浅谈血液分子生物学检验技术

浅谈血液分子生物学检验技术

贾松

贾松

游仙区妇幼保健院四川绵阳621000

摘要：分子生物学技术是当前医学与生活中常用的检验技术，在血液学中，它常用于血液病的分析与研究。在常用的PRC技术的基础上衍生了很多检验技术，用这些方法对血液病进行检测，可以对细胞基因进行分型等方面的分析了解，这些生物学检验技术在医疗方面都有极其重要的作用。因此，医务工作者要充分了解并深入研究血液分子生物学检验技术，让它在今后的医学发展中发挥更大的作用。

关键词：血液分子；生物学；检验技术

Abstract：molecularbiologytechniqueiscommonlyusedinthemedicalinspectiontechnologyandlife，intheblood，itiscommonlyusedintheanalysisandresearchofblooddisease.BasedoncommonlyusedonthePRCtechnologyhasgivenrisetomanytesttechniquestodetectblooddiseasewiththesemethods，canbeanalyzedtounderstandthetypesandotheraspectsofthecellbiologyofthesegenes，inspectiontechnologyplaysanextremelyimportantroleinthemedicalfield.Therefore，themedicalworkersshouldfullyunderstandandin-depthstudyofthebloodtesttechnologyofmolecularbiology，letitplayagreaterroleinthefutureinthemedicaldevelopment.

Keywords：molecularbiology；blood；TestTechnology

包括DNA技术、PCR技术、转基因技术等多种检验技术在内的血液分子生物检验技术在现代医学的发展中起着至关重要的作用。这些检测技术被应用到血液病、肿瘤耐药性治疗等众多领域，并在实际应用中发挥着重要的作用，因此了解分子生物学检验技术并研究它在血液学中的应用是很有意义和价值的。

一、血液分子生物学检验技术

（一）应用与原理

血液分子生物学检验技术包括很多方面，如应用广泛的PCR技术、人们熟知的DNA检测技术、转基因技术以及限制性片段长度多态性等。

这些技术广泛应用于基因诊断、恶性血液病与遗传血液病的分析、指导治疗、微小残留病等领域。

其原理与方法是Southern印迹杂交，Northern印迹杂交与核酸原位杂交。

（二）PRC技术以及相关检验技术

其中PCR技术是最常用的方法之一，它是聚合酶链反应技术的缩写，它通过扩增核酸片段，为生命医学提供大量的信息资源。核酸记载了大量的遗传信息，这对医学研究有重要的辅助作用。因此，在分子生物学检验技术发展的过程中，PCR技术与DNA相关技术成为重要的辅助工具。

近年来，随着PCR技术的日趋成熟与完善，产生了很多以PCR为基础的检验技术，这些技术在血液学检验中发挥着重要的作用。常用的这类技术包括原位PCR、定量PCR、逆转录PCR、多重PCR、差异显示PCR与基因芯片技术。

原位PCR是将组织固定处理细胞内的RNA或DNA作为靶序列来进行的扩增基因的反应。定量PCR是最初的时期对RNA或DNA进行定性检验的方法。逆转录PCR是把细胞内总mRNA或RNA作为材料而进行的体外的扩增技术。多重PCR是在同一个反应体系中用加入多对引物的方法，同时扩增DNA样品中几个不同的序列的靶片段。差异显示PCR在逆转录PCR的基础上研究基因的差异表达。最后一个基因芯片技术也叫做DNA微阵列，常用于白血病的免疫分型、基因异常检测等方面，通过基因芯片技术可以获得大量的基因序列与信息，准确的对样品进行分析。

二、分子生物学检验技术在血液学中的应用

以PCR等技术为基础的分子生物学检验技术具有高效、便捷等特点，在血液病的相关研究中，分子生物学检验技术发挥着独特的作用，对于分析血液细胞的DNA样本，找到基因中的特点，这对于相关疾病的治疗有着很大的借鉴、辅助作用。

（一）白血病

通过PCR技术这种检测方法，可以将免疫球蛋白重链与T细胞受体进行基因重排的检测。用这种方法来扩增重排基因。如果发现扩增的产物在经过电泳之后呈现单一的条带，那么就可以确定是白血病的细胞。PCR基因重排方法，对于将急性的淋巴细胞白血病的进行分型是很有利的。

