延边朝鲜族RA患者血清AKA、APF、CCP及RF检测结果的临床研究

延边朝鲜族RA患者血清AKA、APF、CCP及RF检测结果的临床研究

张洪江姜春善

延边大学附属医院检验科吉林延吉133000

摘要：目的探讨抗角质蛋白抗体（AKA）、抗核周因子抗体（APF）、抗环瓜氨酸多肽抗体（CCP）以及类风湿因子（RF），在检测延边地区朝鲜族类风湿关节炎（RA）的敏感性和特异性。方法选取198例RA患者（朝鲜族，100例；汉族，98例）作为RA组，非RA患者92例为非RA组；98例健康体检者作为正常对照组，分别检测AKA、APF、CCP以及RF，计算灵敏度和特异性并进行比对分析。结果RA组的RF、AKA、APF、CCP特异性分别是68.7%、68.7%、70.7%、77.8%，朝鲜族RA组敏感度分别是：69%、68%、69%、70%；汉族是68.4%、69.4%、72.4%、67.3%。结论RA组四种检测项目的敏感性和特异性均明显高于其它两组（P<0.01），是早期诊断RA的较好指标，且在朝汉两族RA患者间敏感性无显著差异（p>0.05）。

关键词：抗角质蛋白抗体；抗核周因子抗体；抗环瓜氨酸多肽抗体；类风湿因子；类风湿关节炎

ClinicalStudyonRheumatoidArthritisPatientsinYanbianPrefecturebyUsingJointdetectionofAKA、APF、CCPandRF

ZhangHongjiangJiangChunshan（ClinicalLaboratory，AffiliatedHospitalofYanbianUniversity，Yanji133000，Jilin）

【Abstract】Objective：Toinvestigatetheclinicalsignificanceofrheumatoidfactor（RF），anti-cycliccitrullinatedpepetide（CCP）antibodies，antiperinuclearfactor（APF）andantikeratinantibody（AKA）inthediagnosisofrheumatoidarthritis（RA）patients.Method：Atotalof198RApatients（RAgroup）（100Korean-ChinesepatientswererecruitedasRAgroupand98Han-Chinesepatients），92patientswithotheautoimmunediseases（non-RAgroup）and98healthysubjects（controlgroup）wereenrolledinthestudy.patients.TheconcentrationsofAKA.APF.CCPandRFweredetected，thespecificityandsensitivitywereanalyzed.Result：ThespecificityofRF、AKA、APFandCCPinRApatientswas68.7%、68.7%、70.7%and77.8%respectively.ThesensitivityinKorean-Chinesegroupwas69%、68%、69%、70%，66.0%and80.9%inHan-Chinesegroupwas68.4%、69.4%、72.4%、67.3%.Conclusion：ThereissignificantdifferenceinthesensitivityandspecificityofthreeantibodiesandRFintwoethnicgroups（p<0.01）whichmeansagooddiagnosticindexinearlyRA，whereasthereisnosignificantdifferenceinthesensitivitybetweentwoethnicgroups（P>0.05）.

【Keywords】anti-keratinantibodyanti-perinuclearfactorantibodyanti-cycliccitrullinatedpeptideantibodyrheumatoidfactorrheumatoidarthritis

RA是我国最常见的风湿病，其发生率为0.34%[1]，一直以来，临床对RA诊断主要依靠X线和实验室RF的检查，缺乏特异性，容易出现漏诊[2]。近年来，一些学者发现RA患者血清存有多种自身抗原和抗体，且已证明与组织病理损伤有着密切的关系[3]，其中以AKA、APF、CCP三种抗体的研究报导比较多，但针对于不同种群的相关研究尚未见报导。本研究选取延边地区朝鲜族RA患者作为观察对象，检测RF以及AKA、APF、CCP敏感性和特异性，旨在探讨其是否存在种族差异以及临床应用价值。

材料和方法

1．研究对象

研究对象均选取2013年7月至2015年9月在我院就诊患者及健康体检者。RA组：选取RA患者198例，（RA患者均符合2010年美国风湿学会联合欧洲抗风湿病联盟（ACR/EULAR）修订的RA诊断标准[4]），年龄18-75岁，其中延边地区朝鲜族100例（男43例，女57例，51-38岁）；汉族98例（男46例，女52例，54-26岁），病程均在5-160个月。非RA组：选取92例其他免疫系统疾病患者（男45例，女47例），年龄15-75岁，其中包括骨关节炎19例，系统性红斑狼疮15例，痛风病24例，风湿性关节炎12例，干燥综合症10例，肌炎/皮肌炎（PM/DM）12例。正常对照组：健康体检者98例（男40例，女58例），年龄16-67岁。

