普通级大耳白兔VX2肝癌模型建立后肝功能检测

普通级大耳白兔VX2肝癌模型建立后肝功能检测

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包头市肿瘤医院014030

【摘要】目的：测定普通级日本大耳白兔在统一标准笼养条件下血液肝功能的正常值。方法：选用3月龄普通级日本大耳白兔（体重2.9士0.4kg）120只（雄，雌各半），所有实验兔都于清晨喂养前空腹采血，冷冻检测备用，并用全自动生化分析仪测定其血液肝功能值（总蛋白：TP、白蛋白：ALB、总胆红素：TBIL、直接胆红素：DBIL、谷草转氨酶：AST、谷丙转氨酶：ALT、谷氨酰转肽酶：GGT）。结果：通过本次实验得出普通级日本大耳白兔肝功能正常值范围，为今后临床动物实验提供一定参考价值；在120例肝内肿瘤种植实验兔中肝功能变化除（PT、GGT）有统计学意义外余均无统计学意义。结论：VX2肝癌动物模型建立后对兔肝功能指标TP和GGT有一定的影响。

【关键词】普通级日本大耳白兔；血液肝功能指标；正常值范围

引言

日本大耳白兔是以中国白兔为基础培育而成的皮肉兼优的兔品种，可分3型：大型重5-6kg，中型3-4kg，小型2.0-2.5kg，我国饲养较多的为中型兔。

随着科学的发展，生物学、现代医学等生命科学更是受到无数科研工作者的青睐，从而对实验过程乃至实验动物本身的要求越来越高，一个成功的动物实验、一组诚实可信的实验数据都会受到实验动物质量的影响，影响其精确性和可重复性。自1981年起国内对实验动物血液理化指标的研究层出不穷，而对于不同饲养方法、饲料品种、养殖环境及同一种族不同种系的实验动物而言，肝功能指标亦有出入[1]-[4]。为此，我们对普通级日本大耳白兔肝功能指标范围测定进行了相关实验研究。现汇报如下：

1.实验材料与方法

1.1实验材料

1.1.1实验动物

实验采用3月龄普通级日本大耳白兔120只雌雄各半，体重（2.9士0.4）kg，购置于（北京芳元缘动物养殖场），采用统一标准笼养（专用兔粮：1/2杯/2.5kg/日+无限量饮用水）。

1．1.2检测仪器及试剂

所有生化检测采用7600全自动生化分析仪→日立公司

原装进口生化试剂→购于北京森美希克玛公司

2mlEDTA-K2抗凝管，5ml的分离胶/促凝剂采血管→沧州永康医药用品有限公司

离心沉淀机→姜堰市新康医疗器械有限公司产品

试剂盒→购自北京柏定生物工程有限公司

16排螺旋CT→飞利浦公司

1.2实验方法

1.2.1标本采集及预处理

实验兔禁食12h后由耳缘静脉采血3ml，置于干净的真空采血管中，静置30min，后3000r/min离心15min，吸取上清液于干净的PE管中，-20℃冻存待测。采用CT引导下穿刺法建立兔VX2肝癌模型；待成瘤后一周以上诉方法采血冻存，二次采血同时进行检测。

1.2.2肝功能测定肝功能指标采用7600全自动生化分析仪测定。

1.2.3数据处理将测定结果用统计软件SPSS13.0进行统计，计量资料采用（±S）表示；计数资料t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2.结果

见表1、表2、表3

表1描述统计量

3.讨论

实验动物肝功能指标的测定在动物实验的工作中具有重要意义，在监测实验动物质量的同时，可评价动物健康状况，同时反应动物生长、生产性能，从而为日后动物实验研究提供血液理化正常值参考范围，对实验动物饲养管理和疾病诊疗等均有一定指导意义[5]。由于兔的理化因素、解剖结构与人相近，且易于繁殖、饲养、来源广，兔实验一直被视为临床动物实验研究的重点，但目前尚无兔肝功能检测专用试剂，本实验采用人用试剂检测兔肝功能指标，对实验相关影响因素做到严格把关，包括年龄、性别、生长环境、饮食、体重等等，多方面因素均与肝功能指标有不同的相关性。

本实验通过采集健康普通级日本大耳白兔兔血，及肝内肿瘤生长一周后兔血样本，采血后离心、冰冻待统一检测，检测试剂及试剂盒以人血生化为基础。检测结果与冰冻环境、存放时间、试剂等因素亦有不同程度相关性。通过本实验得出日本大耳白兔正常肝功能界值，部分数值与前人所得数据有些出入[5]，可能与不同的实验环境、仪器设备等多因素有关，该实验还有待于进一步深入研究，为进一步实验研究提供一定的参考价值。同时，此次实验还得出在VX2肝癌动物模型建立后对兔肝功能指标TP和GGT的影响具有统计学意义。但由于实验样本量小、血检不及时、实验条件、误差等多重因素影响，其实用性有待于进一步实验考证。

参考文献：

[1]丁正梁，王如玉.家兔血液生理生化正常值的测定[J].浙江畜牧兽医，1981，（02）：20-26.

[2]俞纯方，邓云翔.家兔血液生理生化指标与生产力的关系[J].重庆师范学院学报，1996，13（2）：51-55.

[3]俞春英，谢金东，李秀红，等.福建黄兔血液生理生化指标的测定[J].经济动物学报，2009，13（2）：83-85.

[4]褚芳，陈顺乐.NCW兔血液生理生化指标的测定[J].实验动物科学，2008，25（2）：54-55.

[5]卢笑丛唐利军等湖北封闭群日本大耳白兔部分生物学参数的观察[D]．中国比较医学杂志，2003，3（5）：285-288.