回医烙灸疗法对大鼠脊髓损伤后神经修复机制研究

回医烙灸疗法对大鼠脊髓损伤后神经修复机制研究

孙治博夏铂徐武清

孙治博夏铂徐武清

(宁夏医科大学宁夏银川750004)

【摘要】目的：探讨回医烙灸疗法对大鼠脊髓损伤后神经修复功能的影响。方法：采用Allen's法制备急性脊髓损伤模型。分为假手术组（A组）、模型组（B组）、西药组（C组）、2小时烙灸组（D组）、6小时烙灸组（E组），其中50只于第1、2、4、6、8周采用脊髓损伤运动功能BBB法进行评分。另外25只取损伤脊髓组织做HE染色，观察脊髓损伤后形态学的变化。结果BBB评分表明D、E组效果明显优于A、B、C组，且D组疗效最显著。HE染色D、E组脊髓形态好于B、C组。结论：回医烙灸疗法对脊髓损伤大鼠神经功能的恢复有促进作用，且前期回医烙灸干预的效果好于后期干预。

【关键词】回医烙灸；大鼠；脊髓损伤；神经修复

【中图分类号】R285【文献标识码】B【文章编号】2095-1752（2015）07-0359-01

脊髓损伤的治疗是医学界的一大难题，尤其损伤后的神经再生功能，更是难上加难。回医烙灸疗法是一种民族医学疗法，本人跟随导师采用本法在临床治疗中发现，本法对脊髓损伤病人的康复具有一定疗效。为了验证本法的切实疗效，本实验采用脊髓损伤运动功能BBB评分法及组织形态学检测，观察回医烙灸疗法对损伤大鼠神经传导功能的影响。

1.材料和方法

1.1材料：选取清洁级SD大鼠50只。随机数字表法分为5组：A组(假手术组)、B组（模型组）、C组（西药组）、D组（2小时烙灸组）、E组（6小时烙灸组）。

1.2方法：采用改良的Allen's造模。

1.3手术操作：大鼠用1%戊巴比妥钠腹腔注射麻醉。以T10位中心，沿脊柱方向取一长约3.0cm的切口，切开皮肤、肌肉分离并显露棘突，分离附着于棘突两侧的骶棘肌，将T10椎板全部切除，保留硬脊膜。用改良式Allen's打击装置，以脊髓后正中血管为中心，采用20g冲击棒自5cm高度垂直自由下落击打于脊髓。下落撞击后，见鼠双下肢不完全瘫痪，标志撞击成功。

1.4干预：A组假手术组，只做椎板切除，不做脊髓损伤；B组模型组，造模后腹腔给予和D组等量生理盐水，持续8周；C组：醋酸泼尼松治疗组(西药组)，脊髓Allen's打击损伤后半小时内首次按20mg/kg，随后按4.6mg/kg/h给药，每1小时给药一次，连续给3次，之后同B组一样每日给予等量生理盐水，持续3天；D组2小时烙灸组，造模后2小时采用烙灸治疗，烙灸每日一次，一次5分钟，持续8周；E组6小时烙灸组，脊髓Allen's打击损伤后6小时采用烙灸治疗，烙灸每日一次，持续8周。

1.5具体治疗方法：烙灸组在损伤大鼠两侧夹脊穴（在距损伤上下端两个椎体的棘突间隙旁开距中线3-4mm处取穴）、大椎穴、命门穴上放约0.5厘米厚的生姜片，用回医烙灸器直接烙烫于放生姜片的穴位上，使局部发红。

1.6BBB评分：具体评分等级参见Basso等[1]的方法。所有大鼠术前1天行评分，术后次日评分，3天时对评分差别超过2分者进行剔除。此后分别于1、2、4、6和8周评分，共5次。所有观察均在18:00于开放空间进行，观察时间为10分钟，采用双人、双盲独立观察大鼠双后肢的运动感觉功能并记录。

1.7组织形态学改变，每组又按不同时间点分别在1天，3天，7天，14天，28天各取1只，共计25只，做HE染色，观察脊髓损伤后形态学的变化。

2.结果

2.1BBB评分结果其它组评分均小于A组。损伤后1周4组动物评分<7分，差异无显著性；2周时评分：C、D和E组>B组，差异有显著性；4周时评分：E组、C组>B组，差异有显著性；6周时评分：D组>E组>C组>B组，差异有显著性；8周时评分：D组>E组>C组>B组，差异有显著性。

2.2HE染色：A组损伤后脊髓结构正常；其它组损伤后1～3天脊髓结构破坏，神经元死亡,神经纤维肿胀，灰白质分界不清。损伤7天后脊髓内坏死，囊腔及空洞形成，周围有炎性细胞弥漫。伤后14天，脊髓组织疏松，大量胶质细胞增生及空洞形成，神经元细胞减少。B、C组空洞形成数明显高于D、E组。伤后28天，脊髓组织疏松脱落坏死，大量脊髓空洞，灰白质界限逐渐恢复，神经元数目稀疏。D、E组神经元细胞减少程度及空洞形成均轻于B、C组。

3.讨论

脊髓损伤后神经修复能力十分有限，源于损伤后不仅造成机械性损伤，而且局部组织还会出现一系列病理改变，包括组织缺血坏死，电解质紊乱，炎性改变，细胞凋亡等。激素类药物是目前脊髓损伤后广泛应用于临床的药物之一，但激素类药物对远期功能恢复没有显著的提高[2]。回医烙灸疗法能够疏通经络，促进血行，有利于神经组织再生，并通过排出腐败体液，达到人体所需要的体液平衡，对远期功能恢复有明显提高。BBB法是一种定量、客观的检测手段，能够对脊髓损伤作出功能性诊断和定量分析。本实验数据证实2小时回医烙灸组明显优于西药组和模型组，回医烙灸前期干预组的效果好于后期干预组，证实回医烙灸对损伤后的神经功能恢复确有促进作用。通过HE染色观察也证实，回医烙灸治疗的脊髓组织形态要好于模型组和西药组。但是脊髓损伤的原因是多方面的，回医烙灸的作用机制尚未有人深入研究，今后要通过更多现代化手段进行研究。

【参考文献】

[1]AllenAR.Remarksonthehistopathologicalchangesinthespinalcordduetoimpact:Anexperimentalstudy[J].JNervMentDis,1994,41(2):141.

[2]TakamiT,OudegaM,BetheaJR,etal.Methylpred-nisoloneandinterleukin-10reducegraymatterdamageinthecontusedFischerratthoracicspinalcordbutdonotimprovefunctionaloutcome[J].Neurotrauma,2002,19(5):653-666.

通讯作者：夏铂,男,副教授，主要研究:针推骨伤

徐武清，男，教授，主要研究：中医外科

基金项目:国家自然科学基金（编号：81360559）