益智灵胶囊对老年痴呆大鼠模型脑组织中海马细胞凋亡调控的实验研究

益智灵胶囊对老年痴呆大鼠模型脑组织中海马细胞凋亡调控的实验研究

曹旸问莉娜郭珍赵欢袁有才（通讯作者）

（陕西中医药大学附属医院陕西咸阳712000）

【摘要】目的：分析益智灵胶囊对老年痴呆大鼠模型脑组织中海马细胞凋亡调控的影响。方法：选取100只SD大鼠，按体重随机分为空白组、模型组、益智灵大剂量组、益智灵中剂量组、益智灵小剂量组。比较五组丙二醛（MDA）、β-淀粉样蛋白（β-AP）含量、海马组织中老年斑、神经元纤维缠结数目。结果：模型组的MDA、β-AP含量均高于空白组，表示造模成功。益智灵大剂量组、益智灵中剂量组、益智灵小剂量组的MDA、β-AP含量均低于模型组（P＜0.05）。益智灵中剂量组的MDA、β-AP含量低于益智灵大剂量组、益智灵小剂量组（P＜0.05）。益智灵中剂量组的海马区脑组织切片中均未见到神经元纤维缠结及老年斑，而益智灵大剂量组、益智灵小剂量组可见少量神经元纤维缠结及老年斑。结论：中剂量益智灵胶囊可有效减少老年痴呆大鼠模型脑组织中海马细胞凋亡，起到治疗作用。

【关键词】益智灵胶囊；老年痴呆大鼠；海马细胞凋亡；作用

【中图分类号】R749【文献标识码】A【文章编号】1007-8231（2018）35-0105-02

阿尔茨海默病也称老年痴呆症，多发于高龄患者，多表现为记忆力、定向力障碍，伴随有社会活动自主能力及智力减退[1]。本文旨在分析益智灵胶囊对老年痴呆大鼠模型脑组织中海马细胞凋亡调控的影响，现报告如下。

1.资料与方法

1.1资料

选取100只SD大鼠，在室温18～25℃、相对湿度60%～70%的屏障系统内饲养，对饲料及水不给予控制。随机分为空白组、模型组、益智灵大剂量组、益智灵中剂量组、益智灵小剂量组，每组20只，空白组：鼠龄2.23±0.22d，体重290.78±10.42g。模型组：鼠龄2.21±0.22d，体重297.78±11.34g。益智灵大剂量组：鼠龄2.22±0.23d，体重285.78±10.36g。益智灵中剂量组：鼠龄2.13±0.22d，体重298.78±8.56g。益智灵大剂量组：鼠龄2.24±0.22d，体重300.67±7.27g。各组的鼠龄、体重经分析无显著差异（P＞0.05）。

1.2实验试剂及仪器

由陕西中医学院附属医院制剂中心提供益智灵胶囊；湖北黄石市化工厂生产三氯化铝（AlCl3）；福州迈新生物技术公司提供二氨酸联苯胺（DAB）；TAKARA公司提供荧光定量PCR试剂合（SYBR）、To-talRNA提取试剂；武汉博士德生物工程有限公司提供兔anti-Bcl-2、兔anti-Bax抗体；瑞兴化学产品公司提供焦碳酸二乙酯（DEPC）；福州迈新生物技术公司提供即用型免疫组化染色（SP）试剂盒显色剂。

由上海精密实验设备有限公司提供DK-8A型电热恒温水槽；上海精密科学仪器有限公司天平仪器厂提供FA1004N电子天平；上海光谱仪器有限公司提供723可见光分光光度计；AppliedBiosystems公司提供2700型PCRSystem扩增仪；科大创新股份有限公司中佳分公司提供KDC-40型低速离心机；陕西中医学院提供Mirros水迷宫、注射针头、试管、玻璃匀浆器、试管等。

1.3方法

采用AlCl3制造老年痴呆大鼠模型法，模型组、益智灵大剂量组、益智灵中剂量组、益智灵小剂量组均给予腹腔注射3100mg/kgAlCl，隔日一次，空白组给予3100mg/kg生理盐水腹腔注射，隔日一次。均连续50天，复制慢性铝中毒老年痴呆大鼠模型。空白组与模型组均给予1ml/100g生理盐水；益智灵小剂量组给予0.235g/kg益智灵混悬液灌胃；益智灵中剂量组给予0.47g/kg益智灵混悬液灌胃；益智灵大剂量组给予0.94g/kg益智灵混悬液灌胃，以上治疗均是每日1次。

1.4观察指标

比较五组丙二醛（MDA）、β-淀粉样蛋白（β-AP）含量、海马组织中老年斑、神经元纤维缠结数目。

1.5统计学分析

使用SPSS19.0软件，计数资料用%表示，计量资料用x-±s表示，用χ2或t检验，P＜0.05为差异显著。

2.结果

2.1各组MDA、β-AP含量比较

模型组的MDA、β-AP含量均高于空白组，表示造模成功。益智灵大剂量组、益智灵中剂量组、益智灵小剂量组的MDA含量均低于模型组；益智灵大剂量组、益智灵中剂量组、益智灵小剂量组的β-AP含量均低于模型组。益智灵中剂量组的MDA含量低于益智灵大剂量组、益智灵小剂量组；益智灵中剂量组的β-AP含量低于益智灵大剂量组、益智灵小剂量组，详情见表。

表各组MDA、β-AP含量比较（x-±s）

注：*表示与模型组相比，P＜0.05；#表示益智灵中剂量组与益智灵大剂量组、益智灵小剂量组相比，P＜0.05。

2.2病理切片比较

益智灵中剂量组的海马区脑组织切片中均未见到神经元纤维缠结及老年斑，而益智灵大剂量组、益智灵小剂量组可见少量神经元纤维缠结及老年斑。

3.讨论

老年性痴呆是以进行性认知障碍和记忆能力损害为主要临床表现的中枢神经系统退变性疾病，患者大多生活不能自理，长期需要家人24小时陪护，给家庭及社会造成较大经济负担[2]。因此，研究老年性痴呆发生发展原因及规律意义重大，而研究防治老年性痴呆新方法新药物刻不容缓。

益智灵胶囊具有补虚损及益肾保精的作用，有利于填补脏腑阴常不足，调节失调的阴阳，可提高性腺功能。丙二醛（MDA）极易与磷脂蛋白质发生反应，而形成脂褐素，有着较强的生物毒性。随着年龄的增加，其含量也日益增多，降低细胞整合性及功能性，进而加速大脑老化，发生痴呆。β-淀粉样蛋白（β-AP）是老年斑的核心成分，同时也是老年性痴呆形成的重要因素[3]，如何有效减少β-AP沉积是治疗老年性痴呆的重要缓解。本次实验中，选取100只大鼠作为研究对象，通过研究得到，中剂量益智灵胶囊可有效降低MDA、β-AP及神经元纤维缠结、海马组织中老年斑数。

综上所述，中剂量益智灵胶囊治疗老年性痴呆可改善记忆力衰退、神经衰弱症，用于临床治疗中。

【参考文献】

[1]陈建平.老年性痴呆的临床表现及治疗[J].健康向导，2016，22(3):34-35.

[2]矫增金，陈民.论老年性痴呆中医病因病机[N].辽宁中医药大学学报，2016，2(6):58-60.

[3]赵翠霞，阿衣努尔·木合买提巴克，万智.益智治呆方通过干预神经胶质细胞治疗老年痴呆症的大鼠实验研究[J].临床和实验医学杂志，2017，16(21):2098-2102.