非淋球菌性生殖道感染患者的UU和CT感染分析

非淋球菌性生殖道感染患者的UU和CT感染分析

冯国钢

冯国钢（百色市人民医院检验科广西百色533000）

【摘要】目的了解本地区非淋球菌性生殖道感染患者的解脲支原体(UU)和沙眼衣原体(CT)感染情况。方法采用实时荧光聚合酶链反应方法(FQ－PCR)对694例疑为非淋球菌性生殖道感染患者同时检测UU和CT。结果经检测UU阳性248例，阳性率为34.7%（248/694）；CT阳性86例，阳性率为12.4%（86/694）；两者混合感染阳性为54例，阳性率为7.8%（54/694）；解脲支原体阳性率明显高于沙眼衣原体，两者比较差异有统计学意义(P＜0.05)；女性感染率高于男性，两者感染率比较差异有统计学意义(P＜0.05)。结论本地区解脲支原体是非淋球菌性生殖道感染患者的主要病原体，FQ-PCR能快速、准确的定量检测病原体，及时为临床治疗和诊断提供依据。

【关键词】荧光聚合酶链反应生殖道感染解脲支原体沙眼衣原体

【中图分类号】R446【文献标识码】A【文章编号】2095-1752（2013）16-0088-02

解脲脲原体(UU)和沙眼衣原体(CT)是引起非淋球菌性生殖道感染的主要病原体，其引起的是一种性传播疾病(STD)，因其传染性强，对人类健康危害性大，是我国重点防治的STD之一。荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR)法是最敏感的核酸扩增技术之一，可在较短的时间获得结果，且可对病原体进行DNA定量分析，有助于了解其病毒载量与疾病的关系；同时克服了传统PCR扩增产物污染和不能定量的问题；目前已经广泛应用于临床和流行病学研究。为了解本地区非淋球菌性生殖道感染患者的解脲支原体(UU)和沙眼衣原体(CT)感染情况，作者采用FQ－PCR对347例非淋球菌性生殖道感染的泌尿生殖道分泌物进行UU和CT检测，现报告如下。

1资料与方法

1.1一般资料：694例病例均为2009年3月至2012年12个月来到我院妇科和泌尿外科门诊就诊的疑似非淋球菌性生殖道感染患者，其中男性279名，女性415名，年龄17～69岁。

1.2标本采集方法：男性先用消毒棉签将尿道口分泌物擦干净，患者自行挤压阴茎数次后，用无菌棉拭子浸润生理盐水轻轻伸入尿道2～2.5cm，旋转360度，再停留约15秒获得细胞材料后取出立即送检；也可以留取前列腺液；女性：清除阴道及宫颈口分泌物，无菌绵浸润生理盐水拭子插入宫颈管内1～2cm，轻轻旋转后取出，取样拭子不可碰阴道壁，标本取出后立即送检。采集的标本置于约含1ml的无菌生理盐水离心管中备用。

1.3仪器与试剂：仪器是澳大利亚生产的，型号为Rotor-Gene-3000的扩增仪；FQ-PCR试剂均为上海科华生物公司生产的商品化试剂盒，严格按照说明书进行操作。

1.4病原体DNA提取：将盛有标本的离心管漩涡振荡混合，棉拭子则管壁挤出其中水分，悬浮混匀，取1ml待测样本于1.5ml离心管中，12000rpm离心5分钟，弃上清液，在沉淀中加入DNA提取液50μl，在恒温金属浴中100℃恒温处理10±1分钟,12000rpm离心5分钟，取上清液2μl进行PCR反应。

1.4检测方法采用实时荧光定量PCR技术，对病原体基因进行定量检测。

1.5统计学处理方法：采用SPSS11.0统计软件包进行数据分析，计数资料率的比较采用χ2检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1694份泌尿生殖道感染患者泌尿生殖道分泌物中，UU-DNA阳性248例，阳性率为34.7%（248/694）；CT-DNA阳性86例，阳性率为12.4%（86/694）；两者混合感染阳性为54例，阳性率为7.8%（54/694）；解脲支原体阳性率明显高于沙眼衣原体，两者比较差异有统计学意义（χ2=102.2，χ2（0.05）=3.84，χ2＞χ2（0.05），P＜0.05）；说明本地区泌尿生殖道感染患者病原体主要为UU。

