宁夏第五人民医院大武口医院检验科753000
【摘要】目的:尿液干化学分析试带隐血实验、尿沉渣分析仪和尿液显微镜检查红细胞(镜检RBC)三种的结果进行比较分析。方法:将700份我院患者留取的随机尿液进行尿液分析仪检验和尿沉渣显微镜检查。结果:优利特11G尿仪隐血试验与UF-500i尿仪联合检测有红细胞485例,镜检有红细胞的338例,镜检无红细胞的147例。优利特11G尿仪隐血试验与UF-500i尿仪联合无红细胞215例,镜检无红细胞的190例,镜检有红细胞的有25例。三种方法结果出现差异。结论:临床工作三种应联合进行,尤其是显微镜检查至关重要,不可忽视。
【关键词】干化学隐血试验;UF-500i尿液分析仪;显微镜
尿液隐血检查是尿液检验中一个最重要的项目,常用的检验方法有尿液干化学分析试带隐血试验、尿沉渣分析仪和尿液显微镜检查红细胞(镜检RBC)三种。由于显微镜检查对鉴别肾小球性及非肾小球血尿有重要的临床意义,同时可以对仪器本身有无缺陷及检测结果是否准确做出客观而可靠的判断,因此显微镜检查才是“金标准”,是任何尿液分析仪替代不了的。为此,我们对700例我院患者的随机尿样,用三种方法进行检验,并对符合程度进行比较。
1原理
优利特11G尿仪:红细胞血红蛋白(Hb)中亚铁血红素的过氧化物酶样活性可使过氧化物分解释放出新生态,后者氧化底物邻甲苯胺变成邻联甲苯胺发生由黄色→草绿色→深蓝色的颜色变化。UF-500i尿仪:采用流式细胞术和电阻抗法,用荧光染料对尿中各类有形成分进行染色,然后经激光照射每一有形成分发出的荧光强度、散射光强度及电阻大小进行综合分析,各种有形成分的散射图和直方图等信息。
尿液显微镜检查则是通过放大作用直接将细胞等有形成分真实直观地呈现在镜下,是对检测底物的真实反映。
2材料与方法
2.1仪器:UF-500i尿液分析仪、优利特URIT11G尿液干化学分析仪、尿分析试纸条、奥林帕斯显微镜、离心机、载玻片、盖玻片(18×18mm)。
2.2.标本采集:按操作规程随机采集门诊、住院病人新鲜中段尿共700份(其中男性462份,女性238份),年龄2~85岁。采集后立即送检。
2.3方法
将尿试纸条浸入混匀的10ml新鲜尿液中1s后取出,并按操作要求进行仪器测定,结果报告分为:-、+/-、1+、2+、3+。取检测标本尿液10ml于试管中,采用UF-500i尿仪进行检测,根据复检规则确认仪器分析结果。取尿液10ml于试管中,采用显微镜镜检,以1500r/min离心5min,弃去上清液,留取沉淀0.2ml,充分混匀后,吸取约20μl于载玻片上,加盖玻片(18mm×18mm)后镜检,结果报告为:红细胞,以高倍(40×10)镜视野至少10个视野所见的最低--最高数的范围报告。
3结果
700例我院患者的随机尿样用三种方法同时检查,结果见表1和表2、表3。
4讨论
