结直肠癌KRAS基因突变特点与临床特征之间的关系

结直肠癌KRAS基因突变特点与临床特征之间的关系

龚晓林

岳阳市一人民医院湖南岳阳414000

【摘要】目的分析结直肠癌患者KRAS基因突变特点与临床特征之间的关系。方法随机选取我医院2012年3月至2014年6月手术切除的结直肠癌标本76例，采用突变荧光定量PCR检测肿瘤组织中KRAS基因第12、13密码子突变。结果76例中肿瘤位于结肠37例，直肠39例。结直肠癌患者中有25例，存在KRAS基因突变，占32．89％（25／76）；第12密码子突变18例，突变检出率为23．68％（18／76），共检出6种突变类型，其中以Gly12Asp突变率（11／76，14.47％）最高，第13密码子检出1种突变类型（Gly13Asp）7例，突变检出率为9.21％（7／76），经统计学分析，KRAS基因突变与患者的性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤分期无明显相关性。结论结直肠癌中KRAS基因突变的发生率较高，其突变率与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤分期无相关性。

【关键词】结直肠癌；KRAS基因；临床病理特征

Abstract：ObjectiveToanalyzetherelationshipbetweenKRASgenemutationandclinicalcharacteristicsinpatientswithcolorectalcancer.Methods76casesofrectalcancerwererandomlyselectedfromourhospitalfromMarch2012toJune2014，andtheKRASgenetwelfthand13codonmutationintumortissuesweredetectedbyusingthemutationfluorescencequantitativePCR.Resultsofthe76cases，37caseswerelocatedinthecolonand39casesintherectum.Therewere25casesofcolorectalcancer，32.89%（7/25），18（76/twelfth），6codonmutation，23.68%（18/76）.Themutationratewas7（76/14.47%），1（76/thirteenth）weredetected.TheKRASmutationwasnotsignificantlycorrelatedwithGly12Aspgenemutationsinpatients.ConclusionthemutationrateofKRASgenemutationsincolorectalcancerwashigh，andthemutationratewasnotcorrelatedwithsex，age，tumorlocationandtumorstage.

Keywords：colorectalcancer；KRASgene；clinicalandpathologicalfeatures.

全世界结直肠癌每年的新发病例大约有120万例，每年病死的人数超过60万，其发病率居恶性肿瘤第3位，病死率居第4位。近年以来，结直肠癌的发病率呈明显上升趋势和年轻化趋势。随着分子靶向治疗药物——表皮生长因子受体（EGFR）抑制剂西妥昔单抗（Cetuximab）和帕尼单抗（Panitumumab）的问世，结直肠癌的治疗进入了靶向治疗时代。KRAS基因突变检测已经成为临床用药的科学依据[1]。

1资料与方法

1．1一般资料

随机选取我医院2012年3月至2014年6月手术切除的结直肠癌标本76例，术前均未进行新辅助化疗，其中男性41例，女性35例，年龄36--82岁，平均年龄57.6岁。

1．2方法

根据《结直肠癌KRAS基因检测专家共识》标准[1]，选取经福尔马林固定的石蜡标本，选取癌组织，使用QIAGEN公司的DNA抽提试剂盒，提取DNA，按Real—time荧光定量PCR试剂盒的说明书，检测KRAS基因突变情况。运用SPSS11．5统计软件，组间比较采用检验，P≤0．05为差异有统计学意义。

2结果

76例中肿瘤位于结肠37例，直肠39例。结直肠癌患者中有25例，存在KRAS基因突变，占32．89％（25／76）；第12密码子突变18例，突变检出率为23．68％（18／76），共检出6种突变类型，其中以Gly12Asp突变率（11／76，14.47％）最高，第13密码子检出1种突变类型（Gly13Asp）7例，突变检出率为9.21％（7／76），（见表1）。