2.2不同性别患者的检出阳性率不同248例UU阳性病例中，男性为60例，女性为188例；86例CT阳性中男性为35例，女性为51例，女性感染率高于男性，两者感染率比较差异有统计学意义(P＜0.05)。

3讨论

解脲支原体和沙眼衣原体都是寄生在泌尿生殖道的病原体，主要通过不洁性行为性接触感染，其中沙眼衣原体是一种专性细胞内寄生的原核细胞微生物，常导致逆行感染引起男性附睾炎、前列腺炎和女性盆腔炎，进而引起不孕不育。而UU是微生物中固有的一群大小介于细菌和病毒之间、无坚硬的细胞壁、呈多形性、能在无活动细胞培养基中繁殖的最小微生物。可引起如前庭大腺炎、阴道炎、宫颈炎等下生殖道感染，亦可引起子宫内膜炎、输卵管炎、卵巢炎、盆腔炎等上生殖道感染。是引起性传播疾病(STD)的主要病原体。近年来我国STD的发病率呈逐年上升趋势[1]。由CT和UU感染所致的非淋球菌尿道炎(NGU)增长更为明显，淋球菌引起的泌尿生殖感染率虽然逐年下降，但在STD中仍居重要地位[2,3]。

目前，泌尿生殖道感染患者病原体检测常用方法有：直接镜检法、培养法、抗原抗体检测(如血清学检查法、免疫组织化学法)及分子生物水平的检测等通过基因扩增，将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍，从而大大提高对DNA分子的分析和检测能力，其高度的敏感性及特异性，越来越显示出巨大的临床应用价值和广阔的发展前景。FQ-PCR技术不仅解决了检出率低、周期长的问题，而且克服了常规PCR技术假阳性率高的缺陷。FQ-PCR技术是在闭管状态下进行扩增和产物分析，无需电泳和染色及紫外观察，极大地减少了扩增产物的污染，同时也避免了有害化学物质对人体的危害，具有较高的特异性和敏感性，操作简便、快速、准确，是进行临床诊断及流行病学检测的一种较好的方法[4]。本资料采用荧光定量PCR技术对新694例疑似泌尿感染者进行UU和CT检测，其中UU-DNA阳性阳性率为34.7%，CT-DNA阳性率为12.4%，UU感染率高于CT；男性阳性率为21.5%（60/279），女性阳性率为45.3%（188/415），高于欧阳耀灵[5]等参考文献，这可能与病例组成、地区差异及不同地区人群的生活习惯不同等因素有关。总之，实时荧光聚合酶链反应方法(FQ－PCR)对标本采集的要求不如培养严格，检测时间短，相比免疫学方法又具有高敏感性和特异性，可作为临床检测的解脲支原体和沙眼衣原体的实验方法。

参考文献

[1]姚敏,阮国杰.海口市STD患者6种病原体检测结果分析[J].中国热带医学,2005,5(6):1318-1319,1362.

[2]高会广,王彩红,等.淋球菌合并沙眼衣原体、解脲支原体感染情况分析[J].中国预防医学杂志,2009,10(1):61-62.

[3]陈暖,彭学宏,李粉莲.FQ-PCR检测淋球菌、沙眼衣原体、解脲支原体[J].中国实用医药,2008,3(20):49-51.

[4]李晗,陶国华,等.用荧光PCR检测泌尿生殖道解脲脲原体和沙眼衣原体[J].临床检验杂志,2007,25(4):311-2.

[5]欧阳耀灵，卢亚祖，林静，等.532例患者淋球菌沙眼衣原体和解脲支原体DNA定量(FQ-DNA)检测分析[J].中国优生与遗传杂志，2009，17(7):34－35.