HPLC测定止咳药品中橙皮苷的含量

HPLC测定止咳药品中橙皮苷的含量

梅小萍杨迪石玉梅

（铜仁市食品药品检验所贵州铜仁554300）

【摘要】目的：主要研究HPLC测定止咳药中橙皮苷含量的基本方法。方法：选取我院某品牌止咳药物，采用HPLC方法对该止咳药物中的橙皮苷含量进行测量。色谱柱：phenomenex柱；检测波长：283nm；流动相：乙腈-2%冰醋酸（25:75）；温柱：30℃。结果：在采用HPLC测定止咳药品中橙皮苷含量后，发现橙皮苷在0.8～9.6μg的范围内内具有良好的线性关系，平均回收率为99.9%，RSD=0.8%。结论：HPLC在测定止咳药品中橙皮苷含量中具有良好的应用价值，具有操作简单、结果可靠等优点，应该在临床上做进一步推广。

【关键词】HPLC；止咳药品；橙皮苷；含量；临床推广

【中图分类号】R927.2【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2017）02-0252-02

橙皮苷属于一种二氢黄酮衍生物，在调解人体免疫力、抗癌、抗菌、保护心血管系统等方面具有重要价值。相关研究表明，黄酮类化合物具有促进氧化、抗氧化等功能，而橙皮苷作为黄酮类化合物中促进氧化作用的重要物质之一，对人体基因具有一定的毒害作用。因此为了有效控制橙皮苷药品质量，需要对橙皮苷的含量进行测量。因此，本文选取我院某品牌止咳药物，采用HPLC方法对该止咳药物中的橙皮苷含量进行测量，相关研究如下。

1.资料与方法

1.1一般资料

选取我院某品牌止咳药物，采用HPLC方法对该止咳药物中的橙皮苷含量进行测量。选择高效液相色谱仪，CP225型十万分之一电子天平，Branson型超声波清洗器对物品进行检测。

本文所选择的橙皮苷对照品均由中国食品药品检定研究院提供，并且整个实验中的试剂均为分析纯。

1.2方法

1.2.1确定色谱条件在本次研究中，所确定的色谱条件为：色谱柱：150nm×4.6nm；流动相：乙腈-2%冰醋酸（25:75）；检测波长283nm；柱温：30℃。

1.2.2制备对照品溶液称取橙皮苷对照品0.004g，将其置于量瓶中，连续加注甲醇定溶至刻度线，最终制备对照品溶液，其浓度为0.8mg/L。

1.2.3制备阴性对照品溶液与供试品精密提取本品2.0ml，将其置于10ml容量瓶中，持续加注甲醇至刻度线。之后静置溶液30min，取溶液上方清液，经过0.45μg过滤膜过滤后，所剩溶液为供试品溶液。

按照处方比例与工艺制备要求，精密提取缺陈皮样品，同供试品溶液制备方法，获取阴性对照品溶液。

1.2.4开展专属性试验在试验过程中，分别提取对照品溶液、阴性对照品溶液与供试品溶液，在上文提出的色谱条件下进行分析。分析结果显示，在上文提出的色谱环境下，供试品溶液具有良好的分离度，且阴性无干扰问题，理论搭板数＞3000。

1.2.5线性关系研究分别提取50、100、200、300、400、500、600μL对照品溶液，将其置于1mL容量瓶中，灌注甲醇至规定刻度，并依次吸取上述溶液20μL，开展高效液相色谱分析，分别用峰面积表示自变量，浓度表示因变量，绘制相应的标准曲线：

结果表明，橙皮苷在0.8～9.6μg范围内具有良好的线性关系特征。

1.2.6加样回收率试验精密提取1mL已知含量的同一批供试品溶液，将其分为九份，置于10mL容量瓶中。之后，选取一定数量的橙皮苷为对照品溶液，按照既定的样品测量方法进行测量，确定本次样品的回收率情况。

2.结果

按照上文提出的方法，对橙皮苷进行加样回收率试验后发现，本次研究中药品的平均回收率为99.9%，RSD等于0.8%，相关资料如表1所示。

表1橙皮苷加样回收率试验资料表

3.讨论

化学成分是治疗疾病的物质基础，橙皮苷作为二氢黄酮衍生物的一种，在抗菌、抗氧化等方面发挥重要作用，当前临床上在检测橙皮苷药品含量中，主要采用HPLC（高效液相色谱法）进行测量，依此来控制药品质量。因此，当前对于止咳药品中橙皮苷的测量，还需要充分借助HPLC方法，探究相关药品中橙皮苷的含量。

《中国药典》2010年版对橙皮苷测定流动相进行了明确，确定了流动相的配比为35:4:61（甲醇：醋酸：水），并且供试品溶液的制备需要依靠索式提取器回流进行提取。但由于整个提取过程较为复杂，容易出现误差，因此在本次研究中，参照相关文献[1]，发现乙腈-2%冰醋酸（25:75）流动相的峰形良好，且橙皮苷的分离度较高，因此将该流动相应用在含量检测中。在选择波长中，通过将适当浓度的橙皮苷溶液置于200～300nm的波长内进行扫描。扫描结果显示，橙皮苷在283nm处的吸收效果最好，因此选择283nm为检测波长。

从本次研究结果来看，在将HPLC方法应用到止咳药品中橙皮苷含量检测中后发现，本组药品的平均回收率为99.92%，RSD系数为0.8%，证明HPLC方法在检测橙皮苷含量中发挥着重要作用。除此之外，其他学者在橙皮苷测量中，通过采用HPLC方法也收到良好效果。例如，任婧昱等[2]采用HPLC分别测量清宣止咳颗粒中芍药苷、橙皮苷的含量后发现，在既定的色谱条件下，不同时间进行测量后，所测得的芍药苷、橙皮苷含量基本不变，证明该方法在试验所需的时间内具有稳定性，能满足试验分析的基本要求。而路玫等通过研发现，RP-HPLC法所测量的橙皮苷平均回收率接近100%，与本次研究结果基本相同，证明本次研究具有一定的科学性。

综上所述，HPLC在测量止咳药品中橙皮苷的含量中发挥着重要作用，其灵敏度高、操作方便快捷，因此应该在临床检验中做进一步推广。

【参考文献】

[1]廖厚知，粟华生，梁山丹，等.HPLC测定银芒止咳片中橙皮苷的含量[J].中成药，2007，29（7）:1114-1115.

[2]任婧昱，姜文红，曹飞，等.HPLC测定清宣止咳颗粒芍药苷、橙皮苷含量[J].黑龙江医药，2014，27（5）:1015-1017.

[3]路玫，谢东.RP-HPLC法同时测定复方百部止咳颗粒中橙皮苷和黄芩苷的含量[J].药物分析杂志，2005，25（8）:981-983.