血清蛋白电泳的检验

(整期优先)网络出版时间:2012-12-22
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血清蛋白电泳的检验

王锋

王锋(哈尔滨市穆斯林医院150001)

【中图分类号】R46.11+2【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2012)24-0203-02

【摘要】目的讨论血清蛋白电泳的检验。方法对采集到的样本进行检验。结论血清蛋白组分、质或量的变化导致的蛋白质紊乱血症与许多疾病相关。因此在某些疾病时呈现互相有关联的某一蛋白质或一组蛋白质受损,血清蛋白电泳是对异常蛋白血症的主要检测辨认技术。在一些疾病存在时某一蛋白质或某一组蛋白质呈现反应性增高或降低。这些蛋白质包括前白蛋白、白蛋白、急性时相反应蛋白、转甲状腺素-转铁蛋白组和免疫球蛋白。

【关键词】血清蛋白电泳检验

一、概述

血清蛋白电泳(serumproteine1ectrophoresis,SPE)是利用蛋白质的等电点和分子大小的不同,在同一pH值缓冲液中所带电荷的差异性,在电场中泳动速度和方向不同,使不同的蛋白质分子具有不同的电泳迁移率,从而把血清蛋白分为不同的区带,然后进一步对其定量分析。血清蛋白电泳主要用于蛋白质紊乱血症的诊断,蛋白质被分离的主要目的是有助于医学诊断。

1.方法介绍血清蛋白电泳方法很多,有Tise1ius自由电泳,醋酸纤维素膜电泳,琼脂糖凝胶电泳,淀粉胶电泳,聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳,浓度梯度板状胶电泳,微型双向电泳等。电泳方法不同,分离血清蛋白的能力则有很大差异,如聚丙烯酰胺凝胶电泳可把血清蛋白分为20条左右区带,浓度梯度板状胶电泳可分为30条左右。目前,常采用醋酸纤维素膜电泳和琼脂糖凝胶电泳。

2.血清蛋白电泳分类把血清蛋白分为五条主要区带,从阳极到阴极依次命名为白蛋白带、α1球蛋白带、α2球蛋白带、β球蛋白带、γ球蛋白带。α1球蛋白多为糖蛋白,包括α1抗胰蛋白酶蛋白α2脂蛋白、类黏蛋白、α1易沉淀糖蛋白、低色氨酸α-糖蛋白等。在肝细胞内生成,在肝实质细胞病变时,其浓度下降,与血浆白蛋白浓度平行。α1球蛋白属急性时相反应蛋白,在急性细菌性感染和广泛癌肿时增高。α2球蛋白包括α2巨球蛋白、触珠蛋白、α2热稳定性糖蛋白、α2脂蛋白等。β球蛋白包括前β和β脂蛋白,在肝内和肝外胆汁淤积,特别是慢性胆汁淤积并伴高脂血症时,可有明显增高。急性肝衰竭时,α2和β球蛋白可能降的很低。γ球蛋白为免疫球蛋白,由B淋巴系统的浆细胞生成,肝胆疾病时,γ球蛋白增高。

3.参考范围

4.检查指征作为下列患者的疾病监控和诊断。

(1)急、慢性感染性疾病。

(2)蛋白丢失综合征(肾、胃肠道、皮肤、渗出液和漏出液)。

(3)单克隆丙球蛋白血症。

(4)在常规实验室可以观察到的异常结果。红细胞沉降率加快,蛋白尿,血清总蛋白浓度增高或降低。

二、血清蛋白电泳异常常见疾病

1.低蛋白血症型如营养不良,吸收不良,非选择性蛋白漏失。

2.重症肝脏损伤型如重症肝炎,肝硬化。

3.急性炎症如急性感染。

4.慢性炎症如慢性感染、风湿病。

5.蛋白丢失如肾病综合征。

6.单或多克隆高球蛋白血症型如恶性、良性M蛋白血症、多发性骨髓瘤,重链病。

7.无γ球蛋白血症如IgG缺乏症。

三、临床思路

(一)除外非疾病因素

1.必须采用血清如果采用血浆可在β球蛋白区形成一条额外的纤维蛋白质区带。

2.避免标本溶血溶血的标本在α2-β之间产生一条额外的游离血红蛋白的区带。

3.血清标本须新鲜在陈旧血清标本中,免疫球蛋白降解产物也会引起额外的条带。

(二)病理性电泳图形

血清蛋白组分、质或量的变化导致的蛋白质紊乱血症与许多疾病相关。因此在某些疾病时呈现互相有关联的某一蛋白质或一组蛋白质受损,血清蛋白电泳是对异常蛋白血症的主要检测辨认技术。在一些疾病存在时某一蛋白质或某一组蛋白质呈现反应性增高或降低。这些蛋白质包括前白蛋白、白蛋白、急性时相反应蛋白、转甲状腺素-转铁蛋白组和免疫球蛋白。

