RP-HPLC法测定宁坤养血丸中肉桂以桂皮醛的含量

RP-HPLC法测定宁坤养血丸中肉桂以桂皮醛的含量

蔡云芳

蔡云芳(江苏常州金坛市人民医院213200)

【摘要】目的RP-HPLC法测定宁坤养血丸中肉桂以桂皮醛的含量。方法采用十八烷基硅烷键合硅胶柱；流动相：乙腈—水(55:45)，检测波长为290nm；流速为1.0ml/min。结果线性范围0.103～0.07mg，平均回收率为99.8%，RSD=0.4%(n=5)。结论方法简便，结果准确。能有效控制宁坤养血丸的质量。

【关键词】宁坤养血丸桂皮醛HPLC

【中图分类号】R927.2【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2012）33-0046-02

宁坤养血丸是秉承中医理论并结合现代医学的研制方法创新研究的一种中成药。本文通过RP-HPLC法测定宁坤养血丸中肉桂以桂皮醛的含量，进一步提高了该药标准，方法简便、快速，重现性好。

1仪器与试药

1.1仪器

SK250LH超声波清洗器（上海科导超声仪器有限公司）；BP211D型电子天平（赛多利士）；waters2695高效液相色谱仪，ZOL-3KVADAD检测器（美国WATERS公司）

1.2试药

桂皮醛对照品(中国药品生物制品检定所110710-201212)；乙腈为色谱纯；水为二次重蒸水；宁坤养血丸（长春长红制药股份有限公司，批号20090301：，吉林天力泰药业有限公司20090224，黑龙江铁力红叶制药有限责任公司20091007）

2实验方法

2.1色谱条件

色谱柱：SymmetryC-18柱（3.9mm×150mm，5um），流动相：乙腈—水(55:45)，流速：1.0mL/min，检测波长290nm，理论塔板数：6700。

2.2对照品溶液制备：

精密称取桂皮醛对照品适量，加流动相稀释成11ug/ml的溶液。

2.3样品溶液的制备

精密量取本品适量，剪碎，过（三号筛），取约4g，精密称定，置50mL量瓶中，加甲醇45mL，超声处理（功率300W，频率50kHz）1小时，取出，放冷，用甲醇稀释至刻度，滤过，取续滤液，即得。

图1桂皮醛对照品色谱图图3样品色图谱

2.4标准曲线制备的制备

取桂皮醛对照品溶液11.40μg/ml.，分别进样1.0、2.0、3.0、4.0、5.0μl，以峰面积（y）为纵坐标，相应浓度（x）为横坐标进行线性回归，y=1.8121x+0.9600，R=0.9999，线性范围0.103～0.07mg。结果表明峰面积与浓度呈良好的线性关系。

2.5精密度测定

取桂皮醛对照品溶液，重复进样5次，记录峰面积分别为48377976.82、48407976.10、48392675.33、48417653.24、48374539.21。平均值为48394164.14。RSD为0.1%。

2.6重复性测定

按照拟订的含量测定方法，取同批号样品5份，分别制备样品供试液，在上述色谱条件下测定5次，桂皮醛的RSD为1.06%。

2.7稳定性试验

在本试验条件下，样品溶液室温放置12h，每隔一段时间进样10μL记录峰面积。桂皮醛峰面积平均值为48777796.6，RSD分别0.9%。

2.8回收率试验

取桂皮醛适量配制成11.5139ug/ml，取1.0ml加入到样品中照样品测定法测定，测得结果:桂皮醛回收率平均值为99.55%,RSD为0.6%。

2.9样品测定

取样品溶液和对照品溶液，各进样10μL，读取峰面积值，按外标法计算含量，结果见表。

表样品含量测定结果（n=3）

3讨论

3.1通过实验得知在290nm处有较大吸收，其它成分在该波长处无干扰，因此可选择此波长作为检测波长。

3.2实验过程中曾尝试乙腈-水(55:45)[1]及0.1％磷酸-乙腈(30:70)[2]为流动相，经比较得知选用乙腈—水(65:35)，比例最佳，峰形及柱效较好。

3.3通过试验,确定了宁坤养血丸中肉桂以桂皮醛含量测定方法，测定结果可靠，方法简便，为宁坤养血丸的质量控制提供了依据。

参考文献

[1]国家药典委员会，中国药典，2010年版一部，化学工业出版社，2010，129.

[2]中华人民共和国卫生部药典委员会，中华人民共和国卫生部药品标准一部一册.1993，58.