河南输血感染HIV患者外周血T淋巴细胞亚群的变化

河南输血感染HIV患者外周血T淋巴细胞亚群的变化

薛云红1侯瑞生1周言2李丽1张新1张勤1

薛云红1侯瑞生1周言2李丽1张新1张勤1赵青霞3汤展展2孙长宇2（通讯作者）

（1河南国际旅行卫生保健中心河南郑州450003)

(2郑州大学第一附属医院感染科河南郑州450002）

（3河南省传染病医院河南郑州450005）

【摘要】目的了解河南输血感染的艾滋病患者和HIV携带者外周血T淋巴细胞亚群的表达。方法利用白细胞分类和流式细胞分析法对20例HIV携带者和20例AIDS患者外周血淋巴细胞中CD3+，CD4+，CD8+的表达及绝对数进行检测。结果AIDS患者组CD3+淋巴细胞数较正常值显著下降（P<0.05）；HIV感染组与艾滋病组的CD4+T淋巴细胞数显著下降（P<0.01）；CD8+淋巴细胞数显著增高（P<0.01）；CD4+/CD8+比值显著倒置。结论感染HIV后外周血CD4+T淋巴细胞显著下降，随病情进展下降更显著。

【关键词】人类免疫缺陷病毒获得性免疫缺陷综合征淋巴细胞亚群流式细胞分析法

获得性免疫缺陷综合征（艾滋病）是由人类免疫缺陷病毒引起的一种以细胞免疫损害为主的传染病，本研究采集了来自于河南南部部分经输血传播的农民感染者，探讨其CD3、CD4、CD8的T细胞亚群的变化，并探讨其临床意义，现汇报如下：

1资料与方法

1.1研究对象20例无症状的HIV感染者和20例AIDS患者，其中男31例，女9例；平均年龄40.4岁。均连续2次检测HIV抗体阳性（ELISA法），并且均经免疫印迹法确诊，均为河南南部农村输血传播的农民。排除心肝肾等脏器病变。正常对照组20例，男15例，女5例；平均年龄30.3岁。

1.2主要仪器和试剂BeckmanCoulterEpicsXL流式细胞仪；FITC-CD3/PE-CD4，F1TC-CD3/PE-CD8，F1TC-CD8/PE-CD38，荧光标记单克降抗体。

1.3方法3组均采了空腹静脉血2ml，EDTA-K2抗凝。于CD-1700上进行白细胞计数和白细胞中淋巴细胞百分率的测定，算出淋巴细胞计数，剩余的标本采用微量全面直接双标记免疫荧光染色。分别取100ul全血，加入红细胞溶解液2ml，混匀后室温避光孵育15min。1500r/min离心5min，去上清，加PBS2ml，洗涤细胞1次，去上清，加入1%多聚申醛0.5ml，然后置于流式细胞仪常规分析。以前向散射光及侧面散散光对淋巴细胞群设“门”，对PMT1和PMT2通道分别以相应的同种型128G染色细胞为阴性对照，设置各通道之间的荧光补偿后；对各淋巴细胞亚群进行检测，每管收集10000个细胞进行分析。

1.4统计学方法数据以x-±s表示，采用SPSS3.0软件进行t检验，以α=0.05检验水准，P＜0.05为差别有显著性。

2结果

检测T淋巴细胞亚群发现，AIDS患者组与正常对照组相比，CD3+T细胞明显下降（P<0.01）,CD8+T细胞数明显增加，CD4+/CD8+比值明显倒置（P<0.01）。AIDS组患者与HIV携带组比较CD4+T细胞绝对数和百分率显著下降（P<0.01），CD4+/CD8+比值显著倒置（P<0.01），CD3+T细胞未见显著改变，见表1，各淋巴细胞亚群百分比见表2。

表1外周血T细胞亚群计数

与对照组比※P均<0.01，AIDS组与携带组比较△P<0.01。

表2外周血T淋巴细胞亚群百分比

与对照组比较※P<0.01，与携带组比较△P<0.01。

3讨论

艾滋病的发病机制就是免疫缺陷，尤其是细胞免疫缺陷，最重要的机制为CD4+的T细胞受到人类免疫缺陷病毒（HIV）特异性的侵犯和破坏，导致细胞免疫缺陷。而CD4+T细胞是和CD3+、CD8+T细胞密切相关的一个细胞亚群。国内外已有不少研究证实CD4+T细胞和其他免疫细胞的联系[1]。本研究通过正常人，HIV感染后携带者及艾滋病患者T细胞亚群检测发现，感染后CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均显著降低，提示河南经输血传播的农民T细胞亚群的变化和文献报道的情况类似[2]，说明地区和传播途径的差异可能对淋巴细胞亚群的影响较小，至于确切的情况，有待于大规模的调查及更深入的研究。

本研究结果表明：CD4+T细胞在HIV感染者和艾滋病患者组存在显著差异（P<0.01）。临床实践证实，CD4+T细胞计数越低，疾病就越重，治疗就越困难，所以CD4+T细胞计数可以用来评估艾滋患者病变的程度，并可作为临床疗效的判定标准之一，以及预后的临床指标[3]。

此外本研究也提示CD3+和CD8+T细胞也可以在一定程度上体现HIV感染者病情的进展，可以作为辅助检查项目，以便综合分析病情。

参考文献

[1]GeoffreyH.Holm,DanaGabuzda.DistinctmechanismsofCD4+andep8+TcellactivationandbystanderapoptosisinducedbyhumanimmunodeficiencyvirusTypeIVirol[J].2005,79(10):6299～6310.

[2]李富荣，戴勇，等.HIV感染者和AIDS淋巴细胞免疫功能的研究.中华实验和临床病毒学杂志，2000，18（4）：337-339.

[3]HengelRL,NicholsonJK,CarbeneJ.AnupdateontheuseofflowcytometryinHIVinfectionandAIDS:ClinicallabMed，2001,21(4):841.