1.白蛋白任何情况下白蛋白含量降低与球蛋白(α、β、γ)绝对值上升有关联,总蛋白通常保持在参考范围内。

2.急性时相反应蛋白迁移在α1和α2球蛋白间,急性炎症时可升高50%~300%。急性肝炎、慢活肝和蛋白丢失综合征时呈降低。

3.免疫球蛋白γ-球蛋白的意义,在于区分急性肝炎(其值正常或稍高)和肝硬化(其值增高明显),它随肝炎慢性化而增加,可帮助识别从急性肝炎向肝硬化转变。在慢性肝炎活动期和失代偿的肝炎肝硬化期,γ-球蛋白增高最显著,在慢性血吸虫病和酒精性肝硬化失代偿期,也常增高,而在各种原因的代偿期肝硬化时则常正常。在急性肝炎时,γ-球蛋白正常或暂时性轻度增高,如持续性增高。提示向慢性发展。

肝胆疾病时,γ-球蛋白增高可由于①肝内炎症反应,特别是慢性炎症反应,在组织病理学上有浆细胞浸润。②自身免疫反应,自身抗体形成过多。③从肠道内吸收过多的抗原(如细菌抗原),刺激B淋巴细胞,形成过多的抗体。④血浆白蛋白降低,γ-球蛋白相对地增高。

免疫球蛋白具有抗体功能,呈现在γ球蛋白区,也有部分出现在β球蛋白区。免疫球蛋白的增高可被视为丙球蛋白血症。

4.单或多克隆丙球蛋白血症是由于某些疾病激活了人体免疫系统,在γ-球蛋白区形成一种宽基准型的为多克隆丙球蛋白血症;在球蛋白区形成一条细而窄M区带,通常称为M成分或M蛋白或M带,M带与骨髓瘤、巨球蛋白血症和单克隆有关,是由单一浆细胞株过度增殖所产生的一种型、一种亚型或一种轻链型的免疫球蛋白或免疫球蛋白片段所致。在临床上主要见于单发或多发性骨髓瘤,Wa1denstrom巨球蛋白血症。

(三)血清蛋白电泳病理性异常

1.肝脏疾病

(1)急性肝炎早期或病变较轻时:电泳结果多无异常。但随病情加重和时间延长,电泳图形可改变,表现为白蛋白减少;α1、α2和β球蛋白有减少倾向(高血脂时β球蛋白亦可增高);γ球蛋白增高,因为受损肝细胞作为自身抗原刺激淋巴系统,使γ球蛋白生成增加,A/G值倒置,提示肝功能损伤比较严重。

(2)肝硬化:血清蛋白电泳可有明显的变化,白蛋白中度或重度减少,α1、α2百分比减低,γ球蛋白明显增加。并可出现β-γ桥,即从β区到γ区连成一片难以分开,扫描时两区间峰谷很浅。β-γ桥出现的原因系由多克隆性IgA、IgM、IgG同时增加,特别当IgA明显升高所致,有研究认为IgA增高到正常的3倍以上时患者100%可出现β-γ桥。

(3)肝癌:此类患者血清蛋白电泳均有改变,α1、α2球蛋白百分比明显增高,有时可见于白蛋白和α1球蛋白的区带之间出现一条甲胎蛋白区带,具有诊断意义。

2.肝外疾病

(1)肾病型:由于尿中排出大量白蛋白而使血清中白蛋白明显下降,α2及β球蛋白(为脂蛋白主要成分)增高,见于肾病综合征和糖尿病肾病时。

(2)M蛋白血症型:表现为白蛋白轻度减低,单克隆γ球蛋白(亦有β球蛋白)明显增高,偶有α球蛋白增高;在γ区带、β区带或β与γ区带之间出现致密浓集,峰型明显的M蛋白区带,见于多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症等。

(3)炎症型:表现为α1、α2、β三种球蛋白均增高,见于各种急、慢性炎症和应激反应。

(4)其他型:结缔组织病常伴有γ球蛋白增高;先天性低γ球蛋白血症时γ球蛋白减低;蛋白丢失性肠病表现为白蛋白及γ球蛋白减低,α2球蛋白增高。

注意:在应用血清蛋白测定诊断肝病时,应注意很多其他疾病,如急、慢性感染,恶性肿瘤(特别是淋巴和血液系统恶性肿瘤,如MM),结缔组织疾病,胃肠道疾病和营养不良等,均可有A/G的变化,要做好鉴别诊断。

参考文献

[1]陶华林,曾付兰,吴泽才.蛋白电泳扫描积分在肾脏疾病中的临床应用[J].现代检验医学杂志;2003年02期.

[2]沈波,张慧斐,许玲鸽,王冬莲,陆如岳.临产妇血清蛋白电泳谱分析[J].中华检验医学杂志;2002年05期.