一，刚毛细长，呈刺状，长约50-450微米甚至更长，足端的刚毛最长。体表碎块也极多，呈不规则块状，棕色，不透明或微透明。易见到板状肌纤维、气管壁组织、翅碎块及未消化的团块。

3.2 小斑蝥：极多的肌肉纤维，呈块状，边缘不齐，大小不等，这是小斑蝥的主要特征之一。体表碎块较多，形状不规则，成淡棕黄色、棕色或棕褐色。气管壁组织与南方大斑蝥略同。极少见体表刚毛及小刺毛。[6]

4.斑蝥素的提取方法：最早，人们通过用氯仿、乙醇等溶剂直接浸泡虫体，过滤后用多次重结晶或升华的方法得到斑蝥素提取物[7]。杨凤轩等[8]用索氏提取法，对贵州短翅豆芫菁虫体不同部位斑蝥素产率及提取时间进行比较，头部、四肢、翅膀需要12h，胸部需要20h，腹部需要40h，产率最高的是腹部、其次为腹部、最少的为头部、四肢及翅膀，并且自然死亡的虫体比活虫斑蝥素含量高。李俊，苑红燕等人[9]，以斑蝥素含量为标准，通过用HPLC检测方法对水、无水乙醇和丙酮三种溶剂的提取率进行比较，发现丙酮作为溶剂提取率较高，水提加酸可提高提取率，可能是由于斑蝥素在水中的溶解度较低，而酸可改变溶解度的原因，但水提加酸的提取率仍比丙酮提取率低。

4.1有机溶剂提取法：杨清林等[10]通过正交试验的方法比较了斑鳌中斑鳌素的提取工艺，应用丙酮为提取溶剂，得到最佳提取条件为回流提取，即用7倍量的丙酮，浸泡3h，回流提取3次，每次1 h。而高阳等[11]应用指纹图谱分析的方法对振荡静置法、超声波振荡法、及热回流法之间的差异进行比较，结果斑蝥药材的最佳提取工艺为15mL氯仿热回流提取3h。王贤英，杨琼芳，谢香菊[12]，应用丙酮作为溶剂，将热回流、冷浸、超声三种提取方法进行比较。发现超声提取法获取斑蝥素含量最低，热回流提取法获得斑蝥素含量略高于冷浸法，但热回流提取法操作繁琐，并且杂质较多，而冷浸法操作简便易行，杂质少。贺顺娇，杨凤轩，周建威[13]，应用丙酮作为溶剂，将索氏、超声、冷浸三种提取短翅豆芫菁体内斑蝥素的方法进行比较。结果冷浸提取法在溶剂总体积40ml，丙酮体积分数为90%，冷浸时间为3d时，提取斑蝥素的含量最高。

4.2无机溶剂提取法

4.2.1酸提取法：斑蝥内含有的斑蝥素分为游离型和结合型两部分,用《中国药典》2005版斑蝥药材规定的氯仿直接浸提法获得的斑蝥素,是游离斑蝥素,其他不能直接用氯仿提取出来的为结合斑蝥素。实验证明用酸水解方法处理后可以获得芫菁科虫体内的所有斑蝥素[14]。李晓飞等[15]用丙酮氯仿及少量浓盐酸的混合溶液于脂肪提取器上沸腾回流干燥的斑蝥虫体，滤去残渣，减压浓缩溶液，最后用重结晶法制得斑蝥素;后经学者验证与直接提取相比，此法提取的斑蝥素含量增高了4倍[16]。

4.2.2水提取法：彭晓敏等[17]，利用斑蝥素在碱性条件下可水解成可溶性的物质的原理，通过皂化反应去除油脂等杂质，能大量提取出斑蝥素[18]。并以提取率为标准，对碱水浸泡的次数及纯化时所用氨水的量进行了进行了比较，认为在浸泡三次后，碱水与药材比为2.5：1纯化后，提取液的透明度较好，含量较高。王君为，陈凯等[19]，以斑蝥素质量分数为标准，通过向提取液中加酸来改变提取液的PH值，从而使结合型斑蝥素变为游离型斑蝥素，并对水提液的PH值、水提液与氯仿体比以及萃取次数进行了优化，认为在PH为1，水提液与氯仿体积比为1：3，萃取次数为3次最优。

5.结语

斑蝥素有较好的抗肿瘤生长、侵袭、转移能力，而斑螯素抗肿瘤的作用涉及诱导细胞凋亡，干扰细胞周期，提高免疫力，抑制肿瘤细胞的浸润和转移等[20]，并对一些疑难杂症有特殊疗效。斑蝥作为我国中药要用昆虫，人们对其主要药效成分斑蝥素的性质有了一定的了解与认识，由于其具有重要的药物价值，一直被人们利用，并不断探索。随着斑蝥素需求量的增加，如何对斑蝥素进行高效率的提取、纯化，越发被人们所关注，近年来人们正在不断完善提高。我们应该在日常工作中，发散思维，突破框架，不拘泥于现有方法，细心观察寻找突破点。以期发现更高效，更简便的方法。

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