由于三种检验方法的原理不同,影响因素也不同,因而三种检验方法的结果存在一定的差异。优利特11G尿仪阳性,而UF-500i尿仪和镜检阴性,常见原因有:(1)血红蛋白(Hb)尿液干化学分析仪隐血试验既能与完整的RBC发生阳性反应,也可与RBC溶解释放的Hb发生阳性反应,而UF-500i尿仪和镜检只能检出尿中未溶解形态完整的RBC。疾病时,尿中Hb有两个来源:?发生血管内溶血,血浆Hb超过了结合珠蛋白的结合能力,游离Hb从尿中排出。?尿路(尤其是上尿路)出血,RBC在高渗或(和)低渗时被破坏致使Hb逸出。此时,尿液干化学分析仪阳性,但UF-500i尿液分析仪和镜检不见RBC或仅见RBC碎片。(2)肌红蛋白(Mb)分子中也含有血红素基团,具有过氧化物酶活性。当心肌或骨骼肌发生严重损伤时,血浆Mb增高,经肾脏排泄,使尿液Mb含量增高,故干化学隐血试验呈阳性,UF-500i尿液分析仪和镜检RBC为阴性。(3)某些患者尿液中含有对热不稳定酶,也可使试剂块发生颜色改变,出现干化学隐血试验阳性,UF-500i尿仪和镜检为阴性。(4)某些氧化性污染物,次氯酸盐会导致干化学隐血试验假阳性。(5)菌尿时有些细菌会产生氧化性物质,使得试剂块发生颜色变化,从而导致隐血试验阳性,UF-500i尿仪和镜检RBC为阴性。(6)长时间存放及高温,标本不新鲜,使隐血试验的阳性率相对增高,而UF-500i尿仪和镜检也相应减少,测试结果极有可能出现假阳性。尿液标本存放时间不得超过2h。(7)尿试纸条的超期使用或被污染以及不妥善保存和操作方法的不正确,均可造成测试结果假阳性。(8)可能存在的人为原因:由于粗心漏检了应该看到的红细胞,或者工作经验不丰富,对于有所变形或不规则的红细胞不敢辨认,致使检测结果“假阳性”。
UF-500i尿仪和镜检阳性,优利特11G尿仪隐血试验阴性,其常见原因有:(1)食物或药物的影响:尿液呈碱性时,RBC溶解破裂,形成褐色颗粒,隐血试验呈阳性,而UF-500i尿仪和镜检呈阴性。(2)尿液中有大量VitC时,能竞争性夺取反应产生的氧,引起假阴性。(3)高比重、高蛋白尿样降低了试剂块隐血试验的灵敏度,使隐血试验假阴性。(4)尿液中黏液成分增多,使RBC被包裹起来,相应试剂块接触不到Hb,而使隐血试验假阴性。(5)优利特11G尿仪敏感度太低或由于室温等工作环境的影响,致使隐血试验阴性,但UF-500i尿液分析仪和镜检确实存在红细胞。(6)仪器检测准确有效为阴性结果,但却由于人为原因误检误报致使出现阳性结果。
UF-500i尿仪阳性,优利特11G尿仪隐血试验和显微镜镜检阴性,原因有:(1)标本的清洁程度不够或混浊尿时,尿中的杂质易被UF-500i尿仪误认为是红细胞,(2)尿中出现结晶时它们的折光性和红细胞相似,容易被UF-500i尿仪归类为红细胞,尤其是草酸钙结晶等,(3)当尿道受真菌感染或尿受真菌污染时也会被误识别为红细胞出现假阳性,(4)尿液中破坏的白细胞,精子,不完整管型等都易被染色认为是红细胞。
5结论
优利特URIT11G尿液干化学分析仪隐血试验,UF-500i尿液分析仪和显微镜镜检红细胞存在一定差异,要充分考虑各种影响测定结果的因素,并结合临床进行全面分析,对优利特11G尿仪隐血试验和UF-500i尿仪阳性结果以显微镜法复检,这也是做好尿液检验质量保证的重要环节和关键所在。对于优利特11G尿仪隐血试验和UF-500i尿仪结果不一致的也应复查,以确保测定结果的准确可靠。因而到目前,仪器的检测结果还不能完全替代显微镜检测,尿沉渣的显微镜检测仍是尿液分析中不可缺少的检测手段,应将优利特11G尿仪,UF-500i尿仪和显微镜联合使用,互为对比,以保证检测结果准确有效【1】。
参考文献:
[1]全国临床检验操作规程(第4版)北京:人民卫生出版社,2015,171.