致使染色体重排的一个常见原因就是白血病染色体发生相互易位的现象。白血病特异性分子的产生标志是染色体在分子水平上重组，形成融合基因与融合蛋白。对融合基因进行分子生物学检测，有利于准确诊断疾病并将疾病分型找到适合的治疗方案，同时能够进行预后判断、检测微小残留病。

像慢性粒细胞白血病这类恶性的血液病，其染色体发生易位后会导致处在9q34上的ABL原癌基因重组到22q11的BCR基因上，形成BCR-ABL融合基因，表达一个具有高酪氨酸激酶活性的BCR-ABL融合蛋白，这种融合基因是CML发病的分子基础。

而另一种急性早幼粒细胞的白血病特异性染色体易位则会导致17号染色体上的维甲酸受体与15号染色体的PML原癌这两种基因发生融合，产生新的融合基因，叫做PML-RARa。还有两种，一个是临床上变异型APL（M3v，M3b），一个是急性粒细胞白血病部分分化型（M2），这些相对来说难以进行鉴别，而现在通过融合基因的检测可准确鉴别这两种白血病。

对融合基因进行检测的优点是，有利于选择合适的治疗方案。

（二）遗传血液病

一般经常出现的遗传性血液病是血红蛋白病，而常出现的出血性疾病是血友病。遗传血液病产生通常是因为出现了基因缺失、倒位、插入等这类的基因缺陷，通过RT-PCR检测可以重排基因。

其中点突变的现象，一般将PCR技术与酶切位点结合到一起进行分析。当点突变产生时，会出现产生新的酶切位点或原有的酶切位点消失的现象，那么就可以利用该酶切点两侧的引物进行基因的扩增，并将扩增的产物用内切酶进行适当的切割，通过观察电泳图谱来判断是否有内切酶切点发生改变。而另一种与限制性内切酶点没有连锁的点突变，就通过PCR技术与特异寡核苷酸探针斑点杂交法相结合的方法进行诊断。

（三）HLA基因

利用PCR技术对HLA基因进行多态性检测具有简单、有效的特点。这种方法一般适用于HLA基因与疾病相关性的研究以及骨髓移植中的HLA基因配型等方面。其原理是将点位上全部的寡核苷酸探针都在固相支持物上进行固定，生物素化之后的引物就可以进行相应的基因扩增了。通过这种方法得到的经过生物素化后的DNA的放大产物再与膜上的探针进行杂交，最后进行化学发光或是显色的处理。

（四）肿瘤细胞

肿瘤细胞在接触了某一类的药物之后，会对该药品及不同结构机制的药品产生耐药性，也就是出现了多药耐药性的问题。而通过血液分子生物检验技术则可以对肿瘤细胞的多药耐药性进行研究。通过原位杂交法、RT-PCR法、Northern印迹法、狭缝印迹法与斑点印迹法等检测方法的建立，对肿瘤的多药耐药基因进行测评。从目前的研究来看，急性髓细胞白血病的抗药耐药基因与预后相关，这就表示，耐药抗药基因呈阳性的CR，生存期较短，很容易在早期出现复发的状况。

（五）基因重组与转移

DNA重组与基因转移技术能够通过将野生型的基因引入病人体细胞内的方法来完成基因治疗，野生基因通过重组成为人体内正常的基因，来补偿缺陷的基因功能，使疾病得到有效的治疗。现阶段一般以逆转录病毒与腺病毒为基因的载体，把间质干细胞与造血干细胞等作为基因重组与转移的靶细胞进行治疗。

结语

分子生物学检验技术的准确性高，检测方法较为简便，因此在现代医学中应用广泛。通过分析这些PCR检验技术在血液学中的检验方法与功能，了解它应用的广泛性，明确它在现代医学应用中的重要价值，为今后更好的发挥其作用奠定基础。总的来说，血液分子生物检验技术的深入研究与普及应用，对今后医学的发展有重要的意义与价值。

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