(长沙医学院湖南长沙410219)
基金项目:长医教[2017]18号-335
摘要目的:探讨淮山黄酮类化合物对糖尿病小鼠的降血糖作用及其与剂量的关系。方法:将小鼠随机分为正常对照组,模型组,阿卡波糖组(20mg/(kg·d)),淮山黄酮高(12mg/(kg·d))、中(6mg/(kg·d))、低(3mg/(kg·d))剂量组,共6组,每组十只。记录小鼠的体重,正常对照组给予普通饲料喂养,其它组小鼠给予高脂高糖饲料(20%猪油、25%蔗糖、5%胆固醇和50%普通饲料)喂养,均自由饮水,第16d时除正常对照组外均腹腔注射链脲佐菌素(STZ)6mg/(kg·d),持续15d,,作为糖尿病模型小鼠。结果:淮山黄酮类化合物能降低大鼠的血糖水平,其降糖作用随给药剂量的增加而增加。
关键词:淮山黄酮类化合物;糖尿病;降血糖
黄酮类化合物广泛存在于自然界中,属于植物在长期自然选择过程中产生的一些次级代谢产物,在植物体中的分布尤以花、果、叶部位为多,且大多与糖结合成糖苷形式存在【1】。在本世纪30年代即发现它具VC活性,一度列为VP。60年代证实有抗油脂氧化活性,作为一级抗氧化剂使用【2】;正因为它抗氧化,所以黄酮类化合物可降低血糖浓度,可预防和治疗糖尿病。山药频繁地出现在治疗“消渴病”的经典名方中,可见山药有治疗糖尿病的功效,张忠全等人研究发现山药多糖能提高血液中的C肽,具有改善受损的胰岛B细胞功能【3】。高洪武发现山药中的甾体皂苷?α-葡萄糖苷酶有抑制作用,可以降低小鼠的血糖水平【4】。张婧萱等人通过实验证明淮山药中的黄酮对Fenton体系产生的·OH有很好的清除作用【5】。通过对糖尿病小鼠灌胃黄酮类化合物一段时间后,发现血糖明显降低,消瘦症状也得以减轻,且其功效与黄酮类化合物的使用呈现明显的量效关系【6】。
1材料与方法
1.1取60只SD小鼠,实验前先适应性饲养一周,将小鼠随机分为正常对照组,模型组,阿卡波糖组(20mg/(kg·d)),淮山黄酮高(12mg/(kg·d))、中(6mg/(kg·d))、低(3mg/(kg·d))剂量组,共6组,每组十只。记录小鼠的体重,正常对照组给予普通饲料喂养,其它组小鼠给予高脂高糖饲料(20%猪油、25%蔗糖、5%胆固醇和50%普通饲料)喂养,均自由饮水,第16d时除正常对照组外均腹腔注射链脲佐菌素(STZ)6mg/(kg·d),持续15d,,作为糖尿病模型小鼠。
1.2总黄铜成分提取与分离纯化。取新鲜淮山药,烘干,粉碎。称取淮山药粉末6g加80ml95%乙醇,超声波提取2.5h,抽滤。滤渣再加80ml95%乙醇,超声波提取2.5h,抽滤,合并两次滤液,浓缩至滤液仅剩20ml,放置100ml容量瓶中,用60%乙醇稀释至刻度,得样品液得提取液。利用硅胶柱色谱分离[5?-8?],采取湿法装柱,干法上样,然后依次用石油醚、乙酸乙酯、无水乙醇、50?%的乙醇溶液对粗提物进行洗脱,至溶液基本无色,将所获得的洗脱液进行浓缩,浓缩后的物质因黏于瓶壁,所以使用馏分将其全部溶解转移至?50mL?烧杯中,用保鲜膜封口,并戳几个小洞眼,使瓶中的溶剂挥干,收集得到样品。
1.3血糖测定。在造模成功后的第40天,取造模5组中50只以及正常对照组中的10只,共60只大鼠的眼底静脉血,用氧化酶法测血糖,记录其值。
1.4统计学处理。结果用SPSS11.5软件包进行统计分析,数值以±s表示。组问计量资料差异性比较采用t检验。
2结果
淮山黄酮类化合物对糖尿病大鼠血糖的影响,结果见表1。
3讨论
山药作为传统药食同源药物,药用历史悠久,其主要功效为健脑养胃,生津益肺。文献报道【7-8】,山药多糖可刺激调节免疫各级组织,增强细胞免疫和体液免疫。从表1可见,造模前后实验大鼠血糖水平存在明显差异,灌药前后各组血糖水平亦存在明显差异,具有统计学意义(P<0.O1)。模型对照组、淮山黄酮各剂量组和阿卡波糖组与正常对照组相比差异亦有统计学意义(P<0.O1),均能降低实验性糖尿病大鼠血糖,其淮山黄酮大剂量降糖更加明显;降糖百分率随剂量增大而增加。说明淮山黄酮对糖尿病大鼠的血糖具有降低作用,且存在剂量依赖关系。
参考文献:
[1]唐得时.中药化学[M].北京:人民卫生出版社,1986:128,135,140-142.
[2]李楠,刘元,侯滨滨.黄酮类化合物的功能特性[J].食品研究与开发,2005,06:139-141.
[3]张忠泉,陈百泉,等.山药多糖对大鼠血糖及胰岛释放影响的研究[J].上海中医药杂志,2003,10(7):52—53.
[4]高忠武.山药甾体皂甙的分离提取及其在小鼠体内降糖活性研究[D].上海大学硕士学位论文.
[5]张婧萱,廖保宁,等.淮山药中总黄酮的提取及对羟自由基的清除作用[J].微量元素与健康研究,2007,24(1):44—54
[6]许静雅,苏小军,李清明,郭时印.淮山中降糖功效成分的研究进展[J].食品研究与开发,2016,02:221-224.
[7]苗明三.怀山药多糖对小鼠免疫功能的增强作用[J].中药药理与临床,1997,13(3):25
[8]程林,陈斌,蔡宝昌.山药及其麸炒品的多糖部位对小鼠免疫功能的影响[J].中药新药与临床药理,2006,(2):86—89