2．方法和试剂

CCP抗体用酶联免疫吸附试验（ELISA）法，试剂由欧洲诊断试剂公司（EURO-DIAGNOSTICA）提供，批号为Lot：SS3423，结果>25u/ml被确定阳性。AKA、APF均采用间接免疫荧光技术（IIF），两抗体试剂由北京和杰创新生物医学科技有限公司提供，批号分别为Lot：F2541g和Lot：F2951g。AKA抗原采用大鼠食管冰冻切片，阳性结果是食管角质层出现亮绿色荧光。APF抗原取自正常人的口腔两侧脱落的颊黏膜，阳性结果：荧光镜下，核周均质圆形、椭圆形荧光颗粒为阳性细胞，观察全片，阳性细胞大于5个为阳性标本。RF应用透射比浊法，仪器为西门子BNP特种蛋白仪，试剂及校准品为西门子公司提供，批号分别为Lot：183880/Lot：183859。正常值范围：0-15IU/ml。

3．统计学处理

采用SPSS10.0软件进行统计学分析。差异显著性检验用?2?检验，P<0.01为差异有统计学意义。

灵敏度=真阳性人数/（真阳性人数+假阴性人数）×100%；

特异性[2.5-6]=真阴性人数/（真阴性人数+假阳性人数）×100%。

结果

1.RA组四种检测项目的敏感性和特异性均明显高于其它两组（P<0.01），以CCP特异性最高，见表1。

讨论

RA是一种以慢性进行性关节病变为主的全身性免疫性疾病，特征表现为对称性、慢性、进行性多关节炎，可对骨关节造成不可逆性损伤[7.8]，并伴有全身多系统受累[9]。研究发现，根据RA发病早期的临床特点可大致判断其预后，某些临床及实验室指标对病情估计及指导用药很有意义，从而使大多数RA的病情可得到很好的控制，甚至完全缓解。因此，早期诊断有利于监测病情，判断预后，提高治疗水平。

许多研究证明RF是检测RA的主要指标，其检测方法简便，敏感性高，但是特异性不强[10]，表1显示RF的敏感度为68.7%，而特异性只有77%，是四种检测指标中最低的，与以往研究基本相符。近年来，研究发现了一系列诊断RA中较为特异的抗体如CCP、AKA、APF，三者在化学结构上具有一定的关联性。APF、AKA和CCP的靶抗原是上皮细胞分化终末阶段的细胞骨架成分丝聚蛋白（Filaggrin），而瓜氨酸是Filaggrin的组成成分，称为瓜氨酸相关的自身免疫系统[11-12]。大量研究认为抗CCP抗体和抗AKA抗体阳性可出现于早期RA患者的临床检测指标中，其对RA具有高特异性、高阳性预测值的特点，本研究结果也验证了这一点，表1显示AKA和CCP的特异性为93.4%和95.6%，可针对性地检出类风湿性关节炎患者，而AKA和CCP的敏感度为68.7%和77.6%，均高于以往报道中的40%-60%[13]，其原因还有待进一步研究。

据报道，对APF目前研究最多的是北欧人群，APF诊断RA的特异性95%以上，敏感性49%-87%之间[14]，其他未见地区性及族群报道。本研究选取中国朝鲜族主要聚居地—延边地区的朝鲜族作为观察对象，研究发现100例延边地区朝鲜族患者APF的敏感度为69%，与汉族的72.4%无明显差异（P﹥0.05）。除此之外，表2显示RF、AKA、CCP的敏感度在朝汉两族患者间亦无显著性差异（P﹥0.05），证明针对延边地区的RA患者，以上四种检测指标在朝鲜族和汉族之间敏感度无显著差异（P﹥0.05）。

综上所述，相比于传统指标RF，AKA、APF、CCP对RA的诊断具有较高的灵敏度、特异性和临床应用价值，可作为RA早期诊断的理想指标，联合检测有助于提高检出率，且四种指标在延边朝鲜族RA患者中无种族特异性，可广泛应用于本地区RA的诊断和辅助诊疗。

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