3讨论

2011年，美国《国家综合癌症网络（NCCN）结直肠癌临床实践指南》指出，使用西妥昔单抗或帕尼单抗的患者应检测肿瘤KRAS基因突变状态。中国卫生部颁布的《结直肠癌诊疗规范（2010年版）》中推荐西妥昔单抗用于治疗KRAS基因状态野生型患者。KRAS基因突变检测可以辅助临床医生筛选受益抗EGFR治疗的结直肠癌患者，为患者个体化治疗提供科学的用药依据，降低治疗风险，减少患者的医疗费用。欧洲药监局和美国FDA明确规定了使用靶向药物西妥昔单抗和帕尼单抗治疗转移性结直肠癌必须先检测KRAS基因。延安地区经济比较落后，基因检测尚未普遍开展，因此，要检测KRAS基因，必须要患者家属同意，方可进行。由于经济原因，使大部分患者丧失靶向治疗的机会，使患者的生命质量降低，生存率也比其他发达地区降低。

本研究结果显示，结直肠癌的KRAS基因突变率为32.89％，即约3分之一的患者出现了KRAS基因突变，与我国及其他西方国家研究结果一致[2-4]。第12密码子突变18例，突变检出率为23．68％（18／76），共检出6种突变类型，其中以Gly12Asp突变率（11／76，14.47％）最高，第13密码子检出1种突变类型（Gly13Asp）7例，突变检出率为9.21％（7／76），KRAS基因突变的发生率较高，其突变率与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤分期无相关性。黄鸿武等[5]采用免疫组织化学检查发现KRAS蛋白的表达与性别、肿瘤部位、肿瘤分期无相关性，仅与病理分化程度相关，分化越低，KRAS蛋白表达越多。

2010年结直肠癌诊治观点科学判读强调结直肠癌晚期病人应该坚持KRAS基因以及KRAS基因野生型是靶向治疗的适应症[6]。2012年临床肿瘤学重大进展一美国临床肿瘤学会年度报告指出，FDA批准西妥单抗联合FOL—FIRI化疗成为KRAS基因突变阴性EGFR表达的转移性结直肠癌的一线治疗方案，在化疗的基础上加上西妥单抗能延长患者的总生存期（Os）和无进展生存期（PFS）[7]。2013年临床肿瘤学重大进展一美国临床肿瘤学会年度报告回顾性分析了512名无KRAS基因突变的患者，增加帕尼单抗的使用，可以改善中位OS（26．0个月VS20．2个月）和中位PFS（10.1个月VS7．9个月），但存在KRAS突变的患者不能从帕尼单抗中获益，而且具有基因突变的患者联合运用帕尼单抗的效果要比FOLFIRI单独化疗的效果更差，其OS分别为15．6个月（帕尼单抗联合FOLFIRI组）和19．2个月（单独使用FOLFIRI组）[8]。

KRAS基因突变检测已成为中晚期结直肠癌患者联合化疗的重要指标之一，但是缺乏大样本研究，希望更多患者能够自愿参入研究，使得越来越多患者能够从中受益。

参考文献：

[1]卫生部病理质控与评价中心．结直肠癌KRAS基因检测专家共识[J]．中华病理学杂志，2012．41（9）：635—636．

[2]KarapetisCS，Khambata—FordS，JonkerDJ，eta1．K—rasbenefitfromeetuximabinadvancedcolorectalcancer[J]．NEnJMed，2008，359（17）：1757—1765．

[3]吴瑛，胡涵光，叶晓贤，等，KRAS基因突变与结直肠癌临床病理因素的关系[J]．中华外科杂志，2010，48（16）：1247—1251．

[4]陈慧娟，李洪波，李硕敏，等，KRAS基因突变与结直肠癌的关系[J]．肿瘤研究与临床，2010，22（7）：461—463．

[5]黄鸿武，李永翔．EGFR和KRAS在结直肠癌中的表达及临床意义[J]．武警后勤学院学报，2013，22（5）：345—348．

[6]刘荫华，徐玲，姚宏伟．2010年结直肠癌诊治观点科学判读[J]．中国实用外科杂志，2010，30（9）：763—768．

[7]潘皴，牛飞玉，苏文媚，等，2012年临床肿瘤学重大进展一美国临床肿瘤学会年度报告[J]．循证医学，2013，13（1）：4—29．

[8]苟兰英，高红飞，韩解非，等，2013年临床肿瘤学重大进展一美国临床肿瘤学会年度报告[J]．循证医学，2014，14（1）